11 Número de publicación: Int. Cl. 7 : A61K 38/ Agente: Tavira Montes-Jovellar, Antonio

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1 19 OFICINA ESPAÑOLA DE PATENTES Y MARCAS ESPAÑA 11 Número de publicación: Int. Cl. 7 : A61K 38/21 A61K 38/19 A61K 38/18 // (A61K 38/21 A61K 31:70) 12 TRADUCCIÓN DE PATENTE EUROPEA T3 86 Número de solicitud europea: Fecha de presentación: Número de publicación de la solicitud: Fecha de publicación de la solicitud: Título: Terapia de infusión continua de citocinas a baja dosis. Prioridad: US 61 P 73 Titular/es: SCHERING CORPORATION 00 Galloping Hill Road Kenilworth, New Jersey , US 4 Fecha de publicación de la mención BOPI: Inventor/es: Cutler, David, L. y Affrime, Melton, B. 4 Fecha de la publicación del folleto de la patente: Agente: Tavira Montes-Jovellar, Antonio ES T3 Aviso: En el plazo de nueve meses a contar desde la fecha de publicación en el Boletín europeo de patentes, de la mención de concesión de la patente europea, cualquier persona podrá oponerse ante la Oficina Europea de Patentes a la patente concedida. La oposición deberá formularse por escrito y estar motivada; sólo se considerará como formulada una vez que se haya realizado el pago de la tasa de oposición (art del Convenio sobre concesión de Patentes Europeas). Venta de fascículos: Oficina Española de Patentes y Marcas. C/Panamá, Madrid

2 1 ES T3 2 DESCRIPCIÓN Terapia de infusión continua de citocinas a baja dosis. Campo de la invención La invención se refiere a la fabricación de un medicamento para tratar ciertos estados médicos, en particular infecciones víricas de hepatitis, que son susceptibles a tratamiento con la citocina del interferón alfa, que comprende la administración continua de una dosis baja de esta citocina. En una realización preferida de la invención, la infusión de dosis baja continua de interferón alfa se usa para tratar la hepatitis C crónica. Antecedentes de la invención Los interferones son una familia de proteínas y glicoproteínas pequeñas que existen de manera natural, producidas y secretadas por la mayoría de las células nucleadas, en respuesta a una infección vírica así como a otros estímulos antigénicos. Los interferones hacen a las células resistentes a la infección vírica y exhiben una amplia variedad de acciones en las células. Ejercen sus actividades celulares uniéndose a receptores específicos de la membrana en la superficie de la célula. Una vez unidos a la membrana de la célula, los interferones inician una secuencia de eventos intracelulares compleja. Los estudios in vitro demostraron que estos incluyen la inducción de ciertas enzimas, la supresión de la proliferación celular, actividades inmunomodulantes por ejemplo, el aumento de la actividad fagocítica de macrófagos y aumento de la citotoxicidad específica de linfocitos para las células diana, y la inhibición de la replicación del virus en células infectadas con virus. Los interferones no inmunes, que incluyen tanto interferones alfa como beta, se sabe que suprimen el virus de inmunodeficiencia humana (VIH) tanto en células aguda como crónicamente infectadas. Poli y Fauci, 1992, AIDS: Research and Human Retroviruses 8(2) : Los interferones, en particular, los interferones alfa, han recibido atención considerable como agentes terapéuticos en el tratamiento de la enfermedad relacionada con el virus de la hepatitis C (VHC) debido a su actividad antivírica. Hoofnagle y otros, en: Viral Hepatitis 1981 International Symposium, 1982, Filadelfia, Franklin Institute Press; Hoofnagle y otros, 1986, New. Eng. J. Med. 31:17-178; Thomson, 1987, Lancet 1:39-41 Kiyosawa y otros, 1983, en : Zuckerman, editor, Viral Hepatitis and Liver Disease, Allen K, Liss, Nueva York páginas 89 a 897; Hoofnagle y otros, 198, Sem. Liv. Dis., 198, 9: La hepatitis C crónica es una enfermedad insidiosa y lentamente progresiva que tiene un impacto significativo en la calidad de vida. A pesar de la mejora en la calidad de los depósitos de donantes de sangre y la implementación reciente de la prueba del VHC en la sangre donada, la incidencia calculada de la infección aguda entre personas que reciben transfusiones es del por ciento al por ciento. Alter y otros, en: Zuckerman, editor. Viral Hepatitis and Liver Disease, Allen K. Liss. Nueva York, 1988, páginas 37 a 42. Por lo tanto, de las aproximadamente tres millones de personas que reciben transfusiones en los Estados Unidos cada año, la hepatitis C aguda se desarrollará en aproximadamente.000. Aun cuando muchos pacientes que contraen hepatitis C tendrán una enfermedad subclínica o leve, aproximadamente el 0 por ciento avanzará hasta un estado de enfermedad crónica, caracterizado por fluctuación de anormalidades de transminasa en suero y lesiones inflamatorias en la biopsia del hígado. Se calcula que se desarrollará la cirrosis en hasta aproximadamente el por ciento de este grupo. Koretz y otros, 198, Gastroenterology 88: Se sabe que los interferones afectan una variedad de funciones celulares, incluyendo la replicación del ADN y la síntesis de ARN y proteínas, tanto en las células normales como anormales. Por lo tanto, los efectos citotóxicos del interferón no se restringen a tumores o a células infectadas con virus, sino que se manifiestan también en células sanas normales. Como resultado, se suscitan efectos secundarios indeseables durante la terapia con interferón, particularmente cuando se requieren dosis elevadas. La administración de interferón puede conducir a mielosupresión dando como resultado niveles reducidos de glóbulos rojos, leucocitos y plaquetas. Las dosis más elevadas de interferón comúnmente dan lugar a síntomas semejantes al resfriado (fiebre, fatiga, dolores de cabeza y escalofríos), transtornos gastrointestinales (por ejemplo, Anorexia, nausea y diarrea), vértigo y tos. El interferón alfa-2b se ha demostrado que es seguro y efectivo cuando se administra subcutáneamente a una dosis de 3 x 6 unidades internacionales (UI) tres veces a la semana durante 24 semanas para el tratamiento de la hepatitis C crónica. Causse y otros, 1991, Gastroenterology 1:497-02; Davis y otros, 1989, New Eng. J. Med., 321:1-6; Marcellin y otros, 1991, Hepatology, 13(3): Esta cantidad y duración alivia los síntomas de la hepatitis C y la evidencia bioquímica o histológica de la inflamación en marcha del hígado en algunos pacientes, pero ocasiona también efectos secundarios indeseables, por ejemplo, síntomas semejantes al resfriado. Aun cuando Carreno y otros (Journal of Medical Virology, 1992, 37:21-219) informó del tratamiento de pacientes con hepatitis C crónica con una dosis diaria de 9 x 6 unidades internacionales de Roferon A administrado durante 28 días mediante infusión subcutánea continua a pacientes con hepatitis C criónica, todos los doce pacientes tratados tuvieron síntomas semejantes al resfriado y fiebre. Durante la primera semana del tratamiento, ocho pacientes experimentaron dolor de cabeza y artralgias. Ocho pacientes experimentaron cierta pérdida del cabello, nueve pacientes sufrieron pérdida de peso de entre 2 a kilogramos y once pacientes tuvieron disminuciones en los recuentos de plaquetas y de leucocitos. Aun cuando se dieron a conocer disminuciones significativas en los niveles de ALT en suero, el ARN del VHC permaneció positivo durante el período de tratamiento. La infusión continua de interferón también se ha usado en el tratamiento de pacientes de cáncer. Véase Dorr y otros, 1988, Journal of Interferon Research, 8:717-72, que da a conocer infusión subcutánea continua durante 28 días de Roferon A a dosis de 0,7 x 6 a,0 x 6 unidades internacionales por metro cuadrado de área superficial de cuerpo, y Ludwig y otros, 1986, Proc. Am. Soc. Clin. Oncol. :234, Compendio, 91, que da a conocer una infusión subcutánea continua de 3-18 x 6 unidades internacionales por día de Roferon A durante períodos de más de 3 meses. Los efectos secundarios indeseables, tales como aquellos que acompañan la terapia con interferón,

3 3 ES T3 4 ocurren también en los protocolos de tratamiento que emplean otras citocinas. Estos efectos secundarios frecuentemente limitan la utilidad terapéutica de estos agentes. Por lo tanto, existe una necesidad de reducir o eliminar los efectos secundarios indeseables de la terapia con citocina, sin disminuir los beneficios terapéuticos de esta terapia. Compendio de la invención La presente invención llena esta necesidad proporcionando el nuevo uso de interferón alfa en la fabricación de un medicamento para tratar infecciones víricas de hepatitis C, en donde los efectos secundarios indeseables normalmente asociados con estos tratamientos disminuyen significativamente o se eliminan enteramente. De acuerdo con la invención, se proporciona el uso de interferón alfa en la fabricación de un medicamento pata tratar una infección vírica de hepatitis C en un ser humano, en el que dicho medicamento es para se