Biología Molecular del Virus de Influenza A. Washington B. Cárdenas, Ph.D. FIMCM-ESPOL
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- Víctor Ramírez Rey
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1 Biología olecular del Virus de Influenza A Washington B. Cárdenas, Ph.D. FIC-ESPOL
2 Virus de influenza A Amantadine Rimantadine Hemaglutinina Neuraminidasa embrana Nucleoproteína Polimerasas atriz 2 Oseltamivir (Tamiflu) Zanamivir (Relenza)
3 Familia: Orthomyxoviridae VIRUS DE LA INFLUENZA Tipo de genoma: ARN de polaridad negativa, segmentado Géneros de Influenza: Influenza A Influenza B Influenza C Subtipos de influenza A: H1..16 y N1..9 Nomenclatura: A/California/4/2009 (H1N1) A/swine/Ontario/55383/04 (H1N2) Subtipos de influenza A en humanos: H1N1 y H3N2 Subtipos de influenza A en cerdos: H1N1, H1N2, H3N2, H3N1, H3N3.
4 Ciclo de replicación del virus de Influenza Receptor Citoplasma marn Núcleo marn varn (-) carn (+)
5 Sección transversal de partículas virales mostrando los ocho complejos ribonucleoproteicos Noda et al. Nature 2006
6 Reservorio natural de Influenza A
7 Evolución del virus de la Influenza A en humanos y pandemias asociadas H1N1 H2N2 H3N? Arqueoserología H3N8 H1N1 Fiebre española millones muertes 1957 H2N2 Fiebre asiática 2 millones muertes H1N H3N2 Fiebre de Hong Kong 1 millón muertes Presente
8 Variación antigénica del virus de la Influenza Cambio antigénico gradual
9 Variación sub-típica del virus de la Influenza Aves Recombinado Humano Huésped Cambio antigénico total
10 Virus de influenza porcina triple-recombinados que infectaban a humanos previo a epidemia actual H1N1 H1N1 Nueva variante O De origen porcino Linaje norteamericano Linaje norteamericano Linaje euroasiático
11 HISTORIA DEL VIRUS DE INFLUENZA A PORCI 1918-La influenza porcina fue reconocida clínicamente por primera vez en los EEUU Primer virus de influenza porcina aislado de puercos infectados Primer virus de influenza porcina H1N1 clasica aislado de un humano Zoonosis de influenza porcina H1N1 con una muerte, Wisconsin, EEUU Surgimiento del primer virus porcino H3N2 triple-recombinado, constituido por genes de influenza humana, aviar y porcina Primer virus porcino H3N2 triple-recombinado aislado de un humano Primer virus porcino H1N1 triple-recombinado aislado de un humano Nuevo virus H1N1 triple-recombinado de origen porcino que se transmite de humano a humano y no ha sido aislado en porcinos todavia.
12 ORGANIZACIÓN UNDIAL DE LA SALUD CASOS CONFIRADOS DE NUEVA INFLUENZA A H1N1 0.7% mortalidad
13 Posibles sub-tipos de influenza A con potencial pandémico H5N1 Alerta Pandémica 3 H7N7? H9N2? H1N1 Alerta Pandémica 5
14 Esquema del procesamineto de muestras para el diagnóstico y aislamiento de Influenza A Horas Días Colección de muestra (cloaca o heces) Extracción del ARN RT-PCR (gen atriz-) uestras positivas se inoculan en huevos embrionados para a i s l a r e l v i r u s y caracterizarlo con mayor detalle
15 Secuencia de aa en la región de corte de la H5N1 PQRERRRKRG
16 Presencia del Lisina(K)627 en es importante para una eficiente replicación de Inlfuenza en humanos
17 Cadena doble de ADN A T G T A A A C A T T T Cadena sencilla de ARN A Cadena sencilla de ARN de polaridad negativa T A A A T G A U G U A Transcriptasa Inversa U A C A U U
18 Generación de vacunas recombinantes de Influenza Pol I Plásmidos que expresan varn Pol II Transfección Plásmidos que expresan proteínas Célula
19
20 Generación de virus recombinante para vacuna Pol I Pol I Pol I Pol I Pol I Pol I + Pol II H1N1 Célula Pol I H5N1 P Q R T R G NNNNCCTCAAAGAACCAGAGGANNNNN 3 NNNNGGAGTTTCTTGGTCTCCTNNNNN 5 Pol I
21 Principales componentes para un control epidemiológico molecular viral efectivo 1. Diagnóstico rápido y robusto para vigilancia 2. Generación de base de datos de secuencias genéticas para monitorear el linaje viral y detectar huellas genéticas asociadas a virulencia. 3. Herramientas moleculares para construcción de virus recombinantes para vacunas
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