GUIA DE LABORATORIO PRACTICA 2 MICROSCOPIA PROGRAMA DE ENFERMERIA CURSO INTEGRADO DE PROCESOS BIOLOGICOS

Transcripción

1 GUIA DE LABORATORIO PRACTICA 2 MICROSCOPIA PROGRAMA DE ENFERMERIA CURSO INTEGRADO DE PROCESOS BIOLOGICOS Leidy Diana Ardila Leal Docente. INTRODUCCIÓN La búsqueda del hombre por lo desconocido ha llevado a que desarrolle e invente instrumentos versátiles que le permitan visualizar desde las cosas más lejanas como los telescopios, así como los microscopios objeto de esta guía, el cual permite ver formas de vida muy pequeñas y la unidad de vida célula. El microscopio es un instrumento que ha permitido a los biólogos poder reconocer la organización estructural de la vida trabaja de forma que magnifica la imagen aumentándose la capacidad de detalle de los microorganismos organismos pequeños. Al pasar de los años a partir del primer microscopio desarrollado el avance de la tecnología ha permitido que el microscopio cada vez sea mejor, llegando a desarrollar microscopios que permiten la observación cada vez de estructuras más pequeñas. El microscopio compuesto es un sistema de amplificación de dos niveles en el cual la pieza es amplificada primero por un sistema de lentes y en segundo lugar por el lente ocular. OBJETIVO Reconocer y aprender la importancia y uso del microscopio óptico como herramienta de trabajo de la biología y las áreas relacionadas.

2 MARCO TEORICO El microscopio óptico compuesto, uno de ellos constituye el instrumento principal de todos los utilizados en el estudio de la arquitectura fundamental de lo viviente. Es una herramienta esencial para los biólogos. Es un requisito indispensable para el estudiante el aprender a cuidar, conservar y utilizar el microscopio. Como todo instrumento, puede usarse mejor si se conoce bien. Este instrumento se ha hecho de uso obligado en investigación y tecnología y ha permitido por más de dos siglos ir respondiendo a las interrogantes que los estudiosos de la naturaleza y la vida se han planteado. Existen varias marcas comerciales del microscopio con que ustedes trabajaran, presentan modificaciones estructurales accesorias, pero todos conservan el diseño básico fundamental. En los esquemas anexos ustedes pueden conocerlos y percatarse de los detalles diferenciales, como asimismo ayudase en el conocimiento de la ubicación de todas y cada una de las partes integrantes. El microscopio está formado por dos sistemas. 1. Sistema estructural estativo o mecánico. 2. Sistema de lentes. Ocular Cabeza Revolver Objetivos Brazo Condensador Fuente de Luz Platina Tornillo Micrométrico y Micrométrico Base

3 Recomendaciones importantes. El microscopio es un instrumento de trabajo delicado. Por lo tanto, es recomendable que siempre conspiren las siguientes situaciones que les permitirán seguridad en el uso del microscopio. 1. Cuando tenga que trasladar el instrumento sujételo siempre por la columna. 2. Llévelo en posición vertical, puesto que si se inclina se pueden caer los oculares. 3. Mantenga los oculares limpios usando solamente el paño apropiado (papel de arroz). Por favor nunca use paños inadecuados o los dedos. 4. Nunca deje el microscopio en el borde del mesón 5. Una vez ubicado el microscopio no lo mueva más. 6. No mueva ninguna pieza si no conoce exactamente su uso. 7. Cuando realice alguna preparación evite mojar el microscopio con algún líquido (reactivos-colorantes) y en caso de suceder límpielo inmediatamente. 8. El desplazamiento del portaobjetos sobre el microscopio deben ser suaves, ya que de esta forma evitas algún accidente. Defectos frecuentes en el manejo del microscopio. 1. Los defectos relacionados con la iluminación pueden deberse a que el objetivo o el condensador no se encuentren bien ubicados, inconvenientes por filtros inadecuados o diafragma muy cerrado 2. La visualización de imágenes extrañas se pueden deber a polvo u otros elementos extraños en los oculares, el objetivo, el cubreobjetos o portaobjetos. Las burbujas de aire pueden también interferir en una visualización y este se reconoce por tener forma de círculo con bordes negros. Propiedades del microscopio. 1. Poder de aumento: Es la capacidad del microscopio que expresa la razón entre el tamaño de la imagen que produce el microscopio y el tamaño del objeto observado. Como el microscopio tiene dos sistemas ópticos, cada uno de ellos es capaz de agrandar la imagen, el aumento total es igual al producto de los aumentos dados por el ocular y el objetivo respectivamente.

4 2. Poder de resolución: Es la capacidad del instrumento de dar imágenes bien definidas de puntos situados muy próximos entre sí. 3. Límite de resolución: Es la distancia mínima que puede existir entre dos puntos para que puedan ser definidos como tales. 4. Poder de definición: Consiste en la capacidad de dar imágenes claras de contornos precisos. Reside en la corrección de las aberraciones propias de las lentes. 5. Poder de penetración: Así como el poder de resolución permite averiguar detalles colocados a la misma altura, el poder de penetración permite averiguar hasta que límite, detalles de estructuras situadas en diferentes planos, realmente están a niveles distintos con un mismo enfoque. Interpretación de la imagen observada Al usar el microscopio, no solamente es importante enfocar bien la imagen, sino también interpretar lo que se observa. La profundidad de foco (la porción del objeto perfectamente enfocada) es muy pequeña, especialmente con los objetivos de mayor aumento, y por tal razón la imagen observada es plana. Para apreciar la estructura tridimensional de los objetos se puede enfocar hacia arriba y hacia abajo a través del ejemplar (si éste es grueso). MATERIALES Materiales entregados en la practica Microscopio Vidrio de reloj Caja de petri Materiales traidos por el estudiante Un trozo de corcho (vino) Hojilla o cuchilla de bisturi Trozos de lana de varios colores Papel periodico (recortar letra e) Tijeras Papel milimetrado Papel de arroz Cubreobjetos Portaobjeto

5 METODOLOGÍA Observación de corcho Tomar un trozo de corcho y con la ayuda de una hojilla realiza un corte fino de corcho teniendo en cuenta que sea suficientemente delgado para poder realizar una buena observación al microscopio. Coloca el corte de corcho sobre el portaobjetos y sobre este un cubreobjetos. Móntalos sobre la platina del microscopio y procede a enfocar debidamente, para eso sigue los siguientes pasos: 1. Inicia siempre la observación partiendo del menor aumento. Colocar el objetivo de menor aumento en posición de empleo y bajar la platina completamente. 2. Colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas. 3. Comenzar la observación con el objetivo de 4x (ya está en posición). 4. Para realizar el enfoque primero con el macrométrico acerca la lente al objetivo esto debe hacerse mirando directamente, una vez haya subido lo necesario mira a través de los oculares y lentamente ve moviendo el tornillo macrométrico y cuando se observe algo nítida la muestra, girar el micrométrico hasta obtener un enfoque fino. 5. Dibuja lo observado indicando sus características Observación de la letra e Toma una letra e y colócala sobre una lámina portaobjetos, adiciona una gota de agua y procede a colocar sobre este una laminilla cubreobjetos. Móntalo al microscopio de acuerdo al procedimiento anteriormente descrito. Luego de enfocar la letra e procede a observar la posición de la letra con relación a la que se encuentra en la lámina portaobjetos (Este procedimiento debe realizarse con el objetivo de 4x). Describe que sucede Luego realizar la observación y tener el procedimiento anterior bien claro utiliza de forma sucesiva los objetivos de 10x y 40x y describe que sucede con la imagen.

6 Observación de hilos de colores. Corta un trozo de hilo (lana) de colores de aproximadamente de 1cm de largo, si este es muy grueso trata de deshilacharlo, colócalo sobre una lámina portaobjetos y visualiza al microscopio. Ten en cuenta el punto de inserción de los hilos y la secuencia de hilos. Dibuja y describe Observación de papel milimetrado Recortamos un cuadrito de una hoja milimetrado de 1cm x 1cm y lo colocamos sobre un portaobjetos, le agregamos una gota de agua, luego llevamos la muestra a la platina y procedemos a enfocar el papel milimetrado con el objetivo de 4X y tratamos que una línea del papel milimetrado quede como diámetro del campo visual, procedemos a observar la muestra con los objetivos de 10X, 40X, y 100X. Con cada uno de los objetivos cuenta el número de milímetros que se ven y estima aproximadamente la fracción sobrante, si la hay. El resultado será el diámetro del campo visual para ese aumento (objetivo x ocular). Realiza el cálculo para cada uno de los objetivos. Interrogante para resolver antes de la práctica Porque es útil el microscopio? Quién descubrió el microscopio? Qué función desempeña cada una de las partes del microscopio? Interrogantes para resolver después de elaborada la práctica. Cómo se componen el sistema de lentes del microscopio compuesto? Explique cómo se da la trayectoria del rayo de luz a través del microscopio y por qué se invierte la imagen que se logra visualizar en los oculares. Qué precauciones se deben tener al usar cada uno de los objetivos del microscopio? Especialmente cuando se usa aceite de inmersión.