CERTIFICACIÓN DE PLANTAS DE CITRICOS PARA CONTRIBUIR A LA RECONVERSIÓN CITRICOLA DE VERACRUZ

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1 CERTIFICACIÓN DE PLANTAS DE CITRICOS PARA CONTRIBUIR A LA RECONVERSIÓN CITRICOLA DE VERACRUZ ING. JOSE SANDOVAL RINCÓN Muy buenos días, el día martes durante este evento se trataron temas muy interesantes sobre lo que fue el problema de certificación tanto a nivel nacional a través del Ing. Pedro Robles de la Dirección General de Sanidad Vegetal y también participó el Doctor Orlando Sampaio Pasos por parte de Brasil con una ponencia muy interesante el Doctor Jonh Da Graca parte de Estados Unidos, el Doctor Jiménez Villasuso por parte de Cuba donde expusieron todo lo que han desarrollado acerca del Programa de Certificación. En esta ocasión nos corresponde presentar lo que tenemos aquí para Veracruz en cuanto a este tema los responsables de este trabajos somos un servidor José Sandoval Rincón como colaboradores Maestro en Ciencia Sergio Curti Díaz, Xoxhilt Salazar, Alejandro Flores Rodríguez, José Raúl Rodríguez Rodríguez, y Ariana Uribe Bustamante. Bueno a raíz alrededor del año 2001 a México se le empezó a prestar atención a la certificación de cítricos a raíz del virus de la Tristeza de los Cítricos, tenían antecedentes de que en la muerte que ocasiona alrededor de mas de 106 millones de árboles a nivel mundial y que se encontraba en ese tiempo ya en los 23 estados citrícolas de nuestro país, además aunado a esta enfermedad existen enfermedades virales como la psorosis como la Exocortis y la Cachexia y de acuerdo a Rocha Peña un Investigador del INIFAP el 80% de los árboles en Veracruz cuando menos presentan alguna de estas enfermedades. Y también cuando se maneja material certificado se puede incrementar la producción de 10 a 25% de rendimiento esto con base a lo señalado por otros investigadores. Otro problema que tenemos en México es la escasa diversidad de materiales especies cítricas ayer lo comentaba Marcelo Zanneti en su plática y era una de las recomendaciones que daba par la citricultura mexicana incrementar la diversidad en cuanto a patrones en cuanto a variedades con el propósito de evitar que algún productor algún técnico, algún investigador traiga de manera clandestina materiales los introduzca al país fuera de control de Sanidad Vegetal y pueda traer el riesgo de introducir enfermedades potenciales que cuarentenarias que carecemos que no tenemos en México. Debido a eso el INIFAP Campo Experimental Ixtacuaco desarrollo el proyecto del Banco de germoplasma norte fundación de cítricos para Veracruz durante el periodo y en el 2008 continuo con el proyecto de saneamiento y certificación de germoplasma de cítricos con alto potencial productivo, calidad de fruta para reconvertir la citricultura veracruzana para el periodo Para este proyecto se ha recibido el apoyo del Gobierno del estado de Veracruz, la Fundación Produce A.C. fondos mixtos CONACyT Veracruz, el Consejo Estatal Citrícola A.C. de Veracruz, en aquel tiempo era presidido por el Lic. Antonio Soberon Ferrer y también con el gran apoyo de la Asociación de Viveristas Certificados de Veracruz para poder desarrollar este proyecto, un gran apoyo también hemos recibido de los citricultores de Veracruz ya que para el rescate de materiales ellos han aportado sus árboles e información muy valiosa para el rescate. También aprovechamos para agradecer el apoyo que nos ha dado Alba Ríos Cruz de PROCIGO y Francisco Arámbulo también de esa empresa ya que han contribuido de alguna forma en la formación de la gente en la fase de saneamiento

