Ensayo rápido cuantitativo microfluidico para la detección de Cardiac Panel 3. Uso Exclusivo para la Atencion Medica Profesional
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- Teresa del Río Salas
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1 Ensayo rápido cuantitativo microfluidico para la detección de Cardiac Panel 3 Uso Exclusivo para la Atencion Medica Profesional INTRODUCCIÓN El Panel Cardíaco mlabs es un inmunoensayo de fluorescencia para ser utilizado con los Immunometers mlabs para la determinación rápida cuantitativa de creatina quinasa MB (CK-MB), troponina I (TnI), y la mioglobina en la sangre total. El Panel Cardíaco mlabs es para ser utilizado como una ayuda en el diagnóstico de infarto de miocardio (lesión), como una ayuda en el diagnóstico y evaluación de la gravedad de la insuficiencia cardíaca congestiva (también conocida como insuficiencia cardíaca), como una ayuda en la clasificación de riesgo de los pacientes con insuficiencia cardiaca, y como una ayuda en el ranking de riesgo de pacientes con síndromes coronarios agudos. Marcadores de proteínas en la sangre son importantes para el diagnóstico diferencial de infarto agudo de miocardio (IAM). Los marcadores utilizados en el diagnóstico de IAM incluyen: la mioglobina, troponina I, la creatina quinasa (CK), y la isoenzima MB de la creatina quinasa (CK-MB). El diagnóstico de AMI en un paciente que se presentó con dolor en el pecho es difícil en muchos casos. La Organización Mundial de la Salud (OMS) desarrolló tres criterios principales para diferenciar el dolor torácico de razones no cardíacas y dolor en el pecho en pacientes con IAM. Estos criterios son los siguientes: 1) El examen físico junto con la historia del paciente, 2) los datos electrocardiográficos, y 3) los cambios en los biomarcadores de proteínas en sangre asociados con el IAM. Concentraciones de mioglobina de sangre pueden ser elevados como resultado de condiciones que producen daño en el músculo, tales como trauma, ejercicio, cirugía, isquemia, y varias enfermedades musculares degenerativas. Los niveles sanguíneos de CK-MB se pueden elevar como resultado de daño muscular crónica o aguda incluyendo trauma y el ejercicio extenuante. Troponina I cardiaca se eleva sobre todo como resultado del IAM, pero también puede ser elevado, como resultado de una lesión cardiaca leve, como angina inestable, insuficiencia cardíaca congestiva (ICC), el trasplante cardíaco, y varias condiciones que pueden dañar el miocardio. El Panel Cardíaco mlabs ofrece una medición específica, mínimamente invasivo para evaluar a los pacientes para CHF y para evaluar el riesgo en pacientes con síndrome coronario agudo (SCA). PRINCIPIO DE LA PRUEBA El principio del ensayo combina un método de inmunoensayo sándwich de dos etapas con una detección fluorescente final. La prueba Panel Cardíaco mlabs se basa en la tecnología de inmunoensayo fluorescente en un cartucho de microfluidos. La tecnología de inmunoensayo se basa en la capacidad inherente de unirse a la estructura específica de una molécula. En el cartucho de microfluidos Panel Cardíaco mlabs, tres pares de anticuerpos se eligen cuidadosamente de modo que tiene una excelente especificidad y sensibilidad para la troponina I, mioglobina y CK-MB. El anticuerpo indicador para cada analito tiene un colorante fluorescente unido y pre-recubierto en una zona de reacción separada del cartucho, mientras que el anticuerpo de captura específico para el analito se inmoviliza en la zona de detección. A medida que la muestra fluye a través de los analitos en el primer encuentro de la muestra y se unen al anticuerpo
2 indicador. A medida que la muestra continúa su flujo a través de la zona de detección, el anticuerpo de captura atrapa el complejo analito-indicador mediante la formación de una estructura de emparedado y se mantiene en la zona de detección, mientras que el anticuerpo informador sin analito se elimina por lavado. La señal fluorescente de la zona de detección es proporcional a la concentración de analito en la muestra. MATERIALES SUMINISTRADOS 25 cartuchos de prueba 30 puntas de pipeta 1 mlabs Drive de datos (USB-disco o tarjeta SIM) Instrucciones de uso MUESTRAS Y ALMACENAMIENTO Siempre use guantes de protección y batas de laboratorio adecuados al manipular muestras de los pacientes, ya que pueden ser potencialmente infeccioso. Todas las muestras deben ser considerados como potencialmente peligrosa y/o contaminada. Recoger muestras de sangre venosa utilizando tubos de recogida de K2 EDTA. Asegúrese de que el tubo de recogida se llene completamente para mantener la correcta relación anticoagulante sangre. Mezcle bien la muestra de sangre a través de una inversión suave del tubo (> 8 veces). Realizar la prueba de sangre dentro de los 60 minutos después de la toma de muestras. Refrigere las muestras de sangre total después de la recogida de muestras. No utilizar jeringas para recoger muestras de ensayo. ESTABILIDAD DE LA MUESTRA Las muestras de sangre son estables a temperatura ambiente durante un máximo de 6 horas. ALMACENAMIENTO DEL EQUIPO DE PRUEBA Refrigerar el kit de prueba de Panel Cardiaco 3 a 2-8 C inmediatamente después de recibirla. Sólo retire el número de pruebas requeridas de refrigeración. El kit de prueba de Panel Cardiaco 3 es estable a 2-8 C hasta su fecha de caducidad. PROCEDIMIENTO DE PRUEBA 1. Preparación de muestras El cartucho de mlabs Panel Cardiaco 3 es sólo para ser utilizado junto con mlabs Immunometer. Equilibrar el cartucho de prueba a temperatura ambiente (~ minutos) antes de su uso. Mezclar bien la muestra de sangre total recogida mediante inversión suave del tubo (~ 2-3 veces) antes de la prueba.
3 2. Preparación mlabs ImmunoMeter Una sola mlabs unidad de datos (USB-disco o tarjeta SIM) se proporciona junto con cada kit de cartuchos. Ya sea un disco USB (U-disco) o una tarjeta de SIM puede ser utilizado. Para U-disco, por favor, insertarlo en el puerto USB en la parte trasera de la ImmunoMeter antes de realizar la prueba. Para la tarjeta SIM, retire la tarjeta SIM del soporte e insertarla en el lector SIM mientras el lector SIM está conectado al medidor. En la pantalla principal de la ImmunoMeter, como para el U-disco, pulse "unidades de datos"> "UDISK"; En cuanto a la tarjeta SIM, pulse "unidades de datos>" SIM ". Una vez que los datos se han cargado en el ImmunoMeter, la unidad de datos se puede quitar para todas las mediciones posteriores relacionados. Guarde la unidad de datos en un lugar limpio y seco para su uso futuro. 3. Adición de la Muestra Retirar el cartucho de prueba de la bolsa y etiquete con la identificación del paciente en el frente con un marcador permanente. Mediante la pipeta proporcionada, transferir 250 µl de la muestra en la entrada del cartucho, gota a gota. No coloque la punta de la pipeta en la entrada durante la transferencia de la muestra ya que burbujas de aire pueden ser generados. Para el modo en el interior, permita por lo menos 2 (no más de 15 minutos) para la muestra de interactuar con los reactivos en el cartucho antes de la lectura. Para el modo fuera, conceder al menos 8 (no más de 15 minutos) para la muestra de interactuar con los reactivos en el cartucho antes de leer. 4. Desarrollo de la prueba y lectura de los resultados Inserte el cartucho de prueba en el soporte del cartucho del mlabs ImmunoMeter. Pulse "prueba del paciente" de la pantalla principal del ImmunoMeter. Seleccione el tipo de ensayo y la muestra. Pulse el botón "Inicio" para iniciar la prueba. Los resultados se mostrarán en la pantalla después de que la prueba se ha completado. CARACTERÍSTICAS DE DESARROLLO 1. Sensibilidad analítica Troponin I = 0.02 ng/ml CK-MB = 1 ng/ml Mioglobina = 5 ng/ml 2. Rango de medición Troponin I = 0.02 a 50 ng/ml CK-MB = 1 a 80 ng/ml Mioglobina = 5 a 500 ng/ml 3. Corte -off Troponin I = 0.5 ng/ml CK-MB = 5 ng/ml Mioglobina = 100 ng/ml
