Ensayo rápido cuantitativo microfluidico para la detección de Dimero - D. Uso Exclusivo para la Atencion Medica Profesional
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- Miguel Ángel Mendoza Espejo
- hace 6 años
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1 Ensayo rápido cuantitativo microfluidico para la detección de Dimero - D Uso Exclusivo para la Atencion Medica Profesional INTRODUCCIÓN Cuando la fibrina en un coágulo sanguíneo se rompe por las enzimas es el llamado fibrinólisis, una serie de productos de degradación de la fibrina se forman (de FDP). Uno de los únicos FDP es de Dímero-D, cuya concentración se proporciona información útil para el diagnóstico de trombosis. Dímero D es de uso clínico significativo en la toma de decisiones de diagnóstico para pacientes con sospecha de trastornos trombóticos, como la trombosis venosa profunda (TVP), embolia pulmonar (EP) o coagulación intravascular diseminada (CID). PRINCIPIO DE LA PRUEBA La prueba Dímero-D mlabs se basa en la tecnología de inmunoensayo en un cartucho microfluico. La tecnología de inmunoensayo se basa en la capacidad inherente de un anticuerpo para unirse a la estructura específica de una molécula. En el cartucho de microfluidos Dímero-D mlabs, dos anticuerpos (reportero y captura) se eligen cuidadosamente para tener una excelente especificidad y sensibilidad para Dímero-D. El anticuerpo indicador con un colorante fluorescente unido se carga en la zona de reacción del cartucho, mientras que el anticuerpo de captura está inmovilizado en la zona de detección. A medida que la muestra fluye a través, del Dímero D en los primeros encuentros de la muestra y se une al anticuerpo indicador. A medida que la muestra continúa su marcha a través de la zona de detección, el anticuerpo de captura atrapa el complejo reportero Dímero-D mediante la formación de una estructura de emparedado y se mantiene en la zona de detección, mientras que el anticuerpo informador sin Dímero-D se elimina por lavado. La señal fluorescente de la zona de detección es proporcional a la concentración de Dímero-D en la muestra. MATERIALES SUMINISTRADOS 25 cartuchos de prueba 30 puntas de pipeta 1 mlabs Drive de datos (USB-disco o tarjeta SIM) Instrucciones de uso MUESTRAS Y ALMACENAMIENTO Siempre use guantes de protección y batas de laboratorio adecuados al manipular muestras de los pacientes, ya que pueden ser potencialmente infeccioso. Todas las muestras deben ser considerados como potencialmente peligrosa y/o contaminada. Recoger muestras de sangre venosa utilizando tubos de recogida Citratado 0.105M (~ 3.2%).
2 Asegúrese de que el tubo de recogida se llene completamente para mantener la correcta relación anticoagulante sangre. Mezcle bien la muestra de sangre a través de una inversión suave del tubo (2-3 veces). Realizar la prueba de sangre dentro de los 60 minutos después de la toma de muestras. Refrigere las muestras de sangre total después de la recogida de muestras, estas no pueden ser procesadas después de 60 minutos después de recogida. No utilizar jeringas para recoger muestras de ensayo. ESTABILIDAD DE LA MUESTRA Las muestras de sangre son estables a temperatura ambiente durante un máximo de 60 minutos. Muestras severamente hemolizadas deben ser evitadas. ALMACENAMIENTO DEL EQUIPO DE PRUEBA El Kit de prueba de Dímero-D es estable a temperatura ambiente hasta la fecha de caducidad indicada. El Kit de prueba de Dímero-D debe almacenarse en un lugar fresco y seco. PROCEDIMIENTO DE PRUEBA 1. Preparación de muestras El cartucho de Dímero-D mlabs es sólo para ser utilizado junto con mlabs Immunometer. Mezclar bien la muestra de sangre total recogida mediante inversión suave del tubo (~ 2-3 veces) antes de la prueba. 2. Preparación mlabs ImmunoMeter Una sola mlabs unidad de datos (USB-disco o tarjeta SIM) se proporciona junto con cada kit de cartuchos. Ya sea un disco USB (U-disco) o una tarjeta de SIM puede ser utilizado. Para U-disco, por favor, insertarlo en el puerto USB en la parte trasera de la ImmunoMeter antes de realizar la prueba. Para la tarjeta SIM, retire la tarjeta SIM del soporte e insertarla en el lector SIM mientras el lector SIM está conectado al medidor. En la pantalla principal de la ImmunoMeter, como para el U-disco, pulse "unidades de datos"> "UDISK"; En cuanto a la tarjeta SIM, pulse "unidades de datos>" SIM ". Una vez que los datos se han cargado en el ImmunoMeter, la unidad de datos se puede quitar para todas las mediciones posteriores relacionados. Guarde la unidad de datos en un lugar limpio y seco para su uso futuro. 3. Adición de la Muestra Retirar el cartucho de prueba de la bolsa y etiquete con la identificación del paciente en el frente con un marcador permanente. Mediante la pipeta proporcionada, transferir 250 µl de la muestra en la entrada del cartucho, gota a gota.
3 No coloque la punta de la pipeta en la entrada durante la transferencia de la muestra ya que puede formar de burbujas de aire. Para el modo en el interior, probar el derecho del cartucho después de la adición de la muestra. Para el modo de fuera, permiten al menos 8 (no más de 15 minutos) para la muestra de interactuar con los reactivos en el cartucho antes de leer. 4. Desarrollo de la prueba y lectura de los resultados Inserte el cartucho de prueba en el soporte del cartucho del mlabs ImmunoMeter. Pulse "prueba del paciente" de la pantalla principal del ImmunoMeter. Seleccione el tipo de ensayo y la muestra. Pulse el botón "Inicio" para iniciar la prueba. Los resultados se mostrarán en la pantalla después de que la prueba se ha completado. CARACTERÍSTICAS DE DESARROLLO 1. Sensibilidad analítica Dimero-D = 50 ng/ml 2. Rango de medición Dimero-D = 50 a ng/ml 3. Corte -off Dimero-D = 500 ng/ml INTERFERENCIA DE LA PRUEBA La hemoglobina (hasta 5 mg/dl), lípidos (trioleína hasta 30 mg/dl) o bilirrubina (hasta 0.15 mg/dl) que se añade a las muestras de plasma Citratado que contienen Dímero-D no interfirió con la recuperación de Dímero-D. Estas sustancias también no generaron una respuesta positiva en la ausencia de Dímero-D. Se observa que las muestras severamente hemolizadas deben ser evitados. El hematocrito entre 30 % y 55 % no tiene ningún efecto significativo en la recuperación de Dímero-D. VALORES ESPERADOS En un estudio llevado a cabo con muestras de individuos aparentemente sanos, los valores del percentil 95 o estaban por debajo de 500 ng/ml. Se recomienda que cada laboratorio debe establecer su propio rango de referencia. LIMITACIONES Inspeccione cuidadosamente la integridad de la bolsa de prueba Dímero-D mlabs antes de su uso. Si se determina que la bolsa fue manipulada, es decir, desgarrada o pinchado, no proceda a utilizar el cartucho de prueba. Póngase en contacto con el soporte técnico local inmediatamente. El kit de prueba Dímero-D mlabs es estrictamente para uso in vitro solamente. Las instrucciones y los procedimientos previstos en este inserto deben ser atendidas con atención. El kit de ensayo Dímero-D mlabs no está destinado a ser utilizado como prueba absoluta de PE y TVP. Los resultados de las pruebas obtenidos son únicamente de referencia para el médico. Todos los elementos proporcionados en el kit de prueba son para aplicación de uso único y deben desecharse adecuadamente después de su uso como muestras de prueba aplicadas pueden ser potencialmente infeccioso.
4 REFERENCIAS S.Z. Goldhaber. Embolia pulmonar. New England Journal of Medicine : pg. PD Wells, D. R. Anderson, M. Rogers et al. Evaluación de D- dímero en el diagnóstico de sospecha de trombosis venosa profunda. New England Journal of Medicine pgs P. F. Fedullo y V.F. Tapson. La evaluación de sospecha de embolismo pulmonar. New England Journal of Medicine pgs Símbolos Diagnostico In vitro Explicación Nombre y dirección del fabricante Representante Autorizado Europeo Marca CE Limitación de Temperatura Número de Lote Fecha de Expiración No reusar Numero de Catalogo Contenido suficiente para n pruebas Precaución leer cuidadosamente.
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