administrado al ser humano en una cantidad de interferón alfa de 2 millones de UI por semana a millones de UI por semana, en el que la administración mantiene concentraciones en suero del interferón alfa en un nivel estacionario durante la duración del tratamiento. La invención se dirige particularmente a la fabricación de medicamentos para tratar una infección vírica por hepatitis C mediante administración continua a un huésped mamífero infectado con el virus de hepatitis C, de una cantidad de dosificación baja de interferón, de preferencia interferón alfa, de mayor preferencia interferón alfa-2b. Descripción detallada de la invención Se ha descubierto inesperadamente que la administración continua de dosis bajas de interferón alfa a lo largo de una período de tiempo prolongado, proporciona beneficios terapéuticos efectivos mientras que disminuye significativamente los efectos secundarios indeseables asociados normalmente con los regímenes de tratamiento practicados convencionalmente. Particularmente, la práctica de la invención da como resultado efectos secundarios considerablemente reducidos o eliminados en comparación con el tratamiento con interferón convencional. Al realizar la invención, el interferón alfa puede usarse solo o en combinación con otras citocinas y/o agentes terapéuticos. Por ejemplo, el interferón alfa puede usarse solo o en combinación con ribavirina en el tratamiento de VHC. El término interferón, tal como se usa en la presente memoria significa la familia de proteínas específicas de especies altamente homólogas que inhiben la replicación vírica y la proliferación celular y modulan la respuesta inmune. Los interferones humanos están agrupados en tres clases basándose en su origen celular y antigenicidad: interferón alfa (leucocitos), interferón beta (fibroblastos) e interferón gamma (Células T). Las formas recombinantes de cada grupo se han desarrollado y pueden obtenerse comercialmente. Los subtipos de cada grupo se basan en características antigénicas/estructurales. Por lo menos se han identificado 14 interferones alfa (agrupados en los subtipos A a H) que tienen una secuencia de aminoácidos distinta, aislando y codificando en secuencia el ADN que codifica estos péptidos. Tanto los interferones alfa-beta y gamma que existen de manera natural y los recombinantes, incluyendo el interferón de consenso, pueden usarse en la práctica de la invención La purificación del interferón de los leucocitos humanos aislados de la fracción de la capa estabilizadora de la sangre entera, se describe en la Patente Norteamericana Número El interferón de leucocito humano preparado de esta manera contiene una mezcla de secuencias de aminoácidos de interferón de leucocito humano diferentes. Los interferones alfa humanos naturales purificados y mezclas de los mismos que pueden usarse en la práctica de la invención incluyen, pero no quedan limitados a, Sumiferon, el interferón alfa-n1 que puede obtenerse de Sumitomo, Japón, Wellferon, interferón alfa-n1 (Ins) obtenible de Glaxo-Wellcome Ltd. de Londres, Gran Bretaña, y Alferon, el interferón alfa-n3 obtenible de Purdue Frederick Co. de Norwalk, CT. El advenimiento de la tecnología de ADN recombinante aplicada a la producción de interferón ha permitido que varios interferones humanos se sinteticen satisfactoriamente, permitiendo de esta manera la fermentación, producción, aislamiento y purificación a gran escala de varios interferones a homogeneidad. El interferón producido recombinantemente retiene sus actividades antivirales e inmunomoduladoras in vitro e in vivo. También se comprenderá que las técnicas recombinantes podrían también incluir un sitio de glicosilación para la adición de un resto de carbohidrato en el polipéptido derivado recombinantemente. La construcción de los plásmidos de ADN recombinantes que contiene secuencias que codifican que por lo menos parte del interferón del leucocito humano y la expresión en E. coli de un polipéptido que tiene actividad inmunológica o biológica del interferón de leucocito humano se describe en la patente norteamericana número La construcción de genes de interferón alfa híbrido que contienen combinaciones de secuencias de subtipo diferentes (por ejemplo, A y D, A y B, A y F) se describe en las patentes norteamericanas número , y , Los interferones alfa recombinantes apropiados típicos que pueden usarse en la práctica de la invención incluyen, pero se limitan a, interferón alfa-2b tal