MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO
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- Ernesto Vega Navarro
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1 MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO IBT QUÍMICA ORGÁNICA
2 FICHA TECNICA FICHA TÉCNICA QUIMICA ORGÁNICA Fecha: 12 Abril 2012 Nombre del catedrático: Edith Ponce Recinos Nombre de la práctica: Identificación de biomoléculas: CARBOHIDRATOS Clave: Número de práctica: 3 Duración en horas: 2 Justificación: Objetivos/Resultados de aprendizaje: El alumno aprenderá a identificar carbohidratos simples y complejo mediante técnicas de comunes de identificación de carbohidratos Identificar las estructuras básicas de las biomoléculas en este caso carbohidratos. Definir el papel de las biomoléculas en el campo de la biotecnología. Estudiar algunas propiedades de los carbohidratos. Laboratorio donde se desarrollo de la práctica: IBT Actividades a desarrollar: 1.- Identificación de propiedades físicas de carbohidratos 2.- El alumno realizara la identificación de: carbohidratos simples, carbohidratos complejos mediante métodos químicos comunes Evidencia a generar en el desarrollo de la práctica: 1.-Resolución de cuestionario, sobre las biomoléculas: CARBOHIDRATOS, 2.-Reporte de la práctica " "identificación de biomoléculas: CARBOHIDRATOS" COMPETENCIAS Realizar el análisis de carbohidratos para identificar sus características mediante metodologías estandarizadas. Documentar el desarrollo del análisis para establecer cadenas de custodio mediante el uso de registros. Manipular material y reactivos de laboratorio para preparar soluciones de acuerdo a la metodología establecida. HABILIDADES Utilizar técnicas de análisis para determinar las características de los carbohidratos mediante parámetros físicos, químicos Preparar soluciones para análisis de productos biotecnológicos mediante la metodología establecida en la normatividad vigente. Elaboró: Edith Ponce Recinos Revisó:
3 INTRODUCCIÓN Para la introducción el alumno desarrollará los siguientes temas: Explique que es un monosacárido, oligosacárido y un polisacárido. Clasificación de los monosacáridos en base al numero de atomos de carbono queposeen Escriba las formulas de una triosa, una terrosa, una pentosa y una hexosa. Explique que es una aldosa y una cetosa Escriba la formula de Fisher y de Haworth de una aldosa y una cetosa con nombres Enlace glucosídico, como se forma, estructura química de uno. Describa la estructura quimica de sacarosa, almidón, y glucógeno OBJETIVO Identificar las estructuras básicas de las biomoléculas en este caso carbohidratos. Definir el papel de las biomoléculas en el campo de la biotecnología. Estudiar algunas propiedades de los carbohidratos. MATERIALES REQUERIDOS POR EQUIPO (Cristalería) CANTIDAD MATERIAL ESPECIFICACIONES 15 Tubos de ensaye Medianos 1 Gradilla para tubos de ensaye Para tubos medianos 3 Pipetas De 10 ml 1 espátula pequeña 1 Vaso de precipitado De 50 ml 1 Vaso de precipitado De 100 L 1 Pinzas Para tubo de ensaye 1 Perilla de succión Para pipeta pequeña EQUIPO REQUERIDOS NOMBRE ESPECIFICACIONES 1 Balanza analítica 1 Parrilla de calentamiento OTROS MATERIALES REQUERIDOS (No suministrados por el Laboratorio) CANTIDAD MATERIAL ESPECIFICACIONES suficientes Frascos de vidrio para desechos de reactivos
4 REACTIVOS REQUERIDOS NOMBRE CANTIDAD S I R O Glucosa Sacarosa Almidón Xilosa Solución de Glucosa al 1% y al 2% Solución de Fructosa al 1% y 2% Solución de Xilosa al 1% Solución de Sacarosa 2% Solución de Lactosa 2% Solución de Maltosa 2% Reactivo de FEHLING (A y B) Reactivo de SELIWANOFF Agua destilada S: Riesgo a la Salud I: Riesgo de Incendio R: Riesgo de reactividad O:especificaciones Manejo y disposición de los reactivos requeridos: Manejo de residuos no peligrosos y peligroso y en qué tipo de recipiente ponerlo En este espacio se pone la manera en que se manejan y la disposición que se le dará a cada uno de los desechos (químicos y biológicos) que se generen durante la práctica. Nombre del reactivo Datos importantes de la ficha técnica Incendio: combate, derrame Salud Ambiente Datos de la ficha de seguridad de cada uno de los reactivos que se
5 utilizarán en el laboratorio. Datos de la ficha de seguridad de cada uno de los reactivos que se utilizarán en el laboratorio Datos de la ficha de seguridad de cada uno de los reactivos que se utilizarán en el laboratorio PROCEDIMIENTO O METODOLOGÍA I.- PRUEBAS DE SOLUBILIDAD EN AGUA 1. Tome 6 tubos de ensaye y numérelos. Agrega aproximadamente 15 mg de cada uno de los siguientes carbohidratos: tubo 1.- glucosa (dextrosa), al tubo 2 sacarosa, al tubo 3 almidón, al tubo 4 miel de abeja y, al tubo 5 agrega agua, este último tubo será el blanco. 2. Agrega 2 ml de agua destilada a los tubos, agita fuertemente y anota en la tabla con una (+) si es soluble y con el signo (-) si es insoluble. II.- REACCIÓN DE FEHLING 1. Tome 5 tubos de ensaye y numérelos del 1 al Pipetee 1 ml de las siguientes soluciones: solución de glucosa al 2% de al tubo 1 ; 1 ml de solución de fructosa al 2% al tubo 2 ; 1 ml de solución de sacarosa al 2% al tubo 3 ; 1 ml de solución de lactosa 2% al tubo 4 y 1 ml de solución de maltosa al 2% al tubo Agregue 0.5 ml del reactivo de Fehling A y 0.5 ml de reactivo de Felling B a cada uno de los tubos. 4. Coloque al mismo tiempo los 5 tubos en un baño de agua hirviendo y anote el tiempo. 5. Una vez que aparezca el precipitado color rojo ladrillo característico en la mayoría de los tubos (de uno a tres minutos), saque todos los tubos del agua y colóquelos en una gradilla. 6. Anote sus resultados, indicando cuales fueron los carbohidratos que dieron positiva la prueba y el tiempo en que apareció el precipitado en cada tubo. Los tubos con precipitado son los que contienen carbohidratos reductores. 7. Una vez anotados sus resultados lave inmediatamente los tubos donde hubo preciptado, pues si se tarda, luego no se podrá quitar la mancha del precipitado.
6 III.- REACCIÓN DE SELIWANOFF 1.- Coloque en la gradilla 3 tubos de ensaye y numérelos. 2.- Pipetee 1 ml de solución de xilosa al 1% al tubo 1 ; 1 ml de solución de glucosa al 1% al tubo 2 y 1 ml de solución de fructosa al 1% al tubo Agregue 2 ml de reactivo de Seliwanoff a cada uno de los tres tubos. 4.- Calentar en un baño de agua hirviente hasta la aparición de color 5.- Anote sus resultados en cuanto a aparición de color y tiempo. Aquellos tubos que den positiva la reacción serán los que contengan cetohexosas. Cuestionario: REPORTE DE LA PRÁCTICA 1. Investiga el fundamento de las reacciones de fehling y Seliwanoff y para que se usa. 2. En base a las pruebas de solubilidad efectuadas diga si los siguientes carbohidratos se disuelven en agua : 1 Lactosa 2 Celulosa 3 Ribosa 4 Maltosa 5 Galactosa 3. Deduzca si las siguientes sustancias darían positiva o negativa la prueba de fehling : 1 Jugo de uva 2 Leche 3 Sacarina 4 Algodón 5 Papa 6 Hígado 7 Jugo de fruta 8 Manteca 5. En que se diferencian las propiedades del azúcar común y de la miel.
7 7. En el laboratorio había unos frascos uno rotulado Fructosa otro glucosa y otro lactosa, pero al hacerse la limpieza se cayeron las etiquetas y ahora no se sabe cual es cual. Que pruebas se pueden hacer para etiquetarlos correctamente. EVIDENCIAS DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS DURANTE LA PRÁCTICA En este espacio se ponen las observaciones, graficas, cálculos matemáticos dibujos, datos, esquemas, tabla de datos, etc. Que se generaron durante el desarrollo de la práctica. DISCUSIÓN CONCLUSIÓN BIBLIOGRAFÍA Consultada por el maestro y por el alumno ANEXO: PREPARACIÓN DE LAS SOLUCIONES DE FELLING Y SELIWANOFF REACTIVOP DE SELIWANOFF. Disolver 0.7 g de resorcinol en 100 ml de HCl concentrado. Agregar agitando 100 ml de agua destilada. Guardar en frasco ambar REACTIVO DE FEHLING: Solución A: pesar g de sulfato de cobre y disolver en 300 ml de agua destilada, llevar a 500 ml con agua y conservar enfrasco con tapón de hule. Solución B.- pesar 125 g dé KOH y 173 g de tartrato de sodío y potasio, y llevar con agua destilada a 500 ml, conservar enfrasco revestido de parafina y con tapón de hule
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