SSI IMMUVIEW LEGIONELLA BLOOD TEST ANÁLISIS DE SANGRE IMMUVIEW LEGIONELLA

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1 SSI IMMUVIEW LEGIONELLA BLOOD TEST ANÁLISIS DE SANGRE IMMUVIEW LEGIONELLA

2 Aplicación El análisis de sangre ImmuView Legionella de Statens Serum Institute se ha creado para el diagnóstico de una infección de Legionella mediante la detección de anticuerpos de IgM contra la Legionella pneumophila del serogrupo y del serogrupo. El principio de esta prueba es la inmunocromatografía también llamada flujo lateral. La prueba es para el diagnóstico in vitro y sólo para uso profesional. Introducción Existen más de 50 especies conocidas del género Legionella de las cuales al menos 8 especies se han asociado con la enfermedad en el hombre. La Legionella pneumophila y, especialmente, los serogrupos y son responsables de la mayoría de infecciones en Europa [,2]. La Legionella pneumonia a menudo está asociada con manifestaciones sistémicas y es responsable de hasta un 0 % de los casos de neumonía hospitalizados adquiridos en la comunidad. Descripción Los antígenos de la Legionella pneumophilia del serogrupo y están revestidos en una membrana de flujo lateral. La prueba se vende como un kit que contiene 0 o 50 pruebas, respectivamente, e incluye tampón, un control positivo y una tarjeta de resultados para una medición semicuantitativa. La prueba puede utilizarse aproximad amente transcurridas -2 semanas tras la aparición de los síntomas. Si el resultado de la prueba es negativo, se recomienda repetil la prueba una semana después. A menudo, la seroconversión se observa en la tercera semana de infección, pero aproximadamente en un 25 % de los casos, la seroconversión aparece en la semana 5 o 6. 2

3 Principio Añada 5 µl de muestra de sangre (o suero) en el pocillo de muestra (S). Espere un minuto y añada cuatro gotas de solución tampón en el pocillo tampón (B). Lea la señal tras 20 minutos. onsulte las cifras a continuación. ImmuView Legionella Blood Test S B ID: B Salida de adición de disolución Serogrupo S Salida de muestra Serogrupo Banda de control Minutos Añada 5 µl de suero o de sangre minuto Añada 4 gotas de disolución tampón A B D E F 20 minutos A Negativo B Serogrupo Serogrupo D La banda más fuerte indica el serogrupo E + F Inválidos

4 Material proporcionado Prueba de sangre ImmuView Legionella 5 µl de suero de control positivo secado al vacío Tampón Material necesario no incluido Temporizador Tubos capilares onjunto de pipetas de 5 µl Procedimiento Recogida de muestra La sangre debe recogerse de forma aséptica mediante venopunción o técnicas capilares. Tenga cuidado cuando añada anticoagulantes o conservantes. Las muestras de suero deben refrigerarse tras la recogida o congelarse si la prueba no puede realizarse en siete días. Las muestras no deben ser congeladas y descongeladas repetidamente. No utilice un suero hiperlipémico y hemolizado. Adición de la muestra Añada 5 µl de sangre (o suero) en la salida de adición de muestra (S). Añada la muestra con cuidado para evitar la formación de burbujas de aire en la superficie de la almohadilla de separación de sangre. No toque la almohadilla de separación de sangre con la punta de la pipeta. ontrol positivo Añada una gota de tampón en el suero de control positivo liotilizado. Tras remover, añada 5 µl a la salida de adición de muestra (S) como se describe anteriormente. Adición de tampón Espere un minuto hasta que el suero (la muestra positiva) se haya empapado a través de la membrana. A continuación, añada cuatro gotas de tampón (00 µl) a 4

5 la salida de adición de tampón (B) mediante el gotero del frasco. Deje la prueba a temperatura ambiente durante 20 minutos. Lectura de la señal Una línea roja visible del serogrupo o representa un resultado positivo para una infección previa, reciente o actual del serogrupo o del serogrupo. Si hay dos bandas visibles, la banda más fuerte indica el serogrupo que causa la infección. Pero, en algunos casos, puede detectar una infección por otro serogrupo. Lo mismo se aplica en el caso de dos bandas igual de fuertes. La línea de control siempre debe ser positiva tras 20 minutos, del contrario, la prueba no es válida. Se define un aumento del nivel de anticuerpos como una diferencia significativa en la intensidad de la banda (el aumento de un nivel a un nivel superior) entre dos muestras de sangre/suero (leídas preferentemente el mismo día). El aumento en el nivel de anticuerpos es diagnóstico de una infección por Legionella actual o reciente. Para una medición semicuantitativa, la intensidad de la línea roja puede dividirse como se indica a continuación: Level. Reacción fuerte, positivo Level 2. Reacción media, positivo Level. Reacción débil, positivo Ninguna reacción o reacción muy débil, negativo 5

6 Sensibilidad Validación interna de un cultivo en pacientes positivos: Serogrupo : 80 % Serogrupo : 96 % Positivo falso mediante la prueba de donantes de sangre: 2 % Limitaciones La prueba de sangre ImmuView Legionella ha sido creada para pruebas de sangre o suero humanos. Un resultado negativo no descarta una infección por Legionella, especialmente en una fase temprana de la infección, ni si la infección ha sido causada por un serogrupo distinto al serogrupo o u otras especies de Legionella. Las muestras de sangre o suero recogidas en una fase temprana de la infección pueden ofrecer un resultado negativo en la prueba de sangre ImmuView Legionella ya que el título de anticuerpos es demasiado bajo. Un resultado positivo indica una infección actual o reciente de Legionella pneumophila, pero la prueba no distingue entre una infección asintomática y no-neumónica (fiebre de Pontiac) y una infección por Legionella (la enfermedad de los legionarios). El propósito de la prueba no es sustituir la prueba de antígeno urinaria, PR o cultivo. Una terapia antibiótica temprana puede inhibir la respuesta de los anticuerpos y es posible que algunos pacientes no desarrollen niveles de anticuerpos por encima de límites detectables. Precauciones Todos los reactivos deben estar a temperatura ambiente (8-28 º) antes de la prueba. Utilice solo los componentes del kit. No mezcle componentes de distintos lotes de kits. Debe utilizar puntas de pipetas limpias para cada paso de la prueba. 6

7 Trate siempre la muestra de sangre como potencialmente infecciosa. El material de los pacientes y otros materiales potencialmente infecciosos deben eliminarse como material infeccioso. Almacenamiento y caducidad uando reciba el kit, almacénelo refrigerado a (2-8 º). Una vez haya roto el sellado, las pruebas y las soluciones deben almacenarse a temperatura ambiente (8-28 º) en un lugar oscuro. La fecha de caducidad está impresa en el embalaje. Asistencia Si tiene cualquier duda referente a la prueba de sangre ImmuView Legionella póngase en contacto con nosotros a través de: SSI Diagnostica, Herredsvejen 2, DK-400 Hillerød, Dinamarca, , Referencias. Legionella pneumonia 2008, Statens Serum Institut, EPI-News no 40, 2009 and Legionella pneumonia 2007, Statens Serum Institut, EPI-News no 22, Joseph A, Ricketts KD (200) Legionnaires Disease in Europe Eurosurveillance 5(8):25, February Article 4. Información y pedidos Statens Serum Institut SSI Diagnostica Herredsvejen 2 DK-400 Hillerød Dinamarca T F w ssi.dk/ssidiagnostica shop.ssi.dk 7

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