2 OBJETIVO GENERAL DEL PROYECTO Es mantener sano el germoplasma de cítricos de interés estatal y nacional el cual será la base genética para el proceso de propagación comercial y para las investigaciones que logren mejorar la producción de la citricultura a mediano y largo plazo. OBJETIVOS ESPECIFICOS Rescate estatal, nacional e introducción del extranjero diversas variedades cítricas con alto potencial nutritivo de producción de fruta. Otra de los objetivos del proyecto es la obtención de plantas libres de virus y viroides mediante microtermoterapia y microinjerto y su verificación fitosanitaria. Establecimiento de un banco de germoplasma y lote de fundación de cítricos certificado ante la Dirección General de Sanidad Vegetal Multiplicación de variedades comerciales en el lote de fundación y su distribución a viveristas certificados ENTRE LA METODOLOGÍA QUE HEMOS IDO DESARROLLANDO Este experimento se esta desarrollando en el INIFAP-Campo Experimental Ixtacuaco ubicado en Tlapacoyan Ver. ACTIVIDADES DEL PROYECTO CONSTA DE 4 ETAPAS Rescate de variedades e introducción de germoplasma del extranjero Saneamiento y verificación sanitaria Establecimiento de banco de germoplasma protegido a campo abierto y un lote de fundación Certificación del banco de germoplasma y lote de fundación RESCATE DE VARIEDADES Selección de árboles por su alto potencial productivo y calidad de fruta Selección de árboles de preferencia con 10 años de edad o mas en producción También se caracterizaron agronómica los árboles Y determinación calidad interna y externa de la fruta EN CUANTO A LA INTRODUCCIÓN DE VARIEDADES Se realizó con base a los requerimientos de los viveristas certificados, productores y técnicos de Veracruz y en apego a la normatividad de la Dirección General de Sanidad Vegetal EN LA FASE DEL SANEAMIENTO DEL GERMOPLASMA Se realizó a través de la Termoterapia y el microinjerto Termoterapia se realizó en una cámara bioclimática donde se sometieron varetas de las variedades a temperatura de 35 ºC y 16 horas de iluminación durante 21 días. El Microinjerto fue sembrar y desarrollar patrón vogoroso pudieron ser Troyer, Carrizo, C-35, en tubo de ensaye y después microinjertar yemas de 0.2 mm de tamaño con dos primordios en el patrón sembrado y al reinjerto de la plántula ya microinjertada se injerto en limón volkameriano.

3 EN CUANTO A LA VERIFICACIÓN FITOSANITARIA Se realizaron pruebas biológicas se conoce como indexado mediante plantas indicadoras, la planta indicadora estamos utilizando para VTC el limón mexicano, para el virus de la psorosis naranjo pineapple, para el virus de la Exocortis el... para el virus de la Caquexia limón rugoso sobre mandarino parson special. De manera complementaria las pruebas del laboratorio Para VTC Elisa y para Psorosis, Exocortis y Caquexia la técnica de PCR LA TERCERA PARTE DEL PROYECTO Establecimiento del banco de germoplasma protegido a campo abierto y lote de fundación Actualmente se encuentra con la infraestructura para conservar a futuro 200 plantas de cítricos y para establecer una réplica de los materiales a campo abierto Y EN LA FASE DE CERTIFICACIÓN DEL BANCO DE GERMOPLASMA Y LOTE DE FUNDACIÓN Es la ultima etapa Una vez establecido el lote de germoplasma protegido a campo abierto y lote de fundación se solicitará a la Dirección General de Sanidad Vegetal la certificación de estas unidades de producción en apego a la NOM-079-FITO Bueno este es el esquema de certificación que estamos desarrollando fue una adecuación al propuesto por el Instituto de investigaciones de Frutales tropicales de la Habana Cuba en el año En esta parte es donde hacemos el rescate e introducción de germoplasma cabe señalar como lo hemos venido diciendo todo esto es en apego a la NOM-079-FITO Estos materiales rescatados e introducidos se sanearon por las técnicas ya señaladas de termoterapia y microinjerto pasan a un área de adaptación y posteriormente se hacen las pruebas de diagnósticos ya señaladas de indexado y pruebas de laboratorio. Cuando se confirma la sanidad de los materiales ingresan dos plantas de cada variedad a una primer área protegida producida por el banco de germoplasma protegido, si el material resultara positivo a algunas de las enfermedades señaladas se tendrá que iniciar otra vez el proceso de saneamiento