David Castro da Costa Ing.Agr, FDF. Susana Izquierdo Carreño Ing.Agr, FDF. Carolina Yañez Briceño, Ing.Agr, FDF.

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1 Avances : "Desarrollo de la técnica de insecto estéril (TIE) mediante radiación ionizante, para el control de la plaga cuarentenaria Lobesia botrana Proyecto FIA PYT David Castro da Costa Ing.Agr, FDF. Susana Izquierdo Carreño Ing.Agr, FDF. Carolina Yañez Briceño, Ing.Agr, FDF.

2 Objetivo general Determinar los efectos de la radiación ionizante en la longevidad, fer5lidad y comportamiento reproduc5va de Lobesia botrana para el desarrollo de una técnica de insecto estéril (TIE) como herramienta biológica complementaria para el control de la plaga a nivel nacional. ESTADOS DE DESARROLLO DE Lobesia botrana Huevo amarillo Huevo Cabeza negra Huevo (0,6-0.8 mm) L1 (0,9-1,5 mm) L2 (1,9-3,0 mm) L3 (4,5-5,0 mm) L4 (6,0-7,0 mm) L5 (10,0-11,0 mm)

3 Objetivos específicos 1.- Determinar los parámetros para una crianza ar5ficial masiva de Lobesia botrana en laboratorio. 2.- Evaluar en laboratorio fecundidad, fer,lidad, longevidad de machos y hembras compe,,vidad y capacidad de apareamiento, para una máxima produc5vidad. 3.- Determinar la dosis mínima necesaria para causar esterilidad en L.botrana sin afectar la capacidad de compe55vidad durante la fase de liberación para supresión de población. 4.- Determinar los efectos de la radiación ionizada en pupas y su descendencia.(longevidad, fecundidad, fer5lidad, compe55vidad de apareamiento y viabilidad de huevos) 5.- Definir protocolo de irradiación y crianza. Realizar una validación piloto en terreno. (jaula/urbano) 3

4 a) Cámara de cría de adultos (Obj. 1 y 2). 4

5 b) Cámara de cría de estados inmaduros en dieta Larvaria (Obj. 1 y 2). 5

6 c) Desarrollo de la cría técnicas de cosecha. (Obj. 1 y 2). 6

7 TRABAJO CONJUNTO PÚBLICO /PRIVADO En conjunto con el desarrollo del proyecto y con el obje5vo de avanzar conjuntamente FDF PROPORCIONA AL SAG DE ARICA EN EL AÑO 2015 : ü UN PIE DE CRIA CON 400 PUPAS ü DIETA INICIAL PARA ALIMENTACION LARVARIA ü CAPACITACION DE 3 TECNICOS DE LABORATORIO ü ASESORIAMIENTO EN ARICA Visita dentro del trabajo conjunto con SAG, junto al experto Greg Simmons al laboratorio de Lobesia botrana en SAG de Arica. DESARROLLO DE PROTOCOLO CONJUNTO SAG/FDF. ü SAG ARICA FOCALIZA LAS INVESTIGACIONES EN TIE SOBRE IRRADIACION DE ADULTOS 7 ü FDF FOCALIZA LAS INVESTIGACIONES EN TIE SOBRE IRRADIACION DE PUPAS

8 TRATAMIENTOS, PROPORCIONES Y PARAMETROS (Obj. 3 y 4 ). Ø FUENTE DE ENERGIA IONIZANTE: COBALTO 60 Ø EQUIPO : GAMMACELL, Ci (CCHEN) Ø DOSIS: 150 Gy, 200 Gy, 100 Gy. Ø ESTADO DE DESARROLLO A IRRADIAR: PUPAS Ø PROPORCIONES DE APAREAMIENTO ENTRE MACHO / HEMBRA A EVALUAR : 1:1; 1:5; 5:1; 4:2; 2:4. 8

9

10 d) Cámaras de copula pos tratamiento, pruebas de laboratorio (Obj. 3 y 4). 10

11 VERIFICACION DE COPULA 11

12 RESUMEN DE RESULTADOS GENERALES CON 150 Gy. (100 Gy, 200 Gy). (1:1) IE 65,9 % (2:4) IE 80,4% (4:2) IE 66,2% MACHO IRRADIADO HEMBRA FERTIL (1:1) IE 98,8 % (2:4) IE 97,6 % (4:2) IE 98,3% MACHO FERTIL HEMBRA IRRADIADA 12

13 ANALISIS DE ECLOSION DE HUEVOS (teñidos con azul de metileno) CONTROL (alta eclosión) Macho Irrad. X Hembra fértil ( mediana a baja eclosión) 13

14 ENSAYO EXPLORATORIO DE LIBERACION DE INSECTOS ESTERILES DENTRO DE UNA ZONA URBANA TEMPORADA 2016/2017 Inicio 20 de sept , casas con parras comuna Quilicura, 2000 insectos Irradiados, en 5 casas/ semana por 36 semanas. RELACION ESTIMADA LIBERACION ESTERILES VS SILVESTRES 10:1 14

15 Preparación material biológico de liberación Cámara de preemergencia a 20 C. 15

16 PUPAS TEÑIDAS CON POLVO FLUORESCENTE 16 16

17 Liberación oficial (Quilicura). 17

18 Trampa con polillas silvestres y recapturas 18

19 Total Capturas y recapturas de polillas irradiadas obtenidas semana a semana en la evaluación. 700 Capturas y Recapturas en 5 casas con Liberación de polillas irradiadas 600 Capturas Silvestres en casa tratadas N Adultos capturados Recapturas polillas irradiadas (150 Gy) Fecha Colecta de la trampa **PORCENTAJE DE EMERGENCIA PROMEDIO = 86,2 %; n= 36 semanas. 19

20 Prueba de dispersión de Insectos irradiados. (protocolo acuerdo SAG/FDF). Distancia (m) 50 m 100 m 150 m 200 m 300 m 500 m

21 Nivel de dispersión de insectos irradiados. (protocolo acuerdo SAG/FDF). 50 Porcentaje de recapturas de Lobesia botrana a diferentes distancias de vuelo desde un punto de liberacion controlada. % DE CAPTURAS ,2 25,6 15,6 8,5 3,3 4, DISTANCIA METROS (anillos). n = 3 liberaciones de 2000 insectos ( 1000 machos y 1000 hembras) n = 12 observaciones por cada distancia = 12 trampas 21

22 Prueba preliminar de respuesta de machos irradiados frente al llamado y copula de hembras vírgenes en zona urbana. Detecciones de macho irradiado en dos trampas con feromonas natural, tiempo de exposición 1 semana. TRAMPA TIPO 1: DELTA CON FEROMONA NATURAL DE HEMBRA VIRGEN ( 2 Hembras virgenes) Trampa tipo 1 Cydia Molesta Lobesia botrana Recapturas machos irradiados. Total recapturado de L.botrana R R R TRAMPA TIPO 2: CILINDRO CON HEMBRA VIRGEN CENTINELA ( 5 Hembras virgenes) Trampa tipo 2 Recaptura machos irradiados detectados en trampa tipo cilindro. R1 (*) R2 R3 (*) Se produjo copula y descendencia pero con huevos inviables Esto da un precedente para continuar esta investigación y validar la hipótesis de que las polillas irradiadas tendrían la capacidad, de encontrar a las hembras silvestres. 22

23 GRACIAS 23

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