Preparación Y ESTERILIZACIÓN de materiales de laboratorio

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1 Preparación Y ESTERILIZACIÓN de materiales de laboratorio Área de Bacteriología. Depto. de Ciencias Microbiológicas Facultad de Veterinaria UdelaR 2015

2 Esterilización

3 Definición Esterilización: proceso físico o químico que destruye toda forma de vida microbiana, incluidas las esporas.

4 Clasificación

5 Aplicación La esterilización de equipos quirúrgicos y otros materiales de uso médico con el propósito de reducir el riesgo de infección en el paciente. El acondicionamiento del material (pipetas, tubos, placas de Petri, pinzas, etc) que va a ser utilizado en los laboratorios de microbiología La preparación de medios de cultivo que serán empleados con diferentes propósitos (cultivo de m.o, control de ambiente, equipos o personal, análisis microbiológico de medicamentos, cosméticos, alimentos, etc) La descontaminación del material utilizado.

6 Calor Húmedo con presión AUTOCLAVE Material esterilizable: Material textil, vidrio, plásticos resistentes. Instrumental de acero inoxidable Soluciones acuosas (estables al calor) VENTAJAS Rápido Económico Inocuo DESVENTAJAS No para material termolábil No para polvos No para metales que se puedan oxidar

7 Calor Húmedo con presión Consigue la esterilización al mantener la temperatura y presión elevada durante un período de tiempo 15 min.. Material limpio 20 min.. Material sucio Presión en atm Presión en libras Temperatura en ºC

8 AUTOCLAVE 1. Poner agua en el fondo 2. Colocar medios, material, etc. en el canasto. 1. Cerrar bien la tapa 2. Abrir válvula de desagote (espita) 3. Encender fuente de calor 4. Desagotar aire (purgar) 5. Cerrar válvula o espita 6. Vigilar presión, computar tiempo cuando llega a 1 atm 7. Luego de min. Apagar el fuego y dejar enfriar 8. Abrir la válvula luego de más de 20 minutos.

9 Calor Seco (aire caliente) HORNO PASTEUR Material esterilizable: Aluminio, porcelana y vidrio Aceites, sustancias grasas Instrumental quirúrgico cromado Polvos VENTAJAS Fácil utilización DESVENTAJAS Altera el material con filo Económico No requiere conexión ni de gases ni de agua

10 Calor seco (aire caliente) La muerte de los microorganismos se consigue por DESECACIÓN Se utiliza calor seco, altas temperaturas y largos tiempos de exposición Tiempo Temperatura 1 Hora 180 C 2 Horas 170 C 4 Horas 140 C Horas 120 C

11 Preparación de material

12 Material sucio vs material limpio AUTOCLAVE (ESTERILIZAR) LAVADO AUTOCLAVE (Listo para utilizar)

13 Lavado del material de laboratorio NOTA: Es imprescindible el uso de guantes y lentes de seguridad 1. En bandeja plástica se prepara la cantidad adecuada de solución acuosa de detergente. 2. El detergente se utiliza a una concentración de 5% v/v 3. Se vacía el material de vidrio en un recipiente de desechos adecuado 4. En función de la suciedad del mismo se enjuaga con agua potable 5. Sumergir totalmente el material a limpiar en la solución de detergente 6. Dejar actuar 2 horas a temperatura ambiente. Si se desea una limpieza rápida dejar actuar 5 minutos a 50 C 7. Retirar el material, enjuagar con agua potable y si es necesario pasar cepillo y/o esponja 8. Enjuagar con agua potable 9. Enjuagar tres veces con agua desionizada 10.Acondicionar en bandejas y secar en estufas a 37 C

14 Placas de Petri: Pueden esterilizarse individuales o en paquetes Tubos con tapón de algodón: Se pueden esterilizar en paquetes de a dependiendo el tamaño del tubo, o en recipientes. Pipetas se envuelven de manera individual Preparación de matraces: Poner tapón de algodón y cubrir con papel Una vez preparado el material y antes de colocarlo en autoclave u horno de esterilización se debe colocar en el papel: - Cinta con indicador - Fecha

15 Procesado del material estéril: Almacenamiento Controlar el acceso a las áreas de almacenamiento de materiales estériles. Mantener el área de almacenamiento limpia, libre de polvo, e insectos. Controlar la temperatura y la humedad de las áreas de almacenamiento. La temperatura ideal: <26ºC y la humedad relativa: entre 30 y 60%. Utilizar, preferiblemente, estantes cerrados para colocar el material. Dejar que los materiales que salen del horno o el autoclave alcancen la temperatura ambiente o en estufa antes de ser almacenados.

16 Procesado del material estéril: Pérdida de esterilidad Cuando se produce cualquier ruptura, accidental o no, del material que lo recubre durante su transporte o almacenamiento Al humedecerse el material de empaque Al pasar la fecha de vencimiento de dicho material MATERIAL Vidrio (Placas, matraces, pipetas, etc) Medios de cultivo en tubos o frascos Placas con medio en heladera VENCIMIENTO 1 MES (15 DIAS) 2 MESES 2 SEMANAS

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