como Intron A que puede obtenerse de Schering Corporation, de Kenilworth, N.J., el interferón alfa-2a tal como Roferon A que puede obtenerse de Hoffmann-La Roche, de Nutley, N.J. y el interferón alfa-2c tal como Berofor que puede obtenerse de Boehringer Ingelheim Pharmaceutical, Inc., del Ridgefield, CT. La patentes norteamericanas números y describen polipéptidos del interferón de leucocitos humano, a los cuales se hace referencia como interferón de consenso, que tienen secuencias de aminoácido que incluyen aminoácidos comunes o predominantes encontrados en cada posición entre los polipéptidos del subtipo de interferón alfa que existen de manera natural. El interferón de consenso que también puede usarse en la práctica de la invención puede obtenerse de Amgen, Inc. De Newbury Park, CA. Los interferones beta apropiados que pueden usarse para llevar a la práctica la invención incluyen, pero no se limitan a, Betaseron, interferón beta-1b, una muteina sintética que tiene una serina que sustituye a un residuo de cisteina en la posición 171 de la molécula nativa, que puede obtenerse de Berlex Laboratories, de Richmond, CA. Los interferones gamma apropiados que pueden usarse para llevar a la práctica la invención incluyen, pero no se limitan a, Actimmune, un interferón recombinante gamma-1b 3

4 ES T3 6 obtenible de Genentech, South San Francisco, CA. Los estados ilustrativos que pueden tratarse con interferón incluyen, pero no se limitan a, trastornos de proliferación de células, en particular cáncer (por ejemplo, leucemia de células iloses, sarcoma de Kaposi, leucemia mielogenosa crónica, mieloma múltiple, carcinoma de células basales y melanoma maligno, cáncer ovárico, linfoma de células T cutáneo) e infecciones víricas. Sin limitación, el tratamiento con interferón puede usarse para tratar estados que se beneficiarían de inhibir la replicación de virus sensibles al interferón. Las infecciones víricas que pueden tratarse de conformidad con la invención incluyen hepatitis A, hepatitis B, hepatitis C, otras hepatitis que no son ni A/ni B, herpes virus (virus Epstein- Barr (EBV), citomegalovirus (CMV), herpes simples, herpes virus humano del tipo 6 (VHH-6)), papiloma, poxvirus, picornavirus, adenovirus, rinovirus, virus linfotrópico humano T del tipo 1 y 2 (HTLV-1/- 2), rotavirus humano, rabia, retrovirus que incluye el virus de inmunodeficiencia humana (VIH), encefalitis e infecciones víricas respiratorias. El método de la invención también puede usarse para modificar las distintas respuestas inmunes. Dos variantes de interferón alfa se han aprobado en la actualidad en los Estados Unidos y otros países para el tratamiento de la leucemia de células pilosas, verrugas venéreas, sarcoma de Kaposi y hepatitis crónica que no es A/no es B: el interferón alfa-2b, vendido bajo el nombre comercial INTRON A (Schering Corporation, de Kenilworth NJ) y el interferón alfa- 2a, vendido bajo el nombre comercial de Roferon A (Hoffmann-La Roche, de Nutley, NJ). Puesto que el interferón alfa-2b, entre todos los interferones, tiene la aprobación más amplia en todo el mundo para tratar una infección de hepatitis C crónica, es especialmente preferido para usarse en el tratamiento de la hepatitis C crónica de conformidad con la práctica de la invención. Una persona que padece una infección de hepatitis C crónica puede exhibir uno o más de los siguientes síntomas o señales: (a) ALT elevada, (b) prueba positiva para los anticuerpos anti-vhc, (c) presencia de VHC como se demuestra mediante una prueba positiva de HVC-ARN, (d) estigmas clínicos de la enfermedad crónica de hígado, (e) daño hepatocelular. Estos criterios no solamente pueden usarse para diagnosticar la hepatitis C, sino pueden usarse también para evaluar una respuesta del paciente al tratamiento con el fármaco. La aminotransferasa alanina en suero (ALT) elevada y la aminotransferasa aspartato (AST) elevada se sabe que ocurren en la hepatitis C no controlada y una respuesta completa al tratamiento por lo general se define como la normalización de estas enzimas en suero, particularmente la ALT (Davis y otros, 1989, New. Eng. J. Med. 321:1-6). La ALT es una enzima que se libera cuando las células del hígado se destruyen y es sintomática de la infección por VHC. El interferón ocasiona la síntesis de la enzima la 2 -oligoadenilato-sintetasa (2 OAS) que a su vez da como resultado la degradación del ARNm vírico. Houglum, 1983, Clinical Pharmacology 2:-28. Los aumentos en los niveles en suero de la 2 OAS coinciden con la disminución en los niveles de ALT. A fin de seguir el curso de la replicación de VHC en pacientes en respuestas al tratamiento con el fármaco, el ARN del VHC puede medirse en muestras de suero mediante, por ejemplo, un ensayo de reacción de cadena polimerasa anidado que usa dos juegos de cebadores derivados de las regiones del gen no estructurales NS3 y NS4 del genoma VHC. Farci y otros, 1991, New Eng. J. Med. 32:98-4. Ulrich y otros, 1990, J. Clin. Invest. 86: El examen histológico de las muestras de biopsia del hígado pueden usarse como un segundo criterio para la evaluación. Véase por ejemplo, de Knodell y otros, 1981, Hepatology 1:431-43, cuyo Índice de Actividad Histológica (inflamación portal, necrosis parcelar o puente, daño lobular y fibrosis) proporciona un método de puntuación para la actividad de la enfermedad. En la práctica de la invención, se administra continuamente una dosis baja de interferón a un mamífero, en particular a un paciente humano que exhibe uno o más de los síntomas o señales anteriormente citados, en una cantidad y durante un período de tiempo suficiente para eliminar o por lo menos aliviar uno o más de los síntomas o señales anteriormente mencionados. Tal como se usa en la presente memoria, una dosis baja es una cantidad que para, un periodo de tiempo determinado, es menor o igual a las cantidades usadas en las terapias intermitentes o Con bolus tradicionales a lo largo de este periodo de tiempo. Los términos administración continua e infusión continua se usan intercambiablemente en la presente y significan el mantener un nivel estacionario de interferón en suero a lo largo del curso del periodo de tratamiento. Esto puede lograrse inyectando constante o repetidamente cantidades esencialmente idénticas de interferón, por ejemplo, por lo menos cada hora, 24 horas al día, siete días por semana, de tal manera que el nivel constante en suero se logra para toda la duración del tratamiento. La administración continua de interferón de dosis puede ser mediante infección subcutánea o intravenosa a intervalos apropiados, por ejemplo, por lo menos cada hora, durante un periodo de tiempo apropiado, en una cantidad que facilitará o promoverá desactivación in vivo del virus de hepatitis C. La administración subcutánea continua puede lograrse, por ejemplo, mediante un impulsor de jeringa electrónico pulsátil (Modelo Provider PA 00, Pancretec Inc. de San Diego, CA), una bomba de jeringa portátil tal como Graseby modelo MS 16A (Graseby Medical Ltd., de Watford, Herts Inglaterra) o una bomba de infusión constante tal como el Modelo Disetronic Panomat C-. Las bombas osmóticas, tales como las disponibles de Alza, también pueden usarse. Puesto que el uso de inyecciones subcutáneas continuas permite que el paciente sea ambulatorio, se prefiere al uso de inyecciones intravenosas continuas. Las formulaciones que simulan una inyección de dosis baja constante tal como, pero no limitadas a conjugados de polímero de citocina de accionamiento prolongado y las distintas formulaciones de liberación sostenida, también se proponen para usarse. Los conjugados de citocina se pueden preparar acoplando una citocina, tal como un interferón, en un polímero soluble en agua. Una lista no limitante de estos polímeros incluyen homopolímeros de óxido de polialquileno, tales como polietilenglicol (PEG) o polipropilenglicoles, polioles polioxietilenados, copolímeros de los mismos y copolímeros de bloque de los mismos. Como una alternativa a los polímeros a base de óxido de polialquileno, pueden usarse materiales

5 7 ES T3 8 no antigénicos efectivos tales como dextrano, polivinilpirrolidonas, poliacrilamidas, poli(alcoholes virílicos), polímeros a base de carbohidrato y semejantes. Estos conjugados de interferón-polímero se describen en la patente norteamericana número , la patente norteamericana número , la solicitud de patente europea número , la solicitud de patente europea número 0 36 y la publicación de la solicitud internacional número WO 9/190. Puesto que la modificación polimérica reduce lo suficientemente las respuestas antigénicas, el interferón extraño no necesita ser completamente autólogo. El interferón usado para preparar conjugados de polímero se puede preparar a partir de un extracto de mamífero tal como un interferón humano, de rumiante o bovino, o producido recombinantemente. Pueden prepararse distintas