Ensayo rápido cuantitativo microfluidico para la detección de PCT. Uso Exclusivo para la Atencion Medica Profesional

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1 Ensayo rápido cuantitativo microfluidico para la detección de PCT Uso Exclusivo para la Atencion Medica Profesional INTRODUCCIÓN La presencia de la procalcitonina (PCT) se incrementa durante la infección bacteriana sistémica y sepsis. El biomarcador PCT ahora está siendo reconocida como una herramienta útil para el proceso de diagnóstico de la infección bacteriana y sepsis. Se ha demostrado que la PCT puede contribuir a la optimización de la terapia con antibióticos y controlar la duración del tratamiento. PCT es la prohormona de la calcitonina. Considerando que la calcitonina se produce solamente en las células C de la glándula tiroides como resultado de estímulo hormonal, PCT es secretada por diferentes tipos de células de los numerosos órganos en respuesta a la estimulación proinflamatoria, en particular la estimulación bacteriana. Dependiendo de los antecedentes clínicos, una concentración de PCT por encima de 0,1 ng/ml puede indicar una infección bacteriana clínicamente relevante, lo que requiere tratamiento con antibióticos. A una concentración de PCT> 0,5 ng/ml, un paciente debe ser considerado en riesgo de desarrollar sepsis grave o choque séptico. La sepsis es una reacción excesiva del sistema inmunológico y el sistema de coagulación a una infección. Un problema importante para los médicos es el diagnóstico y seguimiento de los pacientes infectados. En pacientes con una infección bacteriana, se ha demostrado que la PCT niveles aumentan. Para el diagnóstico, PCT es un marcador importante que permite la diferenciación específica entre otras causas de reacciones inflamatorias y una infección bacteriana. Por otra parte, la reabsorción de la infección séptica se acompaña de una disminución de la concentración de PCT que devuelve a la normalidad con una vida media de 24 horas. PRINCIPIO DE LA PRUEBA El principio del ensayo combina un método de inmunoensayo sándwich de dos etapas con una detección fluorescente final. La prueba mlabs PCT se basa en la tecnología de inmunoensayo fluorescente en un cartucho de microfluidos. La tecnología de inmunoensayo se basa en la capacidad inherente de unirse a la estructura específica de una molécula. En el cartucho de microfluidos mlabs PCT, un par de anticuerpos se elige cuidadosamente de manera que tenga excelente especificidad y sensibilidad para el PCT. El anticuerpo informador con un colorante fluorescente unido es pre-recubierto en la zona de reacción del cartucho, mientras que el anticuerpo de captura se inmoviliza en la zona de detección. A medida que la muestra fluye a través, el analito PCT en los primeros encuentros de la muestra y se une al anticuerpo indicador. A medida que la muestra continúa su flujo a través de la zona de detección, el anticuerpo de captura se une al complejo PCT-reportero mediante la formación de una estructura de emparedado y se mantiene en la zona de detección, mientras que el anticuerpo informador sin PCT se elimina por lavado. La señal fluorescente de la zona de detección es proporcional a la concentración de PCT en la muestra. MATERIALES SUMINISTRADOS 25 cartuchos de prueba 30 puntas de pipeta

2 1 mlabs Drive de datos (USB-disco o tarjeta SIM) Instrucciones de uso MUESTRAS Y ALMACENAMIENTO Siempre use guantes de protección y batas de laboratorio adecuados al manipular muestras de los pacientes, ya que pueden ser potencialmente infeccioso. Todas las muestras deben ser considerados como potencialmente peligrosa y/o contaminada. Recoger muestras de sangre venosa utilizando tubos de recogida de Heparina de Litio. Asegúrese de que el tubo de recogida se llene completamente para mantener la correcta relación anticoagulante sangre. Mezcle bien la muestra de sangre a través de una inversión suave del tubo (> 8 veces). Realizar la prueba de sangre dentro de los 60 minutos después de la toma de muestras. Refrigere las muestras de sangre total si la prueba no se puede realizar dentro de los 60 minutos después de la recogida de muestras. No utilizar jeringas para recoger muestras de ensayo. ESTABILIDAD DE LA MUESTRA Las muestras de sangre son estables a temperatura ambiente durante un máximo de 6 horas. ALMACENAMIENTO DEL EQUIPO DE PRUEBA Refrigerar el kit de prueba de PCT a 2-8 C inmediatamente después de recibirla. Sólo retire el número de pruebas requeridas de refrigeración. El kit de prueba de PCT es estable a 2-8 C hasta su fecha de caducidad. PROCEDIMIENTO DE PRUEBA 1. Preparación de muestras El cartucho de mlabs PCT es sólo para ser utilizado junto con mlabs Immunometer. Equilibrar el cartucho de prueba a temperatura ambiente (~ minutos) antes de su uso. Mezclar bien la muestra de sangre total recogida mediante inversión suave del tubo (~ 2-3 veces) antes de la prueba. 2. Preparación mlabs ImmunoMeter Una sola mlabs unidad de datos (USB-disco o tarjeta SIM) se proporciona junto con cada kit de cartuchos. Ya sea un disco USB (U-disco) o una tarjeta de SIM puede ser utilizado. Para U-disco, por favor, insertarlo en el puerto USB en la parte trasera de la ImmunoMeter antes de realizar la prueba. Para la tarjeta SIM, retire la tarjeta SIM del soporte e insertarla en el lector SIM mientras el lector SIM está conectado al medidor. En la pantalla principal de la ImmunoMeter, como para el U-disco, pulse "unidades de datos"> "UDISK"; En cuanto a la tarjeta SIM, pulse "unidades de datos>" SIM ".

