Quito Ecuador EXTRACTO LECHE EN POLVO. DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE ÁCIDO LÁCTICO Y LACTATOS (ISO 8069:2005, IDT)

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1 Quito Ecuador NORMA TÉCNICA ECUATORIANA NTE INEN-ISO 8069 Primera edición LECHE EN POLVO. DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE ÁCIDO LÁCTICO Y LACTATOS (ISO 8069:2005, IDT) DRIED MILK. DETERMINATION OF CONTENT OF LACTIC ACID AND LACTATES (ISO 8069:2005, IDT) Correspondencia: Esta Norma Técnica Ecuatoriana es una traducción idéntica de la Norma Internacional ISO 8069:2005 DESCRIPTORES: Leche, polvo, contenido, ácido láctico, lactatos ICS: Páginas ISO 2005 Todos los derechos reservados INEN 2014.

2 NTE INEN-ISO Prólogo nacional Esta Norma Técnica Ecuatoriana NTE INEN-ISO 8069 es una traducción idéntica de la Norma Internacional ISO 8069:2005, Dried milk. Determination of content of lactic acid and lactates, la fuente de la traducción es la norma adoptada por AENOR. El comité nacional responsable de esta Norma Técnica Ecuatoriana y de su adopción es el Comité Interno del INEN... ISO 2005 Todos los derechos reservados INEN i

3 - 5 - ISO 8069:2005 ÍNDICE Página PRÓLOGO ISO... 6 PRÓLOGO IDF OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN TÉRMINOS Y DEFINICIONES PRINCIPIO REACTIVOS APARATOS TOMA DE MUESTRAS PREPARACIÓN Preparación de la muestra para análisis Porción para análisis Análisis en blanco Preparación de la disolución y desproteinización PROCEDIMIENTO Ensayo para comprobar la actividad de los reactivos Determinación CÁLCULOS Y EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS Cálculos Expresión de los resultados PRECISIÓN Análisis interlaboratorios Repetibilidad Reproducibilidad INFORME DEL ENSAYO ANEXO A (Normativo) REGLAS SOBRE LAS BUENAS PRÁCTICAS DE LABORATORIO (GLP, GOOD LABORATORY PRACTICE) PARA LA REALIZACIÓN DE ANÁLISIS ENZIMÁTICOS BIBLIOGRAFÍA... 21

4 ISO 8069: PRÓLOGO ISO (la Organización Internacional de Normalización) es una federación mundial de organismos nacionales de normalización (organismos miembros de ISO). El trabajo de preparación de las normas internacionales normalmente se realiza a través de los comités técnicos de ISO. Cada organismo miembro interesado en una materia para la cual se haya establecido un comité técnico, tiene el derecho de estar representado en dicho comité. Las organizaciones internacionales, públicas y privadas, en coordinación con ISO, también participan en el trabajo. ISO colabora estrechamente con la Comisión Electrotécnica Internacional (IEC) en todas las materias de normalización electrotécnica. Las normas internacionales se redactan de acuerdo con las reglas establecidas en la Parte 2 de las Directivas ISO/IEC. La tarea principal de los comités técnicos es preparar normas internacionales. Los proyectos de normas internacionales adoptados por los comités técnicos se envían a los organismos miembros para su votación. La publicación como norma internacional requiere la aprobación por al menos el 75% de los organismos miembros con derecho a voto. Se llama la atención sobre la posibilidad de que algunos de los elementos de esta norma internacional puedan estar sujetos a derechos de patente. ISO no asume la responsabilidad por la identificación de cualquiera o todos los derechos de patente. La Norma Internacional ISO 8069 IDF 69 fue preparada por el Comité Técnico ISO/TC 34 Productos alimenticios, Subcomité SC 5, Leche y productos lácteos, y la Federación Internacional de Lechería (IDF). Se ha publicado conjuntamente por ISO e IDF. Esta edición de la Norma ISO 8069 IDF 69 anula y sustituye a la Norma ISO 8069:1986, que ha sido revisada técnicamente.

5 - 7 - ISO 8069:2005 PRÓLOGO IDF (la Federación Internacional de Lechería) es una federación mundial del sector lácteo que cuenta con un Comité Nacional en cada uno de los países miembro. Cada Comité Nacional tiene el derecho de estar representado en los Comités Permanentes de la IDF que llevan a cabo el trabajo técnico. IDF colabora con ISO y con AOAC Internacional en el desarrollo de métodos de análisis y de muestreo normalizados para leche y productos lácteos. Los proyectos de norma internacional adoptados por los Grupos de Trabajo y los Comités Permanentes se circulan a los Comités Nacionales para votación. La publicación como norma internacional requiere la aprobación de al menos el 50% de los Comités Nacionales de IDF que emiten voto. Se llama la atención sobre la posibilidad de que algunos de los elementos de esta norma internacional puedan estar sujetos a derechos de patente. IDF no asume la responsabilidad por la identificación de cualquiera o todos los derechos de patente. La Norma Internacional ISO 8069 IDF 69 fue preparada por la Federación Internacional de Lechería (IDF) y el Comité Técnico ISO/TC 34 Productos alimenticios, Subcomité SC 5 Leche y productos lácteos. Se ha publicado conjuntamente por ISO e IDF. Todo el trabajo se ha llevado a cabo en el Grupo de Trabajo conjunto ISO-IDF Determinación de lactosa y lactatos, del Comité Permanente sobre Principales Componentes de la Leche, bajo los auspicios de Mr. J. Romero (US) coordinador del proyecto. Esta edición de la Norma ISO 8069 IDF 69 anula y sustituye a la Norma IDF 69:1987 que ha sido revisada técnicamente.

6 ISO 8069: OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN Esta norma internacional describe un método enzimático para la determinación del contenido de ácido láctico y de lactatos en todos los tipos de leche en polvo. 2 TÉRMINOS Y DEFINICIONES Para los propósitos de este documento, se aplica el siguiente término y su definición. 2.1 contenido de ácido láctico y de lactatos: Masa de las sustancias determinadas mediante el procedimiento descrito en esta norma internacional. NOTA Se expresa en miligramos de ácido láctico por cada 100 g de materia sólida no grasa. 3 PRINCIPIO Se disuelve una porción para análisis de leche en polvo en agua caliente. Las proteínas y la materia grasa se precipitan y se filtran. El filtrado se trata con las siguientes enzimas y reactivos bioquímicos, añadidos de forma simultánea, pero que actúan de forma secuencial: a) L-lactato deshidrogenasa (L-LDH) y D-lactato deshidrogenasa (D-LDH), en presencia de dinucleótido de nicotinamida y adenina (NAD), para oxidar el lactato a piruvato convirtiendo el NAD en su forma reducida NADH. b) glutamato piruvato transaminasa (GPT), en presencia de L-glutamato, para transformar el piruvato en L-alanina convirtiendo el L-glutamato en α-cetoglutarato. La cantidad de NADH producida se determina mediante espectrofotometría a una longitud de onda de 340 nm, y es proporcional al contenido de ácido láctico y lactatos. 4 REACTIVOS Se utilizan exclusivamente reactivos de grado analítico reconocido. El agua utilizada en la preparación de las disoluciones enzimáticas debe ser como mínimo de una pureza de agua bidestilada, y el agua utilizada para otros fines debe ser destilada o como mínimo de una pureza equivalente. 4.1 Disolución de ferrocianuro (II) potásico, c(k 4 [Fe(CN) 6 ] 3H 2 O) = 35,9 g/l. Se disuelven 35,9 g de ferrocianuro(ii) potásico trihidratado en agua. Se diluye con agua hasta un volumen de ml y se mezcla. 4.2 Disolución de sulfato de zinc, c(znso 4 7H 2 O) = 71,8 g/l. Se disuelven 71,8 g de sulfato de zinc heptahidratado en agua. Se diluye con agua hasta un volumen de ml y se mezcla. 4.3 Disoluciones de hidróxido sódico Disolución I de hidróxido sódico, c(naoh) = 10 mol/l. Se disuelven 400 g de hidróxido sódico en agua. Se diluye con agua hasta un volumen de ml y se mezcla.

7 Documento: NTE INEN-ISO 8069 INFORMACIÓN COMPLEMENTARIA TÍTULO: LECHE EN POLVO. DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE ÁCIDO LÁCTICO Y LACTATOS (ISO 8069:2005, IDT) Código: ICS 8069 ORIGINAL: Fecha de iniciación del estudio: REVISIÓN: La Subsecretaría de la Calidad del Ministerio de Industrias y Productividad aprobó este proyecto de norma Oficialización con el Carácter de por Resolución No. publicado en el Registro Oficial No. Fechas de consulta pública: al Fecha de iniciación del estudio: Comité Interno del INEN: Fecha de iniciación: Fecha de aprobación: Integrantes del Comité Interno: NOMBRES: Eco. Agustín Ortiz (Presidente) Ing. José Luis Pérez Ing. Paola Castillo Ing. Tatiana Briones Ing. Laura González Ing. Bolívar Cano Ing. Gonzalo Arteaga (Secretaría Técnica) INSTITUCIÓN REPRESENTADA: DIRECCION EJECUTIVA COORDINACIÓN GENERAL TÉCNICO DIRECCIÓN DE NORMALIZACIÓN DIRECCIÓN DE VALIDACIÓN Y CERTIFICACIÓN DIRECCIÓN DE METROLOGÍA DIRECCION DE REGLAMENTACIÓN DIRECCIÓN DE NORMALIZACIÓN Otros trámites: Compromiso Presidencial N del 08 de junio del 2013, para el fortalecimiento de normas del Instituto Ecuatoriano de Normalización INEN La Subsecretaría de la Calidad del Ministerio de Industrias y Productividad aprobó este proyecto de norma Oficializada como: Voluntaria Por Resolución No de Registro Oficial Suplemento No. 155 de

8 Instituto Ecuatoriano de Normalización, INEN - Baquerizo Moreno E8-29 y Av. 6 de Diciembre Casilla Telfs: (593 2) al Fax: (593 2) Dirección Ejecutiva: direccion@inen.gob.ec Dirección de Normalización: normalizacion@inen.gob.ec Regional Guayas: inenguayas@inen.gob.ec Regional Azuay: inencuenca@inen.gob.ec Regional Chimborazo: inenriobamba@inen.gob.ec URL: