La sangre y la salud. Principios básicos. Funciones de las células de la sangre. Frotis de sangre periférica normal
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- Héctor Domínguez Montes
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1 Frotis de sangre periférica normal La sangre y la salud Dr. Jose Mª Moraleda Departamento de Medicina 20, Marzo 2012 Principios básicos Funciones de las células de la sangre Hematíes Leucocitos Plaquetas Trasporte de Oxígeno Defensa contra Infecciones Evitar Hemorragias
2 Hematopoyesis Hematopoyesis. Lugares Producción y desarrollo de las células sanguíneas Objetivo: mantener un número estable de células a lo largo de toda la vida (homeostasis) Lugar: médula ósea espacios intertrabeculares de huesos axiales epífisis de huesos largos. Cambia a lo largo del desarrollo embrionario Bm.jpg Hematopoyesis fetal y del adulto Esquema de la Hematopoyesis FETO ADULTO Granulocitos neutrófilos Saco Yolk Esqueleto Axial C. Stem Pluripotente C. Stem Mieloide Monocitos - macrófagos Eosinófilos Higado y Bazo Celula Stem Pluripotente GLOBULOS ROJOS Huesos Largos C. Stem Pluripotente C. Stem Linfoide PLAQUETAS Meses Años Sistema inmune: Linfocitos B y T
3 Hematopoyesis: Elementos Fundamentales 1. Células stem (células madre, tronco, germinales) 1. Células Stem Progenitores H. células maduras. 2. Micromedioambiente hematopoyético: Nicho + Células del estroma: Producen matriz extracelular y citocinas a) Matriz extracelular: Laminina, fibronectina, colágeno a) Laminina, fibronectina, colágeno (oporte físico de las células stem). b) Moléculas de adhesión (selectinas, integrinas) b) Citocinas: producidas por c. del estroma, linfocitos y monocitos a) Factores de crecimiento: EPO, G-CSF, Trombopoyetina b) Interleucinas: IL-1,, IL-6, etc. CFU-Meg SCF GM-CSF TPO EPO IL-6 IL-11 SCF C. Madre SCF FL Pluripotente FL C. Madre Mieloide G-CSF IL-7 TPO C. Madre Linfoide IL-6 IL-11 FL G-CSF TPO IL-11 SCF IL-6 Pro-B TPO FL BFU-E CFU-E SCF IL-9 GM-CSF Epo CFU-G CFU-GM G-CSF IL-6 GM-CSF Plaquet. G. Rojos Neutrófilos CFU-M Hematopoyesis M-CSF CFU-Eo IL-5 CFU-Ba CFU-Mast SCF IL-4 Pre-B Célula B SCF IL-17 IL-1 IL-2 IL-4 IL-5 IL-6 IL-9 IL-12 Pro-T Pre-T Monocitos Eosinóf. Basófilos Mastocitos C. Plasmáticas Células T IL-2 IL-6 IL-7 IL-8 IL-9 IL-12 Eritropoyesis Proceso fisiológico de maduración de la serie roja en la M.O. Representa 30 a 35% de la hematopoyésis. Eritropoyesis. Fisiopatología - Factor de crecimiento que se produce en las células peritubulares del riñon - Necesaria para la proliferación y maduración eritroide Tiempo de maduración de proeritoblasto a reticulocito: 5-7 días. La Eritropoyetina es fundamental para la maduración - En la patología renal se produce anemia como consecuencia de la falta de EPO - El exceso de EPO produce poliglobulia
4 Eritrocito = Hematíe = Globulo rojo Anemia. Signos clínicos Célula anucleada. Forma de disco biconcavo. Diámetro: 7,5-8 µm Espesor: 2 µm. Volúmen: 80 a 100 fl Alta flexibilidad y deformabilidad Estructura: Proteinas, lípidos, enzimas intracitoplasmáticas. Alto contenido de Hb, proteina especializada en el intercambio de gases (02 C02) Palidez de piel y mucosas Coiloniquia Queilitis, glositis, rágades Maduración mieloide CINÉTICA Y DISTRIBUCIÓN GRANULOCITOS Mieloblasto Promielocito Mielocito Metamielocito Cayado Segmentado Pool medular mitótico: Mieloblastos (1 mitosis) Promielocitos (1-2 mitosis) 6 días Mielocitos (2 mitosis) Pool medular postmitótico o madurativo: Metamielocitos Cayados Segmentados Pool periférico marginal Pool periférico circulante 6 días adicionales de permanencia en médula ósea MADURACION
5 Trastornos de los leucocitos Infecciones Trastornos de los leucocitos Leucemias Trombopoyesis. Citocinas Trombopoyesis. Diferentes estadios Promegacariocito Megacariocito basófilo Megacariocito granular y liberador de plaquetas. N Engl J Med 1998; 339:
6 Trastornos de la Hemostasia Linfopoyesis Gingivorragias Hematomas Purpura petequial Equímosis Hemorragia retiniana Hemartrosis Trastornos de los linfocitos Linfomas El estudio de la sangre en el laboratorio
7 Extracción de sangre periférica Estudio de la sangre periférica Hemograma e índices hematimétricos Frotis sanguíneo Reticulocitos Hemograma. Contador automático Hemograma automatizado
8 Serie roja. Indices hematimétricos Anemia microcítica Número de glóbulos rojos: 5.5 ±1, 4.8 ± 1 x10 12 /l Hematócrito (Hct): 0.47 ±0.07, 0.42 ± l/l (%) Hemoglobina (Hb): 15±2.5, 14 ±2.5 - g/dl Volumen Corpuscular medio (VCM) Volumen medio de los GR: Hcto/GR: fl Hemoglobina Corpuscular media (HCM) Hb media en GR: Hb/GR: pg/l Concentración HB corpuscular media (CHCM) Síntesis de Hb dentro del GR: Hb/Hcto: g/dl Anchura distribución de GR (ADE) Indice de variación del tamaño: 13 Serie blanca. Leucocitos Hemograma. Valores normales de leucocitos Leucocitos: / µl = 4,5-11,5 x 10 9 / L Fórmula leucocitaria: Proporción de cada subtipo al contar 100 leucocitos en la sangre periférica Nº absoluto: % celulas x total leucocitos (es más importante que la fórmula) Rango de referencia basados en poblacion normal de edad, sexo y etnia similar % Nº Absoluto µl Rango µl Leucocitos Neutrofilos Linfocitos Monocitos Eosinofilos Basofilos
9 Frotis de sangre periférica A. Hematíes; B. Linfocito grande granular; C. Leucocito Neutrófilo; D. Eosinófilo; E. Segmentado; F. Monocito; G. Plaquetas; H. Linfocito; I. Cayado; J. Basofilo Anemia microcitica hipocrómica (deficiencia de Fe) Esferocitosis Hereditaria /AHAI
10 Drepanocitosis Otras pruebas de sangre para el estudio de las anemias Metabolismo del Hierro Sideremia y Capacidad total de fijación del Hierro Electroforesis de Hemoglobinas Gel de agarosa Capacidad Total = Transferrina No Saturada + Sideremia Fijación de Hierro Hb A Hb F Hb S Hb C HbA HbA HbA HbC HbA HbF HbA HbA HbS HbF HbS HbS HbS HbS HbC HbC
11 Test de Coombs directo Anemia Hemolítica Autoinmune Estudio de la médula ósea GR PACIENTE SUERO DE COOMBS PRUEBA POSITIVA (cubiertos con Ig) (anti-ig humana) (aglutinación) Evaluación de la MO Aspirado y biopsia de Médula ósea Morfología convencional Forma y estructura elemental de la célula Citoquímica: Basada en la identificación de componentes celulares en el citoplasma o el núcleo mediante reacciones químicas específicas. Inmunofenotipo Se basa en la identificación mediante anticuerpos monoclonales de moléculas en la membrana o el citoplasma celular Citogenética Estudio de los cromosomas Estudios de biología molecular Identificación de anomalías en los genes y/o las proteínas
12 Biopsia de médula ósea Otras pruebas utilizadas en Hematología La BMO permite estudiar arquitectura medular y el micromedioambiente Imágenes de Radiografía simple Imágenes de PET Rx de tórax de un paciente con Linfoma de Hodgkin Imágenes líticas en un Mieloma múltiple
13 Características de las Células Madre Hematopoyéticas Técnicas de Aféresis celular 1. Auto-replicación 2. Diferenciación en las tres líneas hematopoyéticas 3. Capacidad de reconstituir la hematopoyesis e inmunidad a largo plazo Antígenos de membrana de la célula Stem Fuentes de células stem. Médula ósea CD177 CD133 VLA Célula Stem CD34 CXCR4 Moléculas de superficie que pueden servirnos para identificar la célula stem y seleccionarla. Ac monoclonales: Anti CD34 Anti CD117 Anti CD133
14 kitl kit Fuentes de Células Stem. Sangre periférica Fuentes de Células Stem. Cordón Umbilical Flt3-L VLA-4 S t e m IL-8 G-CSF SDF-1 Matriz extracelular Máquinas de aféresis Nuevos Tratamientos Células mononucleadas Plaquetas Granulocitos Plasmaféresis
15 Trasplante de Medula ósea Terapia dirigida o Terapia de dianas PH: Medula ósea, SP, CU CD19 slg CD20 Paciente Donante INFUSION Inmunosupresion Quimioterapia Radioterapia Metotrexate Ciclosporina APLASIA DR Linfocito B CD22 Proteínas de superficie posibles dianas para IT: Anticuerpos monoclonales (Ac) desnudos Ac conjugados radioisótopos drogas toxinas ACONDICIONAMIENTO INJERTO Press O, et al. Cancer J Sci Am. 1998:4(suppl 2):s19 s26. El futuro: Terapia celular. Medicina Regenerativa
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