Universidad Tecnológica de la Mixteca
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- Trinidad Maldonado Domínguez
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1 Universidad Tecnológica de la Mixteca Maestría en Ciencias Productos Naturales y Alimentos Separación y determinación de tocoferoles en aceites vegetales por extracción en fase sólida con cartuchos de polímeros porosos y análisis cromatografía de gases capilar (Beldean-Galea et al.) PRESENTA: Analleli Jiménez Durán Huajuapan de León, Oax. Noviembre de 2012
2 Contenido 1. Introducción 2. Objetivo 3. Procedimiento experimental 4. Resultados y discusiones 5. Conclusiones 1
3 1. Introducción 2
4 1.1. Técnicas analíticas para tocoferoles: 1. Espectrofotometría 2. Voltametría 3. Cromatografía de capa fina 4. Cromatografía de gas 5. HPLC 3
5 1.2. Los tocoferoles están asociados con membranas, lipoproteínas, etc. Tipos de extracciones: 1. Extracción directa de la matriz del alimento. 2. Extracción después de la saponificación. Libera las vitaminas, aunque se debe tener cuidado con la cantidad de hidróxido de sodio que se utilice. 4
6 1.3. Métodos de extracción de tocoferoles y tocotrienoles Fluidos supercríticos Baja cantidad de solventes Concentración de analítos Limpieza de la muestra Solventes orgánicos Fase Solida Líquido Líquido 5
7 1.4. Extracción fase sólida Se utilizan cartuchos con: Ciclohexil [18] Diol [20] Sílica gel [12, 21] Octadecil [18] Polímeros de impresión molecular Polímeros porosos 6
8 2. Objetivo Evaluar la eficiencia de extracción de 4 polímeros porosos en SPE de tocoferoles de aceites vegetales, seguida de un análisis cromatográfico de gases capilar. 7
9 3. Procedimiento experimental 3.1. Materiales 7 Tipos de aceites Polímeros porosos (Carlos Erba, Italia) Tabla 1. Características de los polímeros porosos Estándares (Supelco, USA) Solventes orgánicos grado HPLC (Merck, Alemania) 8
10 3.2. Equipo y cromatografía de gases Hewlett Packard HP 4890 serie D Características del equipo Columna capilar de sílice fundida Inyector splitless Detector de ionización de llama Gas acarreador (Nitrógeno al %) Temperatura inicial 140ºC Velocidad de flujo 1.5 ml min -1 9
11 3.3. Pretratamiento de muestra Saponificación mg de aceite 0.2 grs. de ácido ascórbico 15 ml de metanol absoluto 1.5 ml de hidróxido de sodio al 50% Calentamiento a 70ºC por 3 min Enfriar los tubos 3 ml de cloruro de sodio Análisis de NaOH 10
12 3.4. Extracción líquido-líquido Muestra+15 ml de mezcla de hexano: acetato de etilo (85:15, v/v) Evaporar en Nitrógeno Disolver en 2 ml de la misma mezcla Cromatografía de gases capilar 3.5. Extracción fase-sólido Acetona y metanol Elución (2 ml de hexano:acetato de etilo (90:10,v/v)) 0.5g de polímero poroso Análisis 10µL de estándar + metanol Lavado con agua destilada Porapak Q Preparación y acondicionamiento Evaluar la selectividad de los poros 11 Evaporación de eluato en nitrógeno 100 µl de metanol Cromatógrafo de gases capilar Extracción
13 4.1. Optimización de la saponificación Tabla 2. La influencia de la adición de NaOH en la recuperación de tocoferoles. 12
14 4. Resultados y discusiones 4.2. Extracción eficiente de los polímeros porosos. Figura 1. Gráficas sobre la eficiencia de los polímeros. 13
15 4.3. Comparación de la extracción líquido - líquido y extracción en fase sólida en porapak Q Figura 2. Extracción en fase sólida cromatograma B, extracción líquidolíquido cromatograma C. Buen método para limpiar las muestras y para la concentración de especies requeridas 14
16 4.4. Análisis cuantitativo Resultados cuantitativos y cualitativos. Se determinaron en base al método de curva de calibración. Tabla 3. Contenido de tocoferoles de varios aceites vegetales, extracción con cartuchos Porapak Q y análisis GC en PE 15
17 5. Conclusiones En la saponificación, la perdida de tocoferoles puede ser controlada con una cantidad y concentración adecuada de hidróxido de sodio. La estabilidad de los tocoferoles se incrementa con el número de grupos metilos unidos al anillo fenólico. El uso de una extracción de fase sólido con cartucho Porapak Q es un buen método para limpiar las muestras. Con los polímeros no polares o copo polares rendimientos de los tocoferoles. se obtienen buenos 16
18 Gracias
19 Diapositiva de apoyo Voltametría Comprende un grupo de métodos electroanalíticos que suministran información sobre el analíto, a partir de la medida de la corriente en función del potencial aplicado, en condiciones que estimulan la polarización de un electrodo indicador o de trabajo. 18
20 Diapositiva de apoyo Inyector splitless 19
21 Diapositiva de apoyo Polímero molecularmente impreso Una tecnología emergente llamada impresión molecular, conduce a polímeros sintéticos altamente estables, llamados polímeros de impresión molecular (MIPs), poseen propiedades de reconocimiento molecular selectivo debido a que los sitios de reconocimiento dentro de la matriz del polímero son complementarios al analíto en la forma y posición de los grupos funcionales. Algunos de estos polímeros tienen altas selectividades y constantes de afinidad, comparables con los sistemas de reconocimiento que ocurren naturalmente tales como anticuerpos monoclonales o receptores, los cuales los hacen especialmente adecuados como constituyentes en sensores químicos (biomiméticos) para la química analítica. 20
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