formulaciones de liberación extendida o sostenida usando los métodos convencionales bien conocidos en la técnica. La administración constante de dosis baja también puede lograrse mediante terapia génica, por ejemplo, administrando un interferón retrovírico u otro vector a fin de producir un interferón in vivo. Por lo general, los componentes de las composiciones de interferón se pueden seleccionar de entre aquellos empleados comúnmente con interferones y otros agentes antivíricos y antiproliferativos y que son conocidos por las personas expertas en la técnica. Las composiciones farmacéuticas convencionales que comprenden una cantidad terapéuticamente efectiva de interferón junto con vehículos adyuvantes, diluyentes, conservantes y/o solubilizantes farmacéuticamente aceptables se pueden usar en la práctica de la invención. Las composiciones farmacéuticas de interferón incluyen diluyentes de varias disoluciones tampón (por ejemplo, Tris-HCl, acetato, fosfato) que tienen un intervalo de ph y fuerza iónica, vehículos (por ejemplo, albúmina de suero humano), agentes de solubilización (por ejemplo, tween, polisorbato) y agentes de conservación (timerosol, alcohol bencílico). La composición farmacéutica de interferón puede obtenerse comercialmente como soluciones inyectables y como polvos liofilizados que se reconstituyen en un diluyente apropiado antes de la inyección. La duración del tratamiento es por lo menos de cuatro semanas, preferiblemente de doce semanas o más. Para el tratamiento de VHC crónico de conformidad con la práctica de la invención, una dosis semanal total del interferón alfa-2b debe variar de 2 a millones de unidades internacionales, más preferiblemente de a millones de unidades internacionales y lo más preferiblemente de 8 a millones de unidades internacionales por semana. Cuando la administración o infusión va a ser continua, la frecuencia de inyección de la composición de interferón dependerá de la forma de la composición. Se comprenderá que la inyección se hará menos frecuente (por ejemplo, una o dos veces a la semana) cuando se usan formulaciones de liberación sostenida o conjugados de polímero de accionamiento prolongado. Una sola inyección puede ser suficiente cuando se usan vectores víricos para expresar la citocina in vivo. Como se describió más arriba, el curso de la enfermedad y su respuesta al tratamiento con el fármaco puede ser seguido por examen clínico y de laboratorio. La eficacia de la terapia de la invención se determina mediante el grado hasta el cual los síntomas y señales anteriormente descritos de la hepatitis crónica son aliviados y el grado hasta el cual se eliminan o reducen sustancialmente los efectos secundarios normales del interferón (es decir, síntomas semejantes al resfriado, tales como fiebre, dolor de cabeza, escalofríos, mialgia, fatiga, etc., y síntomas relacionados con el sistema nervioso central, por ejemplo depresión, parestesia, concentración deteriorada, etc.). La invención se puede ilustrar mediante el siguiente ejemplo no limitante. Ejemplo Se trataron de conformidad con la invención siete pacientes humanos con hepatitis C crónica. Los pacientes humanos seleccionados para tratamiento se escogieron de pacientes positivos en el ensayo del anticuerpo de anti-vhc con hepatitis activa crónica documentada por biopsia. Cada paciente era positivo para el anticuerpo al virus de hepatitis C (anti-vhc) mediante un ensayo suplementario (Ortho o Abbott) y tenía una biopsia de hígado anterior con características de la hepatitis crónica. Cada paciente tratado de conformidad con la invención había experimentado con anterioridad un curso de 24 semanas con INTRON A, administrado mediante inyección subcutánea, 3 x 6 unidades internacionales tres veces a la semana con respuesta completa (que se define como la normalización de ALT) seguido por recaída de la hepatitis C crónica (pérdida de respuesta de ALT). Todos los pacientes se trataron durante doce semanas con una infusión subcutánea de dosis baja de INTRON A. El INTRON A se administró a concentración de x 6 unidades internacionales por mililitro a un régimen de infusión de 0,012 mililitros por hora hacia el tejido subcutáneo de la pared abdominal anterior mediante infusión subcutánea continua usando una bomba de infusión constante (Disetronic Model Panomat C-). De esta manera, el INTRON A se administró continuamente a un régimen diario de 1,4 x 6 unidades internacionales por día ( x 3 unidades internacionales por hora) o aproximadamente x 6 unidades internacionales por semana. Los pacientes se supervisaron semanalmente para determinar los síntomas clínicos, la famacodinámica (beta2-microglobulina en suero, 2 OAS, concentración del IFNalfa-2b del suero) y respuesta antivírica (normalización de ALT, desaparición de ARN de la hepatitis C (ARN-VHC) mediante inmunoensayo y reacción en cadena de polimerasa). La terapia fue bien tolerada. Los eventos perjudiciales fueron leves y consistían principalmente en fatiga. Todos los pacientes tenían un 0 por ciento o más de disminución en ALT. Cuatro pacientes tenían normalización persistente de ALT durante la terapia. La concentraciones de microglobulina beta2 y 2 OAS permanecieron elevadas por encima de la línea base a lo largo del tratamiento sin indicación de regulación descendente de respuesta. El ARN de VHC mediante inmunoensayo se convirtió en negativo en todos los pacientes, con un tiempo medio a la respuesta de cuatro semanas. Las concentraciones medias de IFN-alfa2b en suero eran detectables pero eran menores que el límite de cuantificación del ensayo ( unidades internacionales por mililitro). Este ejemplo muestra que las concentraciones bajas constantes de IFNalfa-2b fueron eficaces para normalizar el ALT y suprimir la replicación de VHC. No se observó evidencia de regulación descendente de la

6 9 ES T3 repuesta farmacodinámica. Aun cuando los resultados eran transitorios ya que los marcadores regresan al cesar la terapia, se espera que un tratamiento más prolongado de como resultado mejoras clínicas basadas en niveles de transaminasas normales y un tratamiento adicional para curar (histología de hígado normal) aun durante la retirada del tratamiento. Puede hacerse muchas modificaciones y variaciones de esta invención sin desviarse del alcance, como se hará evidente para aquellas personas expertas en la técnica. Las realizaciones específicas descritas en la presente memoria se ofrecen a modo de ejemplo únicamente y la invención debe quedar limitada sólo por los términos de las reivindicaciones anexas

7 11 ES T3 12 REIVINDICACIONES 1. Uso de interferón alfa en la fabricación de un medicamento para tratar una infección vírica de hepatitis C en un ser humano, en el que dicho medicamento es para ser administrado al ser humano en una cantidad de interferón alfa de 2 millones de UI por semana a millones de UI por semana, en el que la administración mantiene concentraciones en suero del interferón alfa en un nivel estacionario durante la duración del tratamiento. 2. El uso de la reivindicación 1, en el que la administración se logra mediante inyección subcutánea del interferón alfa. 3. El uso de la reivindicación 1, en el que la administración se logra mediante inyección de una formulación de liberación sostenida del interferón alfa. 4. El uso de cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en el que la administración se logra mediante inyección de un conjugado de polímero interferón alfa. 1. El uso de la reivindicación 4, en el que el polímero es polietilenglicol. 6. El uso de cualquiera de las reivindicaciones 1-, en el que el interferón alfa es interferón alfa-2b. 7. El uso de cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en el que el interferón alfa es para usar en combinación con ribavirina. 8. El uso de cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en el que el interferón alfa es para usar en combinación con por lo menos otra citocina que se selecciona del grupo que consiste en G-CSF, GM-CSF, IL-1, IL-3, IL-6 y eritropoyetina. 9. El uso de cualquiera de las reivindicaciones 1-8, en el que la infección vírica de hepatitis C es crónica.. El uso de la reivindicación 9, en el que la cantidad de interferón alfa-2b a ser administrada es de a millones de UI por semana. 11. El uso de la reivindicación, en el que la cantidad de interferón alfa-2b a ser administrada es de 8 a millones de UI por semana NOTA INFORMATIVA: Conforme a la reserva del art del Convenio de Patentes Europeas (CPE) y a la Disposición Transitoria del RD 2424/1986, de de octubre, relativo a la aplicación del Convenio de Patente Europea, las patentes europeas que designen a España y solicitadas antes del , no producirán ningún efecto en España en la medida en que confieran protección a productos químicos y farmacéuticos como tales. Esta información no prejuzga que la patente esté o no incluida en la mencionada reserva. 7