3 Una vez que los datos se han cargado en el ImmunoMeter, la unidad de datos se puede quitar para todas las mediciones posteriores relacionados. Guarde la unidad de datos en un lugar limpio y seco para su uso futuro. 3. Adición de la Muestra Retirar el cartucho de prueba de la bolsa y etiquete con la identificación del paciente en el frente con un marcador permanente. Mediante la pipeta proporcionada, transferir 250 µl de la muestra en la entrada del cartucho, gota a gota. No coloque la punta de la pipeta en la entrada durante la transferencia de la muestra en forma de burbujas de aire pueden ser generados. Para el modo en el interior, permita por lo menos 2 (no más de 15 minutos) para la muestra debe interactuar con los reactivos en el cartucho antes de la lectura. Para el modo fuera, conceder al menos 8 (no más de 15 minutos) para la muestra de interactuar con los reactivos en el cartucho antes de leer. 4. Desarrollo de la prueba y lectura de los resultados Inserte el cartucho de prueba en el soporte del cartucho del mlabs ImmunoMeter. Pulse "prueba del paciente" de la pantalla principal del ImmunoMeter. Seleccione el tipo de ensayo y la muestra. Pulse el botón "Inicio" para iniciar la prueba. Los resultados se mostrarán en la pantalla después de que la prueba se ha completado. CARACTERÍSTICAS DE DESARROLLO 1. Sensibilidad analítica PCT = 0.02 ng/ml 2. Rango de medición PCT = 0.02 a 100 ng/ml 3. Cut -off PCT = 0.5 ng/ml INTERFERENCIA DE LA PRUEBA Los siguientes factores se han encontrado para no afectar significativamente a los resultados del ensayo: -Hemolisis (Hemoglobina 347 umol/l) -Lipemia (Triglicéridos, lípidos para equivalente 30g/l) -Bilirrubina (574 umol/l) Se observa que las muestras severamente hemolizadas deben ser evitadas. El hematocrito entre 30% y 55% no tiene significativo efecto sobre la recuperación de la PCT. No hay efecto gancho se determinó para PCT concentraciones de ng/ml.

4 VALORES ESPERADOS En un estudio llevado a cabo con muestras de individuos aparentemente sanos, los valores del percentil 95 estaban por debajo de 0.05 ng/ml. Se recomienda que cada laboratorio debe establecer su propio rango de referencia. LIMITACIONES Inspeccione cuidadosamente la integridad de la bolsa de prueba mlabs PCT antes de su uso. Si se determina que la bolsa fue manipulada, es decir, desgarrada o pinchado, no proceda a utilizar el cartucho de prueba. Póngase en contacto con el soporte técnico local inmediatamente. El kit de prueba mlabs PCT es estrictamente para uso in vitro solamente. Las instrucciones y los procedimientos previstos en este inserto deben ser atendidas con atención. El kit de ensayo mlabs PCT no está destinado a ser utilizado como prueba absoluta de la infección bacteriana y sepsis. Los resultados de ensayo obtenidos se deben consultar con el médico, además de con otros resultados de la prueba. Todos los elementos proporcionados en el kit de prueba son para aplicación de uso único y deben desecharse adecuadamente después de su uso como muestras de prueba aplicadas pueden ser potencialmente infeccioso. REFERENCIAS Dandona P. et al. Procalcitonin aumentan después de la inyección de endotoxina en sujetos normales. Revista de Endocrinología Clínica y metabolism (6): Cristo-Crain M. et al. Effect del tratamiento procalcitonina guiada sobre el uso de antibióticos y los resultados en las infecciones del tracto respiratorio inferior: ensayo de intervención simple ciego aleatorizado por grupos. Lanceta (9409): Muller B. et al., Precursores de calcitonina son fiables los marcadores de sepsis en la unidad de cuidados intensivos médicos. medicina de cuidados críticos (4): Harbarth S. et al., Valor diagnóstico de la procalcitonina, la interleucina-6, y la interleucina-8 en pacientes críticamente enfermos ingresados con sospecha de sepsis. medicina de cuidados críticos : American College of Chest Physicians / Society of Critical Care Medicine (1992). Las definiciones de sepsis y fallo de órganos y directrices para el uso de terapias innovadoras en la medicina de cuidados sepsis.critical. 20: Luyt C. E. et al., La cinética de procalcitonina como marcador pronóstico de pheumonia asociada al ventilador, revista Amerian de la medicina de cuidados respiratorios y crítica (1): Brunkhorst F. M. et al. Cinética de la procalcitonina en la sepsis iatrogénica. medicina de cuidados intensivos :

5 Símbolos Diagnostico In vitro Explicación Nombre y dirección del fabricante Representante Autorizado Europeo Marca CE Limitación de Temperatura Número de Lote Fecha de Expiración No reusar Numero de Catalogo Contenido suficiente para n pruebas Precaución leer cuidadosamente.