a través de la termoterapia y microinjerto a seguir los pasos hasta lograr la sanidad. Simultáneamente ya que se tienen los materiales en el banco de germoplasma al menos 4 plantas de cada variedad deben estar a campo abierto para que esto sea visto por los técnicos, por los productores, por los viveristas y seleccionen sus materiales con base a los comportamientos que tienen en el campo abierto. El banco de germoplasma se obtienen materiales para reproducirlos en lotes de fundación y estoes con base sobre todo a las demandas de los viveristas certificados y aquí se produce la yema la cual posteriormente pasa a un lote de multiplicador de yema que generalmente ya tienen los viveristas certificados y aquí obtienen la yema para injertarlas en los patrones tolerantes que tienen en su vivero. Y los resultados de este trabajo en cuanto a rescate e introducción de variedades Rescate en el periodo se visitaron 56 huertas en los estados de Veracruz y Puebla, en el 2003 se lograron rescatar 14 árboles, en el árboles mas y en el 2005 dos árboles en total 31 árboles que reunieron los requisitos de alto potencial productivo y calidad de fruta.

4 Bueno aquí les muestro algunos de los resultados que tenemos cabe señalar que toda esta información la generamos personalmente contamos la fruta, seleccionamos los árboles, cosechamos y pesamos esta fruta con eso obtuvimos la información que aquí tienen. Dentro del grupo de naranjos tenemos variedades... Hamlin... y algunas valencias, la edad de los árboles el numero de frutos vean que los resaltados en color verde son los de mejor comportamiento y la producción por árboles en kilogramos. Y aquí hicimos una estimación si todos los árboles de esa huerta de acuerdo a su densidad de población tuvieran por ejemplo el de... todos los árboles de esa huerta rindieran esta misma cantidad kilogramos andaríamos 80.5 toneladas por hectárea en la huerta, claro nada mas es para medir su potencial de cada una de las variedades. Aquí tenemos el grupo de mandarinos de los cuales logramos rescatar y aquí esta la relación de materiales de edad, el numero de frutos, la producción por árbol y el potencial productivo que calculamos en base a la densidad de población. Dentro de los tangelos dos de ellos viñola y orlando también con la misma información toronjas platina, red much, Río Red dos árboles uno en naranjo agrio y otro en carrizo, naranjo agrio cucho y uno star Ruby con información similar a la que hemos venido presentando y dos árboles de limón persa también. Aquí señalamos las características agronómicas de los árboles y lo que se estudio en ellos diámetro, grosor de tallo, la altura de copa, el diámetro y ancho de copa, el volumen de copa que se calcula a la altura y al diámetro de copa y el índice de producción que también tomamos esa información para hacer el calculo. Y de estos materiales también se determinó la calidad de fruta en los árboles tanto la calidad externa como la interna. Dentro de la calidad externa de los frutos: El peso del fruto, diámetro polar ecuatorial y grosor de la cáscara Y dentro de la Calidad Interna de los Frutos Numero de gajos y semillas, sólidos solubles totales, acidez, índice de madurez SST/Acidez y porcentaje del jugo Referente ala introducción de germoplasma de cítricos del extranjero En abril del 2005, se introdujeron del repositorio Nacional de Cítricos de California de Estados Unidos 29 variedades comerciales, 15 patrones; 7 Materiales para indexado biológico, plantas indicadoras, en total 51 Variedades. Aquí tenemos las variedades que introducimos En naranjos tenemos; Ambersweet; Campbell, Campbell OBL, Cara Cara, Delta, Lane Late, Midknight, Pineapple, Rodhe Red, Salusttana y Trovita Raza Mandarinos y sus híbridos: Ellendale, Encare, Fairchild, Honey, Kinow, Fonkan Satsuma, Clausellina, Satsuma Okitsu-Wase, Satsuma Owart Flost No. 1 Tangelos; Orlando, Nova, Tangores, Ortanique y temple; Toronja: Handerson y lima dulce Marrakech

5 Dentro de los patrones que se introdujeron dentro del grupo de citranges C-35, Carrizo, Flying Dragón, Hamlin por Flying Dragón, Rush No. 1 y Troyer Dentro de los limones macrophyla, Rugoso Schaub y Volkameriana Y dentro de los citrumelos CPB 4475 y California Mandarino Cleopatra Trifoliados; Robidoux US 119 y X 639 Y como plantas indicadoras Indexado biológico Cidro Arizona 861 Tangor Dweet Naranjo dulce: Madam Vinous Naranjo Agrio Sour Standard Mandarinos Parson`s Special y Parson`s Special No. 9 Bueno es esta fase quiero mostrarle como es el proceso de saneamiento, primero cada una de las variedades rescatadas e introducidas se someten a una cámara bioclimática, varetas de esos materiales y ahí permanecen durante tres semanas a 35ºc, con una humedad relativa al 80% y con 16 horas de luz al día, al mismo tiempo se le va quitando la tes a la semilla y se siembra en un medio de cultivo y aquí es donde se desarrolla la planta in vitro. Posteriormente a las tres semanas hay brotación de esas varetas y ahí se toma el ápices caulinar en la parte meristemática se hace un corte tratándose de llevar eso dos primordios y que tenga un tamaño de 0.2 mm esa micro yema. Y haga de cuenta que esta parte es el patrón y este punto amarillo es la parte microinjertada de la variedad, posteriormente se desarrolla la planta y cuando ya tiene este tamaño se reinjerta en limón volkameriana. Bueno como resultados de lo que tenemos de este trabajo de los materiales en proceso de saneamiento los rescatados ya están en desarrollo tres, 28 ya están injertadas en volkameriana, un total de 54 plantas. Y los introducidos, 51 introducidos todos ya están reinjertados en Volkameriana un total de 102 plantas haciendo una totalidad de plantas en el área de producción de 156 que pasaron el proceso de saneamiento. En cuanto al reinjerto estas plantas que se desarrollan en in vitro se quita la hoja y se parte a la raíz y aquí es donde se hace el reinjerto en patrón de volkameriana que tenemos en un área protegida también, no están al ambiente sino que dentro de un área protegido tipo invernadero. Cuando se hace el reinjerto se le pone esta película plástica con el propósito de que no se deshidraten las plántulas reinjertadas.

6 Hay que recordar que vienen de un medio in vitro y que ahí siempre estuvieron con mucha humedad y es con ese propósito. Aquí vemos materiales injertados, aquí vemos que ya pasaron por el proceso de reinjerto y ya plantas en desarrollo de las cuales se empiezan a tomar brotes o parte vegetativas para hacer las pruebas de indexado biológico y serológicas y moleculares. Aquí hacemos un resumen de todo el proceso preparación de plantas en termoterapia promedio de 18 días y el micro injerto desde que se establece 46 días, re injerto 21 días, desarrollo de plantas con la primeras 8 yemas alrededor de 150 días, en total lo que es saneamiento 235 días son lo que requerimos para cada una de las plantas dentro de este proceso. Bueno en cuanto a la verificación del indexado biológico en noviembre del 2007 se sometieron plantas ya a lo que es la prueba biológica en este caso fue para VTC y Exocortis aquí está los materiales, el origen de donde venía esa planta y el numero de plantas de acuerdo a lo que tenemos en el área de producción de cada uno de los materiales. Son estos mismos materiales pero para Psorosis y Caquexia y esto se realizó el indexado en mayo del 2008 las mismas variedades, su origen y el numero de plantas. En mayo se realizaron esta misma actividad de indexado para estas misma variedades Exocortis, psorosris y Caquexia, el numero de materiales, su origen y el numero de plantas a la que tenemos en el área de producción. En junio introducimos nuevos materiales a indexado biológico para VTC, Psorosis y Exocortis y Caquexia tenemos la relación de esos materiales, su origen y el numero de plantas a la que corresponde. Bueno aquí nada mas para señalarles como se hace esta actividad se toman las muestras del área de adaptación se cortan brotes de esos materiales estas son las plantas indicadoras y aquí se ve que se está poniendo un parche producto de estos brotes de cada una de las variedades. Aquí se pone 4 plantas por cada una de las que se quiere probar por un positivo y un negativo para saber si logramos hacer el saneamiento de cada uno de los materiales. Aquí tenemos algunos indexados para VTC y para Psorosis aquí es importante la temperatura de 20 a 28 grados centígrados para que se puedan manifestar los síntomas en algunas de las plantas que estuvieran positivas a VTC o a Psorosis o cuando menos en el testigo positivo. Indexado para Exocortis lo mismo pero vean que aquí cambia la temperatura, tienen temperatura mas alta entre 28 y 33 ºC. Mediante la verificación fitosanitaria mediante pruebas de laboratorio aquí tenemos algunos de los materiales que se comprobaron que están libres de VTC, Psorosis, Exocortis y Caquexia es lo que nos indica la norma, todas estas son negativas de acuerdo a las pruebas de laboratorio, Elisa para VTC y PCR para Psoprosis, Exocortis y Caquexia. Aquí tenemos otra relación de materiales también pasaron por ese mismo proceso de pruebas de laboratorio y nada mas señalar que hay pendientes la caluselina y,,,, en cuanto a VTC.

7 Y aquí también tenemos otros materiales con ese mismo propósito, que ya están sanos contra estas 4 enfermedades, aquí esta la relación de materiales; Toronjas Río Red Gutiérrez Zamora, tangelos Orlando, Tangores Ortanique, blendale y temple; Citrumelo X-639. Las actividades pendientes por desarrollar de este proyecto es el establecimiento de un Banco de germoplasma protegido a campo abierto y lote de fundación Y también lo que es la Certificación del banco de germoplasma y lote de fundación Certificación del Banco de germoplasma y lote de fundación en base a la NOM-079-FITO-2002, de la Dirección General de Sanidad Vegetal Y también Multiplicación de variedades comerciales en el lote de fundación y distribuir material vegetativo certificado a viveristas y productores. Como conclusiones de este trabajo se logro rescatarse germoplasma de los estados de Veracruz y Puebla e introducir del Repositorio Nacional de Cítricos de California Estados Unidos Se sometieron a saneamiento el 100% de los 32 cultivares de cítricos programados para conformar el banco de germoplasma Mediante la prueba serológica de ELISA logró verificarse la sanidad contra el VTC en el 24% de los materiales rescatados e introducidos. A través de la técnica de PCR se ha determinado la sanidad en el 28% contra psorosis y en 29% contra Exocortis y caquexia. El 32% de los materiales se encuentran sometidos a las pruebas biológicas mediante plantas e indicadoras Actualmente no se cuenta con variedades en el banco de germoplasma protegido a campo abierto del lote de fundación. En el futuro nos pueden proveer de materiales a otros lotes donadores o a nuestro lote de fundación del mismo INIFAP CONTESTACIÓN Esa es la idea tener el banco de germoplasma no tan solo para el mismo instituto sino para todos los viveros certificados del país, claro primero atendiendo las necesidades del Estado pero creo que hay material suficiente para otros viveros certificados o a nivel de lote de fundación. La mandarina chata esa es una mandarina regional se cultiva mucho en la región de Alamo, es bastante productiva, tiene ciertos problemas con el transporte por eso se ha dejado de cultivar en cierta forma, nosotros la estamos colectando como parte de los materiales porque uno de los propósitos es a futuro trabajar con el mejoramiento de variedades y tratar de sacarle las variedades que tienen para aplicarlas con otras variedades obtenidas de esas como un progenitor. Yo los felicito porque es una mandarina que ya se estaba perdiendo en la región y que bueno que la rescaten porque es muy sabrosa, también nosotros tenemos algunos materiales ahí de naranjas e intermedias que les pueden servir y están a su disposición como al Quin tenemos la quin que no se le ha dado la relevancia que realmente tiene como una naranja intermedia que sale cuando ya se acabo la

8 temprana mas y todavía no está madura la Person Brown puede llenar un hueco muy bueno en la citricultura mexicana la hemos estado observando allá nosotros durante varios años y tiene un aumento de un hueco que ninguna variedad lo llena, el día que quieran ustedes varetas tenemos a su disposición allá arbolitos. Muchas gracias por el ofrecimiento y se tomará muy en cuenta gracias Están representadas las variedades que utilizan los productores si algo mas en el estudio y en segundo que otro centro de investigación o que otra institución de investigación publica o privada está realizando este trabajo CONTESTACIÓN Si efectivamente esos materiales lo logramos rescatar con los mismos productores son adaptados al clima y al tipo de suelo de esta región tratamos de encontrar todos los que se manejan en Veracruz y parte de Puebla y pues son precisamente lo que hemos dedicado y se aprovecho también para introducir otros materiales por supuesto llenar ciertos huecos que están pendientes algunos materiales como los que tiene el Ingeniero Esquitin precisamente esa quin pues viene a cubrir un hueco que no se tiene en las huertas o sea producción de fruta en ese tiempo o intermedia y bueno ese es el propósito meter tanto tempranas, intermedias, tardías para solucionar la problemática de los productores en cuanto a diversidad Y referente a que instituciones están trabajando también la empresa PROCIGO es la única que tiene en el país todas las unidades de producción, vivero, banco de germoplasma, lote de fundación lote multiplicadores de yemas, huertas productoras de semillas es una empresa privada pero como ayer lo señalaba el Doctor Marcelo Zanetti que esto debe estar manejado por una institución gubernamental o por la misma Dirección General de Sanidad Vegetal aquella es una empresa privada en cualquier momento pueden deshacerse de esos materiales y se correría el riesgo de quedar desamparados por carencia de variedades certificadas. De acuerdo a todas las variedades que tiene la gente las prefiere, el doctor las prefiere de acuerdo a la demanda del mercado cuales son las que mejor demandadas están o con cuales podemos trabajar para que nos reditúe un poco mas y algunas no son tan demandadas. Pues actualmente están demandando las que ellos actualmente conocen uno de los propósitos de este trabajo son poner a campo abierto una diversidad de materiales para que las vayan conociendo y de ahí vayan ampliando sus conocimiento en cuanto a diversidad de materiales pero actualmente si hablamos de mandarinos preguntan mucho por la fremon, la marsall también está siendo muy solicitada. En cuanto a naranja le están tirando a las tempranas o a las mas tardías que ya hay en la región citrícola de Veracruz, en cuanto a toronja pues la de color rojo, sobre todo la doble roja la que mas les llamo la atención, pues en naranjas últimamente la cara cara que es una de ombligo con pulpa roja, también está llamando la atención y así hay varias diversidad de materiales que están siendo solicitados, tratamos también de cubrirlos a través de este trabajo y otros ya los tiene también la empresa procigo a nivel de certificado. Mi pregunta es sobre la naranja gafa ya vez que tiene un color de pulpa pues amarillo y por lo que el consumidor a veces las prefiere al color del jugo rojo, podría haber un tipo de hibridación que la cambiara a ese color o están en este trabajo ya.

9 CONTESTACIÓN La gafa es un material temprano que hay aquí en la región y tu lo que señala es tratar de mejorar la calidad del color, a través de mejoramiento genético si es posible, nada mas que no lo hemos hecho en la actualidad, pero si hay posibilidad, actualmente los avances en genética en cuanto a cítricos sobre todo Brasil va muy avanzado en eso.