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1 k 19 OFICINA ESPAÑOLA DE PATENTES Y MARCAS ESPAÑA 11 knúmero de publicación: kint. Cl. 7 : B04B /04 A61J 1/00 12 k TRADUCCION DE PATENTE EUROPEA T3 86 knúmero de solicitud europea: k Fecha de presentación : k Número de publicación de la solicitud: k Fecha de publicación de la solicitud: k 4 Título: Juego de bolsas para utilizar en separación centrífuga. k 30 Prioridad: SE k 73 Titular/es: SanguisTech AB Karlskoga, SE k 4 Fecha de la publicación de la mención BOPI: k 72 Inventor/es: Unger, Peter y Westberg, Eric k 4 Fecha de la publicación del folleto de patente: k 74 Agente: Elzaburu Márquez, Alberto ES T3 Aviso: En el plazo de nueve meses a contar desde la fecha de publicación en el Boletín europeo de patentes, de la mención de concesión de la patente europea, cualquier persona podrá oponerse ante la Oficina Europea de Patentes a la patente concedida. La oposición deberá formularse por escrito y estar motivada; sólo se considerará como formulada una vez que se haya realizado el pago de la tasa de oposición (art 99.1 del Convenio sobre concesión de Patentes Europeas). Venta de fascículos: Oficina Española de Patentes y Marcas. C/Panamá, Madrid

2 1 ES T3 2 DESCRIPCION Juego de bolsas para utilizar en separación centrífuga. La invención se refiere a un juego de bolsas destinado a la separación centrífuga por tandas. Más particularmente, la invención se refiere a un juego de bolsas del tipo que comprende una bolsa exterior, esencialmente en forma de anillo, y una bolsa interior formada de la parte central del anillo, así como a uno o más tubos de conexión entre los interiores de estas bolsas. Sistemas de bolsas acopladas se utilizan para la separación centrífuga de sangre, productos sanguíneos, y otros fluidos biológicos. El fluido que ha de ser separado es suministrado a una bolsa primaria del sistema, y después de la centrifugación y separación del fluido en dos o más fracciones, una o más de éstas es presionada para entrar en las bolsas unidas. Para la separación centrífuga se conocen bolsas destinadas especialmente a ello redondas y en forma de anillo. Sistemas de bolsas de este tipo se describen, por ejemplo, en las solicitudes de patente internacional WO 87/06844 y WO 89/ Estos documentos describen también cómo puede ser fabricado este tipo de sistema de bolsa a partir de películas de plástico, que se extienden una sobre otra y se unen por medio de una costura exterior y otra interior, ambas en forma de anillo, de modo que se crea una bolsa exterior en forma de anillo así como una bolsa interior plana en la parte central del anillo. En la bolsa interior pueden obtenerse varias cámaras dispuestas una sobre otra, en función del número de capas de película que sean obturadas entre sí. La costura interior está dotada de manera adecuada de una perforación, de modo que las bolsas exteriores e interiores puedan ser separadas entre sí. El fluido que ha de ser separado es suministrado a la bolsa exterior en forma de anillo, y después de la centrifugación es sometido a presión externa que presiona la fracción que está más próxima al centro rotor y la obliga a pasar a través del canal de conexión para ir a la bolsa interior. Pueden producirse varias combinaciones diferentes de canales conectados, si la bolsa interior comprende una pluralidad de cámaras. Se conocen también métodos diferentes para conseguir la presión de compresión sobre la bolsa mientras ésta se halla en el rotor y sometida a rotación. Desde el punto de vista del coste es ventajoso que la bolsa interior pueda ser fabricada a partir del material de película que se obtiene de la parte restante central de la bolsa exterior. Si se requiere un gran volumen para la bolsa interior, esto supone que el diámetro de la bolsa exterior será grande, lo que constituye una desventaja en muchas aplicaciones, ya que se requieren centrifugadores con grandes diámetros de rotor. Un objeto de la presente invención es proporcionar un juego de bolsas mejorado del tipo antes citado, que proporcione una mayor flexibilidad en cuanto a la elección del volumen de la bolsa interior y el diámetro de la bolsa exterior. Éste y otros objetos y ventajas, que se exponen con más detalle en la descripción que sigue, se logran por medio del juego de bolsas que se define en las reivindicaciones. Así pues, el juego de bolsas comprende una bolsa exterior esencialmente en forma de anillo, y una bolsa interior formada de la parte central del anillo y que preferentemente es separable de dicho anillo, así comounoomás tubos de conexión entre los interiores de estas bolsas. De acuerdo con la invención, el juego de bolsas comprende también una parte central circular y rígida sobre la que está montada