T.P. Nº 5: Tejidos de sostén (II parte): Tejido óseo

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Bernardo Campos Mora
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1 T.P. Nº 5: Tejidos de sostén (II parte): Tejido óseo Objetivos: a) Observación, reconocimiento y esquematización de distintos tipos de tejido óseo. b) Interpretación de fotografías de diferentes componentes celulares con MET.

2 Características generales del tejido óseo: 1) Alta irrigación. 2) Matriz extracelular mineralizada (muy dura) sostén y protección. 3) Sitio de depósito de calcio y fosfato regulación homeostática de la calcemia (concentración de calcio en sangre). 4) Rodeado por PERIOSTIO. Matriz ósea Fibrilar fibras colágenas I fibras colágenas III, V, XI Proteoglicanos Condrotin sulfato Queratán sulfato Sialoproteínas I y II Agrecan Amorfa Glicoproteínas Osteonectina Osteopontina Osteocalcina Sales: fosfato de calcio, Mg, K, Na, carbonato, citrato

3 Zona fibrosa Endostio Células osteoprogenitoras Periostio Zona osteógena

4 Tejido óseo vs. Hueso Células del tejido óseo: Hueso Tejido óseo. Tej. Hemocitopoyético. Tej. adiposo. Vasos sanguíneos. Nervios. Cartílago articular (en una diartrosis) Osteoprogenitoras. Osteoblastos. Osteocitos. De recubrimiento óseo. Osteoclastos. Métodos de estudio para el tejido óseo Por decalcificación Por desgaste

1) Protocolo de decalcificación 400x a) con ácidos o quelantes 1)

3) Solución decalcificante: citrato de sodio + ácido fórmico (50:50)

6) 48 h en solución de glicerina + 1% de acético a 4 C.

8) Deshidratación e inclusion 400x b) Método electroquímico.

5 1) Protocolo de decalcificación 400x a) con ácidos o quelantes 1) Fijación en formol 2) Lavado en agua destilada. 3) Solución decalcificante: citrato de sodio + ácido fórmico (50:50) hasta que se ablande el hueso. La solución se cambia cada 3 días. 4) Lavado en agua destilada. 5) 24 h en solución saturada de alumbre de potasio. 6) 48 h en solución de glicerina + 1% de acético a 4 C. 7) 3 h lavado con agua corriente. 8) Deshidratación e inclusion 400x b) Método electroquímico. Schmorl tionina-ácido pícrico Anodo (+) Cátodo (-) Ácido fórmico La solución ácida hace que el calcio de disocie, entonces el ión calcio migra hacia el cátodo. Se evidencia un burbujeo en esa zona Cuando éste cesa, entonces el hueso está descalcificado.

6 2) Desgaste y pulido Para hueso seco sin fijar No se verán células. Sólo se observa la textura de la matriz ósea (lagunas y canalículos)

en opérculo de bagre) * Muy irrigado * Osteocitos al azar En

7 Clasificación del tejido óseo según la disposición de la matriz óseo 1) TEJIDO ÓSEO HOMOGÉNEO O VASCULAR (preparado por desgaste en opérculo de bagre) * Muy irrigado * Osteocitos al azar En Peces Reptiles Embriones de vertebrados Etmoides de aves y mamíferos

8 2) TEJIDO ÓSEO LAMINAR (preparado por desgaste en fémur de pavo) *Láminas: Hileras de osteocitos concéntricas al canal medular. Aves Diáfisis de huesos largos de Tortugas Quirópteros (murciélagos) Artiodáctilos (ciervo, jirafa, camello)

9 a) Compacto o haversiano OSTEONAS 3) TEJIDO ÓSEO LAMINILLAR b) Esponjoso o trabecular TRABÉCULAS

a) Compacto o haversiano SISTEMA DE HAVERS U OSTEONA Láminillas concéntricas dispuestas alrededor del conducto de Havers Osteocitos + fibras colágenas

10 a) Compacto o haversiano SISTEMA DE HAVERS U OSTEONA Láminillas concéntricas dispuestas alrededor del conducto de Havers Osteocitos + fibras colágenas Realizar esquema topográfico indicando: Capilares (1 o 2) Vasos linfáticos Fibras nerviosas Tejido conectivo Preparado por desgaste Osteoplastos con canalículos óseos

11 Sistema fundamental Sistema intersticial

12 Detalle de una osteona: Conducto de Havers Laminillas concéntricas Osteoplasto con canalículos óseos Línea de cemento

comunicando entre sí los conductos de Havers y éstos

13 Conducto de Volkmann: conducto que recorre el hueso de forma transversal, atravesando las laminillas óseas y comunicando entre sí los conductos de Havers y éstos con la cavidad medular y la superficie externa del hueso.