4 INTERFERENCIA DE LA PRUEBA La hemoglobina (hasta 1000 mg/dl), lípidos (colesterol hasta 1000 mg/dl y los triglicéridos a 1000 mg/dl) o bilirrubina (hasta 20 mg/dl) que se añade a las muestras de plasma anticoaguladas que contienen los tres analitos no interfirió con la recuperación de los analitos. Estas sustancias también no generaron una respuesta positiva en la ausencia de Panel Cardíaco 3. Se observa que las muestras severamente hemolizadas deben ser evitados. El hematocrito entre 30 % y 55 % no tiene ningún efecto significativo en la recuperación de Panel Cardíaco 3. No se observó alta dosis efecto de gancho con el Panel Cardíaca 3 mlabs hasta las siguientes concentraciones: CK - MB: ng/ml La troponina I: ng/ml La mioglobina: ng/ml VALORES ESPERADOS En un estudio llevado a cabo con muestras de individuos aparentemente sanos, los valores del percentil 95 o estaban por debajo de 4.3 ng/ml para CK - MB, 0.1 ng/ml para la troponina I, 107 ng/ml para la mioglobina. Se recomienda que cada laboratorio debe establecer su propio rango de referencia. LIMITACIONES Inspeccione cuidadosamente la integridad de la bolsa de prueba Panel Cardíaco 3 mlabs antes de su uso. Si se determina que la bolsa fue manipulada, es decir, desgarrada o pinchado, no proceda a utilizar el cartucho de prueba. Póngase en contacto con el soporte técnico local inmediatamente. El kit de prueba Panel Cardíaco 3 mlabs es estrictamente para uso in vitro solamente. Las instrucciones y los procedimientos previstos en este inserto deben ser atendidas con atención. El kit de ensayo Panel Cardíaco 3 mlabs no está destinado a ser utilizado como prueba absoluta de infarto agudo de miocardio o insuficiencia cardíaca congestiva. Los resultados de las pruebas obtenidos son únicamente de referencia para el médico. Todos los elementos proporcionados en el kit de prueba son para aplicación de uso único y deben desecharse adecuadamente después de su uso. REFERENCIAS AHA médico / científico declaración, ACC / AHA para el manejo inicial de los pacientes con infarto agudo de miocardio. Circulation : Puleo, P.R.et col. El diagnóstico precoz del infarto de miocardio para subformularios de creatina quinasa-mb. Circulación : Lee, T.H. et al. ensayos de enzimas en suero en el diagnóstico de infarto agudo de miocardio: Recomendaciones basadas en el análisis cuantitativo. Annals of Internal Medicine : Apple, F.S. uso diagnóstico de la CK-MM y CK-MB isoformas para detectar el infarto de miocardio. Hospital Practice : Wliierson, J. T., el diagnóstico clínico de infarto agudo de miocardio. Hospital Practice : Adams, J. E. et al. El diagnóstico de infarto de miocardio preoperatorio con la medición de troponina I cardíaca The New England Journal of Medicine : Davis, C.P. et al. Los niveles de mioglobina en serie para los pacientes con posible infarto de miocardio. Medicina de Emergencia académico :
5 Gibler, W. B. et al. Myogolbin como un indicador de infarto agudo de miocardio. Annals of Emergency Medicine : Símbolos Diagnostico In vitro Explicación Nombre y dirección del fabricante Representante Autorizado Europeo Marca CE Limitación de Temperatura Número de Lote Fecha de Expiración No reusar Numero de Catalogo Contenido suficiente para n pruebas Precaución leer cuidadosamente.
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