la bolsa exterior en posición para centrifugación, con lo que a la bolsa exterior se le da forma cónica en torno a la parte central por medio de acortamiento de contracción del anillo. La parte central tiene también la misión de facilitar el manejo del juego de bolsas, así comode fijar la bolsa interior en la posición prevista para la centrifugación. La parte central tiene una cavidad interior en la que se coloca la bolsa interior, de modo que limita la expansión radial de ésta pero permite su expansión en la dirección axial cuando está llena de fluido. La cavidad interior tiene un diámetro que es inferior al diámetro de la bolsa interior, con lo que dicha bolsa interior es presionada dentro de la cavidad de modo que su parte periférica se curva a lo largo de las paredes de dicha cavidad. La parte central tiene, con preferencia, forma esencialmente de cilindro abierto hacia abajo. El acortamiento por contracción del anillo de la bolsa exterior puede conseguirse mediante la recogida y unión de una sección del anillo para formar un pliegue. Se bloquea así la comunicación de fluido del anillo interior de la bolsa. El pliegue puede ser colocado sobre el anillo de modo que se obtengan dos extremos de bolsa solapados, así como una pieza de material entre los extremos de la bolsa que permanece vacía y bloqueada al flujo de fluido. La bolsa exterior puede también ser cortada, obturándose los extremos libres resultantes. El acortamiento de la bolsa puede ser conseguido entonces tirando de los extremos y uniendo éstos, de modo que se solapen entre sí. La bolsa puede ser cortada también en dos lugares, retirando la pieza de material intermedia, y se tira de los extremos libres uno hacia el otro hasta que se solapen. Debido al hecho de que la comunicación de fluido de la parte de círculo de la bolsa exterior es bloqueada o interrumpida, se evita así el flujo de fluido en torno a la bolsa cuando la centrifugación se acelera o se retarda, lo que acelera el comienzo del procedimiento de separación y evita la sedimentación cuando se procede a frenar el rotor. La cámara de separación del rotor está adaptadaalaformacónica de la bolsa exterior acortada. Debido a que la separación se produce en una dirección radial en una cámara cónica relativamente estrecha, se consigue un efecto de separación angular y una separación rápida. El camino de separación en la dirección radial es corto, yelcomponenteespecífico más pesado se desplaza sólo una distancia corta antes de encontrar una superficie oblicua, lo que le conduce a la parte inferior del cono. Una colocación central de la bolsa interior en el centro del rotor, combinada con una ex-

3 3 ES T3 4 pansión limitada en dirección radial, significa que el fluido recibido en la bolsa interior es sometido a un campo de fuerza limitado. Se ha demostrado que esto resulta particularmente importante cuando se recuperan suspensiones en partículas, por ejemplo, suspensiones de trombocitos, ya que ha de evitarse la resedimentación y la indeseable formación de agregados de partículas. El juego de bolsas de acuerdo con la invención resulta particularmente adecuado para la recuperación de células de médula ósea mediantela separación centrífuga de suspensiones de dicha médula ósea. Seguidamente se describirá la invención con más detalle referida a las figuras que se acompañan. La fig. 1 muestra una realización de una bolsa exterior e interior para un juego de bolsas de acuerdo con la invención. La fig. 2 muestra una realización parcialmente diferente de la bolsa exterior e interior de acuerdo con la invención. La fig. 3 muestra un corte transversal a través de la parte central rígida de una bolsa de acuerdo con la invención. La fig. 4 muestra la parte central de acuerdo con la figura 3, en corte horizontal. La fig. muestra una vista en corte a través de un juego de bolsas de acuerdo con la invención, con la parte central rígida de acuerdo con las figs. 3y4. La fig. 6 muestra el juego de bolsas de acuerdo con la fig., en corte horizontal. La fig. 7 es una vista de un corte a través de un juego de bolsas, con cámaras de bolsa interior dobles montadas en un rotor de centrifugación. La fig. 8 muestra el rotor de centrifugación visto desde arriba. Lasfigs9a11muestranesquemáticamente el uso de un juego de bolsas de acuerdo con la invención, durante la recuperación de una suspensión de trombocitos. En la fig. 1 se muestra una realización de una bolsa exterior 1 esencialmente en forma de anillo, y una bolsa interior central 2 esencialmente circular formada de la parte central del anillo. Los interiores de las bolsas están unidos por medio de un tubo 3, y hay un orificio 4 en la bolsa exterior y un orificio en la bolsa interior. La bolsa exterior está dotada de una conexión adicional 6 para el suministro de fluido a dicha bolsa y la retirada del mismo. El orificio 4 está situado en una protuberancia 7 dirigida radialmente hacia dentro de la bolsa exterior. Cuando la fase enriquecida más ligera contra el centro del rotor es presionada para salir fuera de la bolsa exterior después de la separación, por medio de presión aplicada a ella, puede producirse fácilmente una formación de vórtice en torno a la abertura de salida, y partes de la fase siguiente pueden ser succionadas. Mediante la colocación del orificio 4 en una protuberancia que se extiende radialmente más hacia dentro de las otras partes de la bolsa exterior, y mediante la formación del rotor de modo que esta parte de la bolsa forme un hueco relativamente estrecho entre el rotor y la cubierta del rotor en la dirección de la altura, puede evitarse la formación del vórtice en torno al orificio 4, y la fase más li gera puede ser recuperada con alta calidad y alto rendimiento. La bolsa exterior está dotada también de un cierto número de medios de fijación, por ejemplo, los ojales 8, para fijación de dicha bolsa a una parte central rígida que será descrita con más detalle con referencia a las figs. 4 a 7. Las bolsas son producidas partiendo de dos películas de plástico que se colocan una sobre la otra y se obturan entre sí mediante la soldadura de un anillo exterior 9 y de un anillo interior 10. La segunda soldadura citada es tal que separa las bolsas totalmente entre sí, o las hace separables rasgándolas. La fig. 2 muestra una realización parcialmente diferente de una bolsa de acuerdo con la invención, y difiere de la que ha sido descrita con referencia a la fig. 1 en que la soldadura del anillo interior 10 está situada algo más excéntrica con respecto al anillo exterior. Por tanto, la bolsa exterior es más ancha en el área del orificio 4 del tubo 3 en la bolsa exterior. Esta parte más ancha cumple la misma función que la protuberancia 7 en la realización de acuerdo con la fig. 1. La parte más ancha de la bolsa exterior es colocada de manera correspondiente en el hueco más estrecho entre el rotor y la cubierta del mismo. Los detalles que corresponden a cada una de las otras figuras han sido indicados con la misma referencia numérica. La forma en anillo de la bolsa exterior se corta y los extremos libres 11 y 12 que resultan así son cerrados. El corte puede ser llevado a cabo, por ejemplo, por medio de una soldadura que, al mismo tiempo, obtura los extremos. En la realización mostrada, la bolsa es cortada con dos soldaduras dirigidas de modo sustancialmente radial 13 y 14, a cierta distancia entre sí. La pieza de material intermedio 1 es retirada. La bolsa exterior, esencialmente en forma de anillo, queda así libre de cualquier comunicación de fluido interior circulante. Para reducir el diámetro adoptado por el sistema de bolsa y, al mismo tiempo, facilitar el manejo de las bolsas y la fijación de éstas en la posición prevista para la centrifugación, se utiliza una parte central 16 circular y rígida. La bolsa exterior es montada en torno al exterior de la parte central, y la bolsa interior es montada dentro de la cavidad interior 17 de la parte central. El juego de bolsas puede ser levantado así para situarlo dentro y fuera del rotor asiéndolo simplemente con la mano. Las figs. 3 y 4 muestran una realización de dicha parte central en forma de un cilindro abierto hacia abajo. La fig. 3 muestra unavistadeuncorteatravés de la parte central, y la fig. 4 muestra dicha parte central en corte horizontal. El cilindro y su extremo abierto están dotados de una pestaña inclinada cónica 18, en la que se sujeta el borde interior de la bolsa exterior en los medios de sujeción 19, que cooperan con los ojales de sujeción 8 de la bolsa exterior. En su interior, el cilindro tiene unos sujetadores 20 y 21 para fijar el tubo de conexión 3 entre la bolsa exterior y la interior, y está dotado de unas aberturas 22 y 23 para acceder el tubo desde el lado superior de la parte central y permitir la fijación de válvulas de retención o sensores ópticos, etc. sobre el tubo, cuando el juego de bolsas es 3

4 ES T3 6 colocado en el rotor. Las figs. y 6 muestran un juego de bolsas completo, con la parte central en corte y en vista horizontal, respectivamente. La bolsa interior 2 es colocada dentro de la parte central 16, que está dispuesta para limitar la expansión radial de dicha bolsa interior, pero que permite la expansión axial de ella cuando está llena con fluido. En las figuras, una parte central se muestra en forma de cilindro, de acuerdo con las fig. 3 y 4. El cilindro tiene un diámetro menor que el de la bolsa, que es presionado dentro del cilindro de modo que su parte periférica 2 es plