TRAZABILIDAD DE LOS RESULTADOS Implicaciones para el laboratorio
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- David Rey Alarcón
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1 TRAZABILIDAD DE LOS RESULTADOS Implicaciones para el laboratorio Francesca CANALIAS REVERTER Laboratori de Referència d Enzimologia Clínica Universitat Autònoma de Barcelona
2 OBJECTIVO DEL LABORATORIO CLÍNICO: generar resultados analíticos EXACTOS que permitan una interpretación clínica correcta COMPARABILIDAD de los resultados analíticos obtenidos en diferentes laboratorios y con diferentes sistemas de medida (espacio) y en un mismo laboratorio a lo largo del tiempo (tiempo) La NORMALIZACIÓN de las mediciones permite mejorar sustancialmente la comparabilidad y la intercambiabilidad de los resultados, tanto en el tiempo como en el espacio
3 Primer paso: Conseguir un sistema de medida METROLÓGICAMENTE CORRECTO SISTEMA DE MEDIDA DE REFERENCIA El sistema está constituido por una estructura jerárquica de procedimientos de medida y de patrones de medida, relacionados entre si y que aseguran la trazabilidad metrológica de los resultados obtenidos en las muestras de los pacientes
4 UNE-EN ISO 17511:2004 Productos sanitarios para diagnóstico in vitro. Medición de magnitudes en muestras de origen biológico. Trazabilidad metrológica de los valores asignados a los calibradores y a los materiales de control (ISO 17511:2003) UNE-EN ISO 18153:2004 Productos sanitarios para diagnóstico in vitro. Medición de magnitudes en muestras de origen biológico. Trazabilidad metrológica de los valores de concentración catalítica de las enzimas asignados a los calibradores y a los materiales de control (ISO 18153:2003)
5 TRAZABILIDAD METROLÓGICA Propiedad de un resultado de medida por la cual el resultado puede relacionarse con una referencia mediante una cadena ininterrumpida y documentada de calibraciones, cada una de las cuales contribuye a la incertidumbre de medida [VIM:2012, 2.41]
6 referencia una unidad de medida, mediante su materialización práctica utilizando un medida primario (p.e. mediante pesada) y un sistema de medida (p.e. una balanza) para asignar el valor de una magnitud con la correspondiente incertidumbre de medida UNIDAD de MEDIDA: g/l patrón de medida primario: valor asignado ± incertidumbre ASIGNACIÓN medida de referencia primario: gravimetría
7 referencia un medida, perfectamente definido y consensuado a nivel internacional, p.e. el medida de referencia primario de la IFCC para la medición de la concentración catalítica de la enzima aspartato aminotransferasa UNIDAD de MEDIDA: μkat/l patrón de medida primario de AST: valor asignado ± incertidumbre ASIGNACIÓN medida de referencia primario: IFCC - AST
8 referencia un patrón de medida, p.e. los materiales de referencia certificados (SRM-915b, patrón de calcio de CaCO 3 ), que tienen un valor certificado con una incertidumbre de medida asociada UNIDAD de MEDIDA: mol/l patrón de medida: material de referencia certificado SRM-915b valor certificado ± incertidumbre ASIGNACIÓN medida de referencia primario
9 TRAZABILIDAD METROLÓGICA INCERTIDUMBRE cadena ininterrumpida = CADENA DE TRAZABILIDAD DEFINICIÓN UNIDAD: SI patrón de medida primario medida de referencia primario patrón de medida secundario medida de referencia secundario patrón interno del fabricante patrón comercial medida seleccionado por el fabricante medida de rutina muestra paciente medida de rutina RESULTADO (adaptado de ISO 17511:2003)
10 TRAZABILIDAD METROLÓGICA INCERTIDUMBRE DEFINICIÓN UNIDAD: SI ORGANISMOS INTERNACIONALES patrón de medida primario medida de referencia primario LABORATORIOS DE REFERENCIA ACREDITADOS FABRICANTES DIAGNÓSTICO IN VITRO patrón de medida secundario patrón interno del fabricante patrón comercial RESPONSABILIDADES medida de referencia secundario medida seleccionado por el fabricante medida de rutina LABORATORIOS CLÍNICOS muestra paciente medida de rutina RESULTADO (adaptado de ISO 17511:2003)
11 Dependiendo de la disponibilidad de referencia primaria, la cadena de trazabilidad puede terminar en distintos niveles: MAGNITUDES CON RESULTADOS TRAZABLES A UNIDADES SI Nivel 1: medida de referencia primario y patrón de medida primario Aplica: 60 a 70 tipos de magnitud (metabolitos, electrolitos, hormonas, metales, proteínas, vitaminas ), constituyen aproximadamente un 20 % de los mensurandos que se miden en un laboratorio clínico (se puede llegar hasta un 65 %) 20 %
12 TRAZABILIDAD METROLÓGICA INCERTIDUMBRE Elementos del sistema de medida de referencia del calcio (Nivel 1) Procedimiento de medida de referencia primario Patrón de medida primario Gravimetría NIST: carbonato de calcio, fracción de masa SRM-915b (99,907 0,021) % U: 0,02 % Procedimiento de medida de referencia secundario Espectrometría de masas Patrón de medida secundario Procedimiento de medida seleccionado por el fabricante Patrón interno del fabricante Patrón comercial Procedimiento de medida de rutina NIST: suero humano SRM-909b (2,218 0,016) mmol/l U: 0,7 % Espectrometría de absorción molecular Material con valor asignado (3,290 0,039) mmol/l U: 1,2 % Material con valor asignado (2,320 0,039) mmol/l U: 1,7 % - Espectrometría de absorción molecular (arsenazo-iii, o-cresoftaleina complexona) - Potenciometría
13 MAGNITUDES CON RESULTADOS NO TRAZABLES A UNIDADES SI Nivel 2: medida internacional de consenso y material de calibración internacional (valor asignado con el procedimiento) Aplica: hemoglobina A 1c, enzimas
14 TRAZABILIDAD METROLÓGICA INCERTIDUMBRE Elementos del sistema de medida de referencia de la enzima alanina aminotransferasa (ALT) (Nivel 2) Procedimiento de medida internacional de consenso Espectrometría de absorción molecular IFCC 37 C, 2002 Material de referencia certificado IRMM: ERM-AD454/IFCC (3,09 0,07) kat/l U: 2,3 % Procedimiento de medida seleccionado por el fabricante Espectrometría de absorción molecular Patrón interno del fabricante Material con valor asignado (1,57 0,05) kat/l U: 3,3 % Patrón comercial Material con valor asignado (0,68 0,02) kat/l U: 3,6 % Procedimiento de medida de rutina Espectrometría de absorción molecular
15 MAGNITUDES CON RESULTADOS NO TRAZABLES A UNIDADES SI Nivel 3: medida internacional de consenso, sin material de calibración internacional Aplica: aprox. 30 tipos de magnitud (colesterol de HDL, factores coagulación, células..)
16 MAGNITUDES CON RESULTADOS NO TRAZABLES A UNIDADES SI Nivel 4: material de calibración internacional de consenso (Patrones Internacionales de la OMS), sin procedimiento de medida internacional (con protocolo de asignación de valor) Aplica: aprox. 300 tipos de magnitud (hormonas, anticuerpos, marcadores tumorales...)
17 TRAZABILIDAD METROLÓGICA INCERTIDUMBRE DEFINICIÓN UNIDAD: arbitraria patrón internacional de la OMS patrón interno del fabricante patrón comercial medida seleccionado por el fabricante medida de rutina muestra paciente medida de rutina RESULTADO (adaptado de ISO 17511:2003)
18 MAGNITUDES CON RESULTADOS NO TRAZABLES A UNIDADES SI Nivel 5: sin material de calibración internacional ni medida internacional, el fabricante establece el procedimiento y los materiales ( in house ) Aplica: aprox. 300 tipos de magnitud (marcadores tumorales, anticuerpos...)
19 TRAZABILIDAD METROLÓGICA INCERTIDUMBRE patrón interno del fabricante (panel de muestras) patrón comercial medida seleccionado por el fabricante medida de rutina muestra paciente medida de rutina RESULTADO (adaptado de ISO 17511:2003)
20 CONMUTABILIDAD DE UN MATERIAL DE REFERENCIA Propiedad de un material de referencia expresada por la proximidad, por una parte, entre los resultados de medida obtenidos para una magnitud determinada de este material, utilizando dos procedimientos de medida dados, y por otra, entre los resultados de medida para otros materiales especificados [VIM:2012, 5.15] material de referencia = patrón o calibrador otros materiales determinados = muestras de pacientes
21 Como se comprueba la conmutabilidad de un material?
22 Qué sucede cuando un calibrador no es conmutable? La trazabilidad al sistema de medida de referencia NO es posible El fabricante puede corregir el valor asignado al calibrador con un factor. El laboratorio debe tener en cuenta que este factor solo es valido para el método que comercializa el fabricante y usando los controles del mismo fabricante
23 FABRICANTES DE LA INDUSTRIA DEL DIAGNÓSTICO IN VITRO Directiva Europea 98/79/EC sobre productos sanitarios para el diagnóstico in vitro Anexo I (requisitos esenciales): La trazabilidad de los valores asignados a los materiales de calibración y/o control tiene que asegurarse mediante procedimientos de medida de referencia y/o materiales de referencia de alto orden jerárquico, siempre que sean accesibles...
24 Qué debe exigir el laboratorio a los fabricantes? Procedimientos de medida comerciales: El laboratorio debe solicitar a los fabricantes información sobre la trazabilidad metrológica y la incertidumbre de los valores asignados a los calibradores
25 Mensurando procedimiento de medida de referencia patrón de medida valor asignado al calibrador incertidumbre Triiodotironina (T3) Gravimetría C1: 1,30 nmol/l C2: 8,49 nmol/l C1: 0,04 nmol/l (3,1 %) C2: 0,35 nmol/l (4,1 %) Tirotropina (TSH) WHO 2 nd IRP (80/558) 1,50 mui/l 0,02 mui/l (1,3 %) Albúmina ERM-DA470k/ IFCC 37,2 g/l 1,2 g/l (3,2 %) Alanina aminotransferasa (ALT) IFCC (2002) medición manual 1,56 µkat/l 93,6 U/L 0,03 µkat/l (1,9 %) 1,8 U/L WHO: World Health Organization IFCC: International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine
26 magnitud procedimiento de medida de referencia patrón de medida valor asignado al calibrador incertidumbre β 2 -Microglobulina WHO 1 st IS (NIBSC, B2M) 4,00 mg/l 0,27 mg/l (6,8 %) Hemoglobina A 1c HPLC, NGSP (HPLC-CE, IFCC) C2: 0,4 (0,17) C3: 0,7 (0,26) C4: 0,9 (0,38) C5: 1,4 (0,68) C6: 1,8 (1,20) g/dl (mmol/l) C2: 0,008 (0,004) C3: 0,014 (0,005) C4: 0,019 (0,008) C5: 0,029 (0,014) C6: 0,037 (0,018) g/dl (mmol/l) CA 19.9 internal reference standard C2: 30 U/mL C3: 100 U/mL C4: 250 U/mL C5: 600 U/mL C6: 1200 U/mL C2: 0,51 U/mL C3: 0,89 U/mL C4: 2,04 U/mL C5: 7,71 U/mL C6: 19,85 U/mL Mioglobina in house reference system C1: 27,0 µg/l C2: 1170 µg/l C1: 0,40 µg/l (1,5 %) C2: 51,0 µg/l (4,4 %) HPLC: high-performance liquid chromatography NGSP: National Glycohemoglobin Standardization Program CE: capillary electrophoresis
27 Procedimientos de medida comerciales modificados o desarrollados por el propio laboratorio: Si el laboratorio debe preparar algún calibrador, es responsable de asegurar la trazabilidad metrológica del valor asignado hasta las referencias de mayor jerarquía metrológica asequibles y de calcular su incertidumbre Joint Committee on Traceability in Laboratory Medicine
28 EJEMPLO Calculo de la incertidumbre de un patrón de meropenem (MEM) preparado por pesada en el laboratorio para calibrar las mediciones por HPLC-MS Rigo R, Arbiol A, González de Aledo JM, Sanjuás M, et al. In vitro veritas 2015; UNIDAD de MEDIDA: g/l patrón de medida primario medida: gravimetría dilución patrón de medida de trabajo valor asignado ± incertidumbre
29 EJEMPLO Preparación Patrón primario (MEM 2,0 g/l): Se pesan 0,505 g de MEM (pureza 99 %) en una balanza de precisión y se transfieren volumétricamente a un matraz aforado de 250 ml que se enrasa con agua. Patrón de trabajo (MEM 100 mg/l): Se pipetean 5 ml del patrón primario en un matraz aforado de 100 ml que se enrasa con agua.
30 EJEMPLO Contribuciones a la incertidumbre: Pureza del MEM (Sigma) > 98 %. Pureza media: 99 %, = ± 1 % Distribución rectangular u = 1/ 3 = 0,58 % Pesada: Incertidumbre expandida (certificado de calibración) para masas cercanas a 0,5 g: 0,08 % u = 0,08/2 = 0,04 % Matraz aforado 250 ml: = ± 0,23 ml = 0,09 % Distribución triangular u = 0,09/ 6 = 0,038 % Pipeta 5 ml doble enrase: = ± 0,03 ml = 0,6 % Distribución triangular u = 0,6/ 6 = 0,245 % Matraz aforado 100 ml: = ± 0,1 ml = 0,1 % Distribución triangular u = 0,1/ 6 = 0,041 %
31 EJEMPLO Se calcula la incertidumbre expandida (U) (intervalo de confianza de 95 %) a partir de la combinación de la incertidumbre estándar de las distintas contribuciones: u c = 0, , , , ,041 2 u c = 0,63 % U = 2 x 0,63 = 1,3 % Para el valor asignado: (100,0 ± 1,3) mg/l
32 TRAZABILIDAD DE LOS RESULTADOS CONCLUSIONES La trazabilidad de los resultados de medida del laboratorio a un sistema de medida de referencia permite: Obtener resultados de medida más exactos Reducir la variabilidad de los resultados intra e interlaboratorios Mejorar el valor diagnóstico de los mensurandos Para ello se requiere: Organismos internacionales: completen los sistemas de medida de referencia (nivel 1) Industria: asigne valores trazables a sus calibradores conmutables junto con la incertidumbre de medida Laboratorios: usen calibradores trazables, controles adecuados y procedimientos de medida recomendados
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