COPROPACK PLUS. Fijación y concentración de parásitos fecales. Noviembre 2012

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1 COPROPACK PLUS Noviembre 2012 A 7 Km 1081 P.O. Box 20 - E43870 AMPOSTA / SPAIN1 Tel (977) Fax (977)

2 DETECCIÓN DE PARÁSITOS FECALES La metódica habitual para la separación de parásitos de muestras fecales consta de diversas etapas Toma de muestra que, en muchos casos, la realiza el propio paciente. Transporte de la muestra hasta el laboratorio. Homogeneización de la muestra. Filtración Centrifugación para la separación de los parásitos. Observación al microscopio del sedimento obtenido por centrifugación. La mayoría de estas etapas son manuales, lo que convierte la detección de parásitos en muestras fecales en una prueba lenta que consume mucho tiempo de laboratorio. Para superar los inconvenientes de los sistemas clásicos QCA presenta un sistema mejorado que facilita el trabajo en el laboratorio al eliminar parte de dichas etapas. El dispositivo permite la recogida de las muestras de heces por parte del paciente, su conservación y transporte al laboratorio, donde se procede a la separación de los parásitos mediante filtración y centrifugación para su posterior identificación con un mínimo de manipulaciones. El sistema de precinto proporciona una seguridad total en el transporte y gracias al sistema de doble filtración y centrifugación se obtiene una buena separación de los parásitos, minimizando las impurezas en el tubo de centrífuga. DESCRIPCIÓN DEL SISTEMA QCA El sistema está formado por un dispositivo compacto con el sistema de recogida y filtración de la muestra unidos al tubo de centrifugación para eliminar la manipulación en el laboratorio. Se acompaña de una lámina de sellado que mantiene la separación entre el contenedor de recogida de la muestra y el tubo de centrifuga, mientras que no se rompa el precinto. La rotura del precinto debe llevarse a cabo únicamente en el laboratorio por el personal autorizado, quien se asegurará de una homogeneización adecuada. El dispositivo consta de dos partes, la PARTE A, que consta de un tubo de centrifuga que lleva acoplado el sistema de filtros junto con la cuchara dosificadora. Todo el conjunto sirve como tapón del contenedor para la toma de muestras de fondo plano, PARTE B. (Figura 1). Parte A Parte B A 7 Km 1081 P.O. Box 20 - E43870 AMPOSTA / SPAIN2 Tel (977) Fax (977) Figura 1 2

3 El paciente recibe todo el dispositivo y para la recogida de la muestra debe separar la PARTE A de la PARTE B, introducir la muestra con la ayuda de la cucharita fijada en el sistema de filtros y volver a cerrar el dispositivo (Figura 2). Parte A Parte B Figura 2 Para evitar que durante el transporte pueda tener lugar el paso de parte del líquido de conservación hacia el tubo de centrifugación se incorpora un sistema de precinto y sellado, de manera que los dos tubos del sistema no están comunicados antes de que se haya homogeneizado adecuadamente la muestra en el laboratorio. Después de la homogeneización es el personal técnico el que procede a la rotura del precinto (Figura 3) y roscando hasta el fondo el tubo de centrifuga (1/2 de vuelta aprox) provoca la rotura de la membrana de sellado (Figura 4). Figura 3 Finalmente se centrifuga el sistema para proceder a la filtración y separación de los posibles parásitos presentes en la muestra. Figura 4 A 7 Km 1081 P.O. Box 20 - E43870 AMPOSTA / SPAIN3 Tel (977) Fax (977)

4 El dispositivo presenta un sistema de doble filtro con recorrido forzado. La circulación del líquido es desde el interior del filtro de mayor tamaño hacia la cámara exterior y desde dicha cámara exterior hacia el interior del filtro de menor tamaño de poro, para salir finalmente hacia el tubo de centrífuga En la primera etapa de la filtración las partículas más gruesas y pesadas, que podrían taponar el filtro por su tamaño, quedan retenidas en el fondo ciego del cilindro del primer filtro, sin que interfieran en la filtración de las partículas de menor tamaño, entre ellas los quistes y huevos de parásitos presentes en la muestra. En la segunda etapa de la filtración, de nuevo las partículas más pesadas tendrán tendencia a sedimentar en el fondo ciego de la cámara exterior al filtro sin interferir en el proceso de separación de los elementos buscados. Figura 5 El sistema descrito permite: 1.- Manipulación mínima en el laboratorio Precisa únicamente a) Homogeneización completa de la muestra. b) Centrifugación del dispositivo. c) Separación del tubo de centrifuga del resto del dispositivo, que se elimina. d) Recogida del sedimento y observación al microscopio. Con el sistema QCA se elimina la manipulación en el laboratorio del dispositivo de filtración y la limpieza de la pared del tubo de centrífuga. El sistema QCA es un sistema limpio que evita al máximo el contacto del técnico de laboratorio con la muestra biológica. A 7 Km 1081 P.O. Box 20 - E43870 AMPOSTA / SPAIN4 Tel (977) Fax (977)

5 2.- Seguridad en el transporte Durante el proceso de transporte puede tener lugar el paso de parte del líquido de conservación hacia el tubo de centrifugación antes de que se haya homogeneizado adecuadamente la muestra en el laboratorio. Para evitar este inconveniente el dispositivo que presenta QCA incorpora un sistema de precinto y sellado, que mantiene separados los dos tubos hasta la rotura del precinto y lámina de sellado por el personal del laboratorio. Este sistema asegura que en el momento de la homogeneización se encontrará presente la cantidad óptima de líquido para lograr una buena dispersión de la muestra, lo que favorece la filtración y concentración de todos los elementos biológicos que están presentes en la muestra de heces 3.- Filtración óptima El conjunto de los filtros del dispositivo se ha diseñado de manera que mediante un recorrido forzado de la muestra homogeneizada con el líquido de conservación se eliminen al máximo las impurezas. Las partículas más gruesas y pesadas, que podrían taponar los filtros por su tamaño, quedan retenidas sin que taponen los poros de los filtros y no interfieran en la filtración de las partículas de menor tamaño, entre ellas los quistes y huevos de parásitos presentes en la muestra. PROCEDIMIENTO 1.- Recogida de la muestra a) Separar el conjunto de cucharilla, sistema de filtros y tubo cónico del contenedor de fondo plano que contiene el líquido fijador. b) Recoger la muestra con la punta de la cucharilla. La cantidad de muestra ha de ser aproximadamente del tamaño de medio guisante c) Introducir el conjunto con la cucharilla con la muestra dentro del contenedor de fondo plano. Roscar hasta el fondo, por la parte azul del dispositivo. Comprobar que el sistema queda bien cerrado A 7 Km 1081 P.O. Box 20 - E43870 AMPOSTA / SPAIN5 Tel (977) Fax (977)

6 2.- Procesado de la muestra en el laboratorio a) Homogeneizar la muestra mediante un vortex. b) Romper el precinto. c) Roscar a fondo el tubo de centrifuga en el sistema de filtros para romper la membrana de sellado. d) Centrifugar a 500 x g ( rpm aprox) entre 5-10 min. e) Separar el tubo de centrifuga del conjunto de filtros y tubo de muestra. f) Descartar el sobrenadante. g) Transferir la muestra del fondo del tubo a un porta para proceder a su estudio e identificación. RESUMEN COMPARATIVO DE METÓDICAS METODOLOGÍA CLÁSICA Homogeneización NUEVA METODOLOGÍA QCA Homogenización Adaptación del filtro Filtración Separación del filtro Centrifugación Separación del sobrenadante Filtración / centrifugación una misma etapa Separación del sobrenadante Limpieza de las paredes Resuspensión de los posibles parásitos Resuspensión de los posibles parásitos QCA Noviembre 2012 A 7 Km 1081 P.O. Box 20 - E43870 AMPOSTA / SPAIN6 Tel (977) Fax (977)

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