Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2015

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1 CITOLOGÍA DE SANGRE PERIFÉRICA Y AUTOMATIZACIÓN EN EL DIAGNÓSTICO DE LAS ENFERMEDADES HEMATOLÓGICAS MALIGNAS 8 de Octubre del 2015 Anna Merino, Cristian Morales-Indiano y Santiago Alférez

2 1.Cómo la citología de sangre periférica nos ayuda en el diagnóstico? OBJETIVOS DEL WORKSHOP 2. Cómo los modernos analizadores nos ayudan a clasificar las poblaciones celulares de sangre periférica de manera precisa? 3. Qué tipo de alarmas cualitativas nos ofrecen para la detección de células anormales presentes en sangre periférica? 4. Es posible detectar las neoplasias linfoides leucemizadas de forma automática a través de las características morfológicas y otros parámetros cuantitativos de células linfoides de SP?

3 CITOLOGÍA DE SANGRE PERIFÉRICA Y AUTOMATIZACIÓN EN EL DIAGNÓSTICO DE LAS ENFERMEDADES HEMATOLÓGICAS MALIGNAS 8 de Octubre del 2015 Anna Merino

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5 Fenotipo MUESTRA Morfología Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2015 DIAGNÓSTICO INTEGRADO DE LAS ENFERMEDADES HEMATOLÓGICAS Citogenética Estudios moleculares DIAGNÓSTICO INFORMACIÓN CLÍNICA PRONÓSTICO TRATAMIENTO

6 Célula tamaño relación N/C contorno nuclear cromatina citoplasma grande moderado bajo elevada moderada baja redondeado irregular bilobulado Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2015 madura condensada laxa inmadura nucleolo si/no escaso moderado abundante grado de basofilia vacuolas granulación inclusiones

7 AUTOMATIZACIÓN: Criterios para la realización de la fórmula manual 1.-Por valores numéricos 2.-Por alarmas del autoanalizador 3.-Cuando los valores sean muy diferentes a los anteriores 4.-Cuando haya sospecha de parásitos

8 Signos de alarma en el hemograma: Detección de una leucocitosis junto a linfocitosis

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10 NEOPLASIAS LINFOIDES CON EXPRESIÓN EN SANGRE PERIFÉRICA Bajo grado: Leucemia Linfática Crónica Leucemia Prolinfocítica B Tricoleucemia/T. variante Linfoma esplénico de la zona marginal Linfoma folicular 2. Alto grado: Linfoma de células del manto 3. Muy alto grado: Linfoma/leucemia de Burkitt

11 Leucemia linfática crónica Expansión clonal de linfocitos B de aspecto maduro Fenotipo característico (antígenos B, CD23+, CD5+, Igs +) Origen: zona marginal de los folículos linfoides secundarios Bajo índice proliferativo (fase G 0 ciclo celular) Defecto en la muerte celular programada (apoptosis) Curso clínico indolente Supervivencia prolongada

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15 PROLINFOCITO Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2015

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17 TRICOLEUCEMIA

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20 Tricoleucemia variante Linfocitosis Negatividad fosfatasa ácida tartrato-r Ausencia de expresión CD11c, CD25, CD103 Mala respuesta al tratamiento

21 Linfoma esplénico de la zona marginal Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2015

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23 Linfoma folicular Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2015

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25 NEOPLASIAS LINFOIDES B DE ALTO GRADO

26 Linfoma de células del manto Proliferación de linfocitos B maduros Origen en células B de la zona del manto Formas de LCM: Histología: ZONA DEL MANTO / NODULAR / DIFUSO Citología: TIPICO O POLIMÓRFICO / BLASTOIDE

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29 NEOPLASIAS LINFOIDES B DE MUY ALTO GRADO: Leucemia/Linfoma de Burkitt

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32 Neoplasias Linfoides B: Diagnóstico diferencial IgS CD5 CD20 CD22 CD23 CD79b CD10 CD11c FMC7 CD25 CD103 LLC /+ ++ -/+ - -/+ -/+ - - PLL ++ -/ / / HCL MCL LF LLP /+ -/+ -/+ - SLVL ++ -/ /+ -/+ -/+ -/+

33 CLASIFICACIÓN DE LAS NEOPLASIAS LINFOIDES T SEGÚN LA OMS 1. Expresividad leucémica: Leucemia prolinfocítica T Leucemia/linfoma T del adulto Leucemia de linfocitos grandes granulares T Leucemia/linfoma de células NK Leucemia/linfoma NK blástico 2. Presentación ganglionar 3. Presentación extraganglionar: Síndrome de Sézary

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37 DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL ENTRE LPL-B Y LPL-T Las diferencias morfológicas principales entre los prolinfocitos B y T son: 1. El grado de basofilia citoplasmática es superior en los prolinfocitos T. 2. El perfil nuclear es más irregular en los prolinfocitos T.

38 CÉLULA DE SÉZARY Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2015

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42 Leucemia linfocitos grandes granulares T Curso clínico indolente: - 60% asintomáticos - Esplenomegalia Citopenias autoinmunes (neutropenia, anemia) -Contexto autoinmune Linfocitosis moderada (>2 x 10 9 /L) -Fenotipo: CD3+, TCR CD8+ -

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44 CÉLULA PLASMÁTICA

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48 Linfocitosis B Policlonal Persistente (LBPP) Mayor incidencia en mujeres fumadoras Linfocitosis absoluta B policlonal mantenida asociada a un aumento de IgM en suero y al haplotipo HLADR7

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52 Signos de alarma en el hemograma: Detección de una leucocitosis junto a plaquetopenia y anemia

53 LAM: definición Expansión clonal por >20% de células blásticas mieloides en sangre periférica, médula ósea u otros tejidos. Mutación somática en precursor mieloide con pérdida de la capacidad de seguir su proceso normal de maduración. Las células blásticas mieloides proliferan y sustituyen a la celularidad normal de medula ósea, con una disminución de las 3 series hematopoyéticas en sangre periférica: ANEMIA + NEUTROPENIA + PLAQUETOPENIA

54 I. LMA con anomalías genéticas recurrentes LMA con t(8;21)(q22;q22); (AML1/ETO) LMA con eosinófilos medulares anómalos [inv(16)(p13q22)/t(16;16)(p13;q11); (CBF /MYH11)] Leucemia aguda promielocítica [LAM amb t(15;17)(q22;q11-12); (PML/RAR- )] LMA con anomalías 11q23 (MLL) II. LMA con displasia multilínea Con síndrome mielodisplásico previo Sin síndrome mielodisplásico previo III. LMA y síndromes mielodisplásicos relacionados con agentes terapéuticos En relación a agentes alquilantes En relación a inhibidores de la topoisomerasa II Otros IV. LMA no categorizada previamente LMA mínimamente diferenciada (M0) LMA sin maduración (M1) LMA con maduración (M2) LMA mielomonocítica (M4) LA monoblástica (M5a) o monocítica (M5b) Leucemia eritroide aguda (M6) Leucemia megacariocítica aguda (M7) Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2015 Leucemia basofílica aguda Panmielosis aguda con mielofibrosis Sarcoma mieloide (sarcoma granulocítico) OMS,

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59 LAM 3

60 Leucemia Aguda Promielocítica Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2015

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63 LAM y mutación gen nucleofosmina (NFM)

64 LEUCEMIAS DE PRECURSORES LINFOIDES

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70 Ag expresados por los blastos de las LAL Tipo de LAL Anticuerpos monoclonales positivos LAL-B pro B CD79a y/o CD22 y/o CD19 LAL-B común CD79a y/o CD22 y/o CD19, CD10 (CALLA) LAL-B pre B CD79a y/o CD22 y/o CD19, cadena μ citoplasmática LAL-B madura CD79a y/o CD22 y/o CD19, Inmunoglobulina de superficie LAL-T pro-t CD7 y CD3 citoplasmático LAL pre-t CD7 y CD3 citoplasmático y CD2 y/o CD5 y/o CD8 LAL-T tímico-cortical CD1a LAL-T madura CD3 de superficie en ausencia de CD1a

71 CONCLUSIÓN Aunque los analizadores modernos han experimentado avances tecnológicos muy importantes, el recuento diferencial manual sigue siendo imprescindible para el diagnóstico de enfermedades hematológicas y no hematológicas

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