15 Osteocito M.E.T.

16 b) Esponjoso o trabecular Compuesto por láminas que no forman osteonas. Sin conducto de Havers, ni Volkmann, ni vasos sanguíneos. Trabéculas u osteonas trabeculares. Nutrición por difusión directa a través del endostio. Realizar esquema topográfico indicando: Trabéculas óseas Endostio Elementos de médula ósea

17 200x Realizar el detalle de una trabécula indicando: Osteocito con citoplasma retraído. Endostio formado por una única capa de células planas (células osteoprogenitoras). Elementos de médula ósea.

19 OSIFICACION 1) INTRAMEMBRANOSA O ALOSTÓSICA: Hueso originado a partir de células mesenquimáticas (ECTO; CN). Ej: huesos planos del cráneo. 2) ENDOCONDRAL O AUTOSTÓSICA: Se origina a partir de un molde de cartílago. Ej. Columna vertebral Extremidades Pelvis Base del cráneo

Osificación endocondral: 3 meses post fecundación Se inicia en la diáfisis (molde cartilaginoso que se formó a partir de células mesenquimáticas que se diferencian en condroblastos y secretan la

20 Osificación endocondral: 3 meses post fecundación Se inicia en la diáfisis (molde cartilaginoso que se formó a partir de células mesenquimáticas que se diferencian en condroblastos y secretan la matriz cartilaginosa). Pericondrio deja de producir condrobl. Periostio Se originan células formadoras de tejido óseo u Osteoblastos Se forma una delgada capa de tejido óseo alrededor del molde cartilaginoso (collar óseo) Los condrocitos en la región media se hipertrofian al cargarse de glucógeno. S! fosfatasa alcalina. Se calcifica la matriz cartilaginosa e inhibe difusión de nutrientes. Condrocitos mueren.

Degradación de gran parte de la matriz cartilaginosa Lagunas adyacentes confluyen Formación de una cavidad mayor Proliferan vasos sanguíneos que

21 Degradación de gran parte de la matriz cartilaginosa Lagunas adyacentes confluyen Formación de una cavidad mayor Proliferan vasos sanguíneos que atraviesan el collar óseo para vascularizar la cavidad (cavidad medular primaria) Entrada de células osteoprogenitoras y otras células que originarán la médula ósea.

depositan matriz ósea sobre la trabécula directriz (osificación endocondral): TRABECULAS MIXTAS

22 Degradación y eliminación del cartílago calcificado dejando restos de espículas con aspecto irregular: TRABECULAS DIRECTRICES Células osteoprogenitoras se adosan Osteoblastos Sintetizan y depositan matriz ósea sobre la trabécula directriz (osificación endocondral): TRABECULAS MIXTAS Cartílago calcificado: BASOFILO Tejido óseo: MUY ACIDOFILO Se elimina totalmente el cartílago calcificado: TRABECULAS ÓSEAS

23 PREPARADO DE OSIFICACION ENDOCONDRAL (fémur de gato por decalcificación) 1º) Completar esquema guía de dibujos: colorear y rotular

24 Zona cartílago hialino o en reposo Cartílago seriado o proliferativo Cartílago hipertrofiado Cartílago calcificado o en degeneración

25 Cartílago seriado o proliferativo Cartílago hipertrofiado Cartílago calcificado o en degeneración

2º) Hacer detalle de la esponjosa primaria Dibujar una trabécula

las trabéculas. Núcleo polarizado hacia la cavidad medular.

Osteocitos: Muy retraídos por la fijación, entonces se observa el

Osteoclastos: Multinucleados. Citoplasma acidófilo.

26 2º) Hacer detalle de la esponjosa primaria Dibujar una trabécula directriz, una trabéculas ósea, y Osteoblastos: Apoyados sobre las trabéculas. Núcleo polarizado hacia la cavidad medular. Citoplasma basófilo. Osteocitos: Muy retraídos por la fijación, entonces se observa el osteoplasto. Están rodeados por matriz. Osteoclastos: Multinucleados. Citoplasma acidófilo. Degradan el tejido óseo (resorción ósea) Asociados con la trabécula ósea (Laguna de Howship) Vasos osificantes. Elementos de médula ósea (megacariocitos, etc.).

27 (M) Cavidad medular, (Opc) celulas osteoprogenitoras, (Ob) osteoblastos, (Os) osteoide, (Oc) osteocito, (CB) Matriz ósea calcificada, (C) canaliculos, (L) límite entre dos laminillas.

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