Centro de Inmunoensayo
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- Marina Castillo Plaza
- hace 5 años
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1 Centro de Inmunoensayo
2 Principales Características del UMELISA Dengue IgM PLUS 1. Es un ensayo comercial para la detección de anticuerpos IgM contra los cuatro serotipos del virus del Dengue en muestras de suero humano, que se basa en la técnica de ELISA y emplea muy bajos volúmenes (5 10 µl) de reactivos y muestras, lo cual abarata los costos. 2. Los resultados se obtienen en el día, dado que la ejecución de la técnica tiene una duración aproximada de 2.30 horas, permitiendo el cálculo, validación e interpretación de los mismos de manera automatizada, lo cual facilita y agiliza el trabajo. 3. Se basa en la tecnología SUMA (Sistema Ultra Micro Analítico), que posibilita el estudio simultáneo de gran número de muestras con determinado grado de automatización, por lo que constituye una prueba útil para la realización de pesquisajes masivos. 4. Recomendable para la vigilancia epidemiológica y el diagnóstico de casos clínicamente sospechosos en la infección por cualquier serotipo del virus del Dengue. 5. En las evaluaciones realizadas hasta la fecha ha mostrado elevados niveles de sensibilidad y especificidad.
3 ESTUCHE COMERCIAL El UMELISA DENGUE IgM PLUS en los próximos meses estará disponible tanto para muestras de suero, como de SANGRE SECA SOBRE PAPEL DE FILTRO.
4 UMELISA Dengue IgM Plus PLACA: REP1-115 FECHA: Jueves 29/4/2004 CONTROL POSITIVO (P1): (P2): (P3): (P): CONTROL NEGATIVO (N1): 5.19 (N2): 4.60 (N3): 5.17 (NN): 5.17 NN/(P-NN): NIVEL DE CORTE:0.225 * (P - NN) + NN = BL:0.191 * (P - NN) + NN = CALC = (Fi-NN)/(P-NN) No. Código Fluor1 CALC Fluor2 CALC RESULTADO 1 P POSITIVO S 29/3/ POSITIVO S 30/3/ S 30/3/ POSITIVO S 30/3/ S 30/3/ POSITIVO S 30/3/ POSITIVO S 31/3/ S 31/3/ POSITIVO /3/04 SP POSITIVO 11 SP POSITIVO 12 SV POSITIVO 13 SV POSITIVO /3/04 SP SP SV SV /3/04 SP SP BL 20 SV
5 S U M A istema ltra icro nalítico UMELISA SUMA EQUIPOS SOFTWARE El Sistema Ultra Micro Analítico (SUMA) es un sistema integral de reactivos y equipos que posibilita el estudio masivo de un gran número de enfermedades con determinado grado de automatización y bajo costo de operación, debido a los pequeños volúmenes de reactivos y muestras que utiliza para la realización de las pruebas. El procesamiento, cálculo e interpretación de los resultados se realiza de manera automática gracias al empleo de paquetes de software diseñados para cada técnica.
6 Económico VENTAJAS DEL SUMA ELISA UMELISA 100 a 300 µl 5 a 10 µl Rápido Confiable Altamente sensible Alta especificidad No isotópico Alto grado de automatización y comodidad
7 DISTRIBUCION DE LABORATORIOS SUMA, PARA DENGUE, INSTALADOS EN LA REGION. MÉXICO 13 EL SALVADOR 6 HONDURAS 5 CUBA 6 VENEZUELA 32 COLOMBIA 33 ECUADOR 1 BRASIL 4 ARGENTINA 21
8 RESULTADOS DE LAS EVALUACIONES REALIZADAS AL UMELISA DENGUE IgM PLUS Cuba Centro Evaluador Laboratorio de Enfermedades Infecciosas Centro de Inmunoensayo México Instituto de Diagnóstico y Referencia Epidemiológicos (INDRE). Cuba Laboratorio de Arbovirus, Departamento de Virología, Centro Colaborador de la OMS/OPS para el Estudio de Enfermedades Víricas. Instituto Pedro Kourí Sensibilidad Resultados Especificidad Concordancia (Indice Kappa) 97,3 % 97,5 % Muy Buena (0,910) 98,7 % 94,2 % Muy Buena (0,892) 99,4 % 94,8 % Muy Buena (0,924)
9 UMELISA DENGUE IgM PLUS Características de las evaluaciones realizadas Cuba Centro de Inmunoensayo Muestras empleadas: Panel de 624 muestras procedentes de individuos con síntomas de enfermedad eruptivo-febril residentes en Cuba, Brasil, Venezuela, Colombia y México. Referencia utilizada: MAC-ELISA del Instituto Pedro Kourí (IPK). Centro de Referencia Nacional de Dengue en Cuba.
10 Características de las evaluaciones realizadas Muestras empleadas: México INDRE. Panel de 250 muestras de suero procedentes del banco de muestras biológicas del INDRE: - 78 muestras avaladas de individuos con anticuerpos tipo IgM contra el virus del Dengue muestras avaladas de individuos seronegativos. Referencia utilizada: Muestras caracterizadas por el CDC de Puerto Rico.
11 Características de las evaluaciones realizadas Muestras empleadas: Cuba Instituto Pedro Kourí. Panel de 275 muestras de suero pertenecientes a las siguientes categorías: - Sueros positivos de anticuerpos IgM a hepatitis A. - Sueros (fase convaleciente) de individuos con una infección confirmada por Influenza. - Sueros recibidos a través de la vigilancia nacional de dengue, todos con resultado negativo en la prueba de referencia. - Sueros positivos y negativos de anticuerpos IgM a dengue procedentes de las epidemias de Santiago de Cuba (1997) y Ciudad de la Habana (2001). - Sueros de personas sanas vacunadas contra Fiebre Amarilla, que presentan anticuerpos IgM a Fiebre Amarilla. Referencia utilizada: MAC-ELISA del Instituto Pedro Kourí (IPK). Centro de Referencia Nacional de Dengue en Cuba.
12 UMELISA DENGUE IgM PLUS TIEMPO DE DURACIÓN: 2:30 h IgM muestra Anti-IgM humana de recubrimiento Adición Antígeno de dengue Adición AcM Biotinilado Adición Conjugado Estreptavidina/FA Adición Sustrato 30min - 37ºC 30min - 37ºC 30min - 37ºC 30min - 37ºC 30min-TA
13 COMPORTAMIENTO DE LA REACTIVIDAD EN LAS MUESTRAS EVALUADAS, SEGÚN PAÍS DE PROCEDENCIA. País de procedencia Muestras de donantes de sangre N Muestras de individuos con síntomas de enfermedad eruptivo-febril Reactivas % N Reactivas % Colombia , ,08 Venezuela , ,02 México ,51 Brasil ,12 El Salvador ,64 Ecuador ,00 Cuba , ,40 TOTAL , ,35
14 DETERMINACION DEL NIVEL DE CORTE DEL ENSAYO. 900 Distribución de frecuencias para la población de individuos con sospecha clínica de infección por dengue Frec.Abs ,00 0,20 0,40 0,60 0,80 1,00 1,20 1,40 1,60 1,80 2,00 2,20 2,40 2,60 2,80 3,00 (M-N)/(P-N)
15 Rango de valores de fluorescencia observado para la población de negativos en el UMELISA DENGUE IgM PLUS Frec. Abs Fluorescencia No. de muestras evaluadas: 1416
16 Resultados de la evaluación de diferentes pruebas comerciales para Dengue IgM. México, INDRE. Prueba Comercial evaluada Dengue IgM (PANBIO) Dengue IgM (BioRad) Dengue IgM (Chemicon) Dengue IgM (INMUNOLAB) Dengue IgM (OMEGA) Dengue IgM (Biosimex) Dengue IgM PLUS (TecnoSuma) Sensibilidad (%) Especificidad (%) 93, , , ,3 85,9 96,5 98,7 93,6 98,7 94,2
17 Reactividad encontrada para el UMELISA DENGUE IgM PLUS en diferentes poblaciones. Población Estudiada Muestras Evaluadas Muestras Reactivas Reactividad (%) Vigilancia Epidemiológica de Dengue ,02 % Donantes de Sangre ,8 % Individuos sanos vacunados contra Fiebre Amarilla. Individuos con infección confirmada por Influenza (fase convaleciente) Individuos con anticuerpos IgM a hepatitis A ,4 % % % TOTAL ,6 %
18 Reactividad alcanzada en la Vigilancia Epidemiológica de Dengue en Cuba desde la introducción n del Laboratorio de vigilancia UMELISA DENGUE IgM PLUS Muestras procesadas Año o 2003 Muestras reactivas Reactividad (%) P. del Río ,41 C. Habana ,83 Guantánamo S. de Cuba ,05 Granma ,42 TOTAL ,63
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