Efecto de agentes químicos sobre los microorganismos

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María Concepción Lagos Morales
hace 5 años
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1 Efecto de agentes químicos sobre los microorganismos

2 Definiciones Desinfección: se refiere al uso de agentes físicos o químicos para eliminar las células vegetativas pero no necesariamente las esporas.

3 La desinfección se emplea principalmente sobre objetos inanimados debido a que se utilizan compuestos altamente tóxicos para las células animales.

4 La elección del agente químico o físico depende del nivel de control que se requiera: A) Células vegetativas B) Bacilos tuberculosos C) Esporas La resistencia que presentan los microorganismos a los agentes químicos o físicos es variable.

5 Elección del nivel de acción del desinfectante Bacterias Alta Media Baja Endosporas Mycobacterium Células vegetativas Hongos filamentosos Parásitos Quistes Virus Desnudos pequeños Envueltos medianos

6 Asepsia. Es eliminación de microorganismos de objetos animados. Antiséptico: es el nombre que reciben los agentes químicos que se usan en la piel. Sólo elimina los microorganismos que están en la dermis

7 Efecto de los agentes químicos Biocida (Germicida): Un es un compuesto químico que causa lesiones irreversibles y mata cualquier tipo de microorganismo. Su poder de acción desinfectante generalmente es alto por lo que elimina bacterias, virus, hongos y parásitos. (Bactericida, fungicida, etc)

8 Bioestático: son compuestos que causan reacciones reversibles sobre el crecimiento y proliferación de los microorganismos sin causarles la muerte. Para que sean efectivos siempre deben estar presentes.

9 Biolítico. Provoca la lisis de la célula, la cual se detecta por el descenso en el número de células o disminución de la turbidez

10 Factores que afectan la actividad de los agentes químicos 1) Concentración del agente y tiempo de actuación 2) ph: El ph afecta tanto a la carga superficial neta de la bacteria como al grado de ionización del agente. En general, las formas ionizadas de los agentes disociables pasan mejor a través de las membranas, y por lo tanto son más efectivos. Los agentes aniónicos suelen ser más efectivos a ph ácidos. Los agentes catiónicos muestran más eficacia a ph alcalinos.

11 Factores que afectan la actividad de los agentes químicos 3) Temperatura. Normalmente, al aumentar la temperatura aumenta la potencia de los desinfectantes. Para muchos agentes el aumento de 10 grados supone duplicar la tasa de muerte 4) Naturaleza del microorganismo y otros factores asociados a la población microbiana según la especie empleada: p. ej., M. tuberculosis resiste la acción del hipoclorito mejor que otras bacterias;

12 Factores que afectan la actividad de los agentes químicos 1. Según la fase de cultivo; La presencia de cápsulas o de esporas (suelen conferir más resistencia); El número de microorganismos iniciales

13 Factores que afectan la actividad de los agentes químicos 6) Presencia de materiales extraños: La existencia de materia orgánica en el material a tratar (p. ej., sangre, suero, pus) afecta negativamente a la potencia de los desinfectantes de tipo oxidante (como los hipocloritos) y de tipo desnaturalizante de proteínas, hasta el punto que pueden llegar a hacerlos inactivos en cuanto a su poder desinfectante o esterilizante.

15 Métodos para evaluar la actividad de agentes químicos Coeficiente fenólico Reto microbiano Concentración mínima inhibitoria (MIC, dilución en tubo) Difusión en agar

16 Reto microbiano El desinfectante se prepara de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Se adiciona una concentración conocida de microorganimos tipo: S. aureus, E. coli y Salmonella typhi ( x 10 6 ) Se evalúa la efectividad del desinfectante después de 30 seg de contacto del microorganismos con el.

17 Reto microbiano Resultado se expresa en por ciento de efectividad. Ejemplo: Cuenta inicial = 90 x10 6 UFC/ml Cuenta después del contacto con desinfectante = 8 x 10 2 UFC/ml % efectividad= 100- (8 x 10 2 x 100) = % 90 x10 6

18 Concentración mínima inhibitoria La CMI (MIC) se define como la concentración más pequeña de agente químico que se necesita para inhibir el crecimiento de un microorganismo control. Para determinarla se prepara una serie de tubos cada uno contiene medio de cultivo con una concentración diferente del agente químico y se inoculan con el microorganismo control (S. aureus, E. coli, Salmonella)

19 MIC MIB Concentración mínima bactericida

20 Difusión en placa

21 Agentes quimioterapéuticos Sustancias usadas en concentraciones bajas para el tratamiento de enfermedades; destruyen o inhiben el crecimiento de microorganismos patógenos, sin causar daño a los tejidos del hospedero.

22 Desde el punto de vista químico, se clasifican en grandes familias antibióticos que contienen carbohidratos; lactonas macrocíclicas; quinonas y compuestos relacionados; antibióticos peptídicos y con aminoácidos; heterociclos del N; heterociclos del O; aromáticos; alifáticos, etc.

24 Para estudiarlos es más útil agruparlos en función de los sitios blanco sobre los que actúan A) antibióticos que interfieren con la biosíntesis de la pared celular B) antibióticos que actúan sobre la membrana celular C) antibióticos que inhiben la síntesis de proteínas D) antibióticos que actúan sobre la síntesis de ácidos nucleicos. E) antibióticos que inhiben vías metabólicas

29 Métodos empleados para evaluar la susceptibilidad a antibióticos Método de Kirby Bauer (difusión en placa) Método de dilución en tubo Epsilómetro o E-test

30 Método de Kirby Bauer o CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) Agar Hinton-Müeller Grosor 4 mm ph del medio 7.0 Taxos a -20 C 5-12 taxos por placa de 10 o 15 cm de diámetro respectivamente Inóculo al 0.5 de M.F (150 x 10 6 ) Difusión en placa

32 MO para ensayo de PSA por el método de difusión en agar (KB) BGNFER GNDC BGNF Enterobacteriaceae Vibrio cholerae Haemophilus spp. Neisseria gonorrhoeae Neisseria meninigitidis Pseudomonas aeruginosa Acinetobacter spp. Burkholderia cepacia CGP Micrococaceae CGP Streptococaceae Staphylococcus spp. Enterococcus spp. Streptococcus pneumoniae Streptococcus spp

34 Tablas CLSI

35 No es correcto utilizar el multidiscos para las pruebas de susceptibilidad

36 Dilución en tubo o microdilución

38 Epsilómetro E-test

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