Tema 2: Métodos en patología

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1 Tema 2: Métodos en patología 1. Autopsias La Anatomía Patológica se originó en torno a las salas de autopsias. De la observación surge el informe de la autopsia clínica. El objetivo del mismo es dar respuestas a las cuestiones planteadas por los clínicos. Para ello debe hacerse con un protocolo muy centrado y estricto, haciendo una descripción microscópica, otra macroscópica y estableciendo la correlación anatomo-clínica. El informe debe incluir: La enfermedad fundamental Las alteraciones concomitantes derivadas de dicha enfermedad Alteraciones independientes de la enfermedad fundamental. Raras en niños Causa de la muerte NOTA: La causa de la muerte es una enfermedad, no una función. Ej.: apendicitis deriva en sepsis que provoca la muerte. El número de autopsias ha descendido en todo el mundo debido a: Motivos clínicos: o Desconocimiento de la utilidad de la autopsia o Desconocimiento del procedimiento administrativo o Ausencia de entrenamiento en solicitar autopsias o Falta de comunicación o Percepción de que con los avances tecnológicos ya no es necesaria o Temor a los hallazgos inesperado. En no pocas ocasiones, las autopsias ponen de manifiesto los errores de los clínicos. En el 12% de autopsias se descubren errores graves que si no se hubiesen realizado, no habría muerto el paciente. De esta manera se evitan los litigios judiciales. o Frustración por los resultados deficientes e ininteligibles Motivos administrativos Motivos por parte de los patólogos o Tarea ingrata y a menudo desasistida o Falta de recursos, humanos, materiales y organizativos. o Presión... Motivos por parte de los familiares 2. Patología quirúrgica 1

2 Análisis de biopsias Consiste en analizar las biopsias extraídas por los clínicos con la intención de realizar tratamientos específicos para cada enfermedad. En este campo ha sido muy importante la tinción hematoxilina-eosina porque permite diferenciar las distintas células y estrucuturas que forman los tejidos 1. Además se han desarrollado otras tinciones convencionales como la reticulina. Análisis de biopsia intraoperatorias Otra parte del trabajo consiste en analizar los fragmentos que los cirujanos extraen en quirófano, las biopsias intraoperatorias. Algunas de las preguntas a las que se buscan respuesta son: El tumor es benigno o maligno? Los bordes están afectados? Microscopios El análisis de biopsias se realiza gracias al microscopio, pero estos instrumentos son muy variados. Microscopios de luz polarizada. Permiten ver los hilos de sutura de los cirujanos y otros elementos birrefringentes como la queratina o la amiloide. Microscopios electrónicos. Apenas se emplean. Permiten ver el interior de la célula por eso se suelen usar para caracterizar células tumorales Inmunofluorescencia e inmunohistoquímica 1. Inmunofluorescencia con anticuerpos marcados con fluoreceína, Muy útil para enfermedades del riñon y de la piel. 2. Inmunohistoquímina con anticuerpos monoclonales para determinadas proteínas. Permite identificar las proteínas de cada tejido en cada situación. 1 Sería interesante repasar cómo se realizan estas tinciones. 2

3 Esta técnica se emplea para: - Localizar antígenos de la membrana epitelial, - Diferencias subpoblacones linfocitarias - Localizar las células endoteliales de los vasos con marcadores anti-cd8 y anti- CD34). - Identificar células que proliferan gracias al marcador de mitosis celular, ki67 - Tratamiento. o sarcoma gastrointestinal intestinal con mutación de C15. Si hay mutación tratamiento con gleevec unido a anticuerpo monoclonal. o Ej.: tratamiento específco para mutación c-erb-2. o Marcadores para p5(6) Citofluorómetro Para estudios de marcadores celulares también se puede emplear el citofluorómetro. Se disuelven las células con distintos marcadores y se cuantifica cada población. Se emplea mucho para caracterizar linfomas. Ta mbién se puede 3

4 emplear para cuantificar el DNA de las células. Esto es útil ya que algunos tumores tienen una cantidad aneuploide de ADN. Tissue arrays. Los análisis inmunohistoquímicos suelen necesitar control externo. Otra forma de ver lo mismo sin necesidad de control es a través de los tissue arrays. Se trata de bandejas con distintos tipos de tumor o tejido. Al colocar sobre la bandeja el tejido reacciona de un odo distinto en cada celda lo que indica qué enfermedad tiene el paciente Ej.: Permite diferenciar entre carcinoma escamoso de pulmón y adenocarcinoma. Control de calidad Interno Externo; cada tres mese te manda unas muestras sobre las que realizar unas pruebas. Técnica Diagnóstico Sesiones clínico-patológicas Actualidad bibliográfica. Hoja de petición de informe patológico Filiación del pacietne Datos de identificación de la biopsia Resumen de la historia clínica Antecedentes y datos (ginecológcas, clínicas) pertinentes Diasgnóstico clínico. 4

5 3. Patología citológica Extensiones La patología citológica consiste en el estudio de las alteraciones de la enfermedad que se analizan tomando una pequeña muestra de una superficie. Con ello, se prepara una extensión y se hace la tinción Papanicolao, una tinción diferencial o policroma que usa tres colorantes básicos. Aplicaciones Diagnóstico de infecciones Diagnóstico de tumores Información de la situación endocrina de un órgano. Citología general... Ginecológica: para descartar cáncer de cérvix... Esputos Orina Generalmente en los órganos se hace una punción-aspiración con aguja fina ( mm) Algunas de las aspiraciones se centrifugan para que se separen las células, lo que las hace muy fácilmente visibles. PCR En este campo, causó gran revolución la PCR porque permitió el estudio de las alteraciones genéticas que podían causar enfermedad así como el estudio del genoma bacteriano. Por otro lado, mediante la PCR inversa se puede estudiar también retrovirus 5

6 Proteómica Ej.: Sarcoma de Ewing. - Se puede cuantificar la progresión del tumor por PCR en células de sangre periférica. - Pero, cada día se estudia más por hibridación in situ que permite localizar las células tumorales. En el futuro, parece que la proteómica tiene gran peso. Se buscan elementos diferenciales entre las proteínas del tejido estándar y las del tejido con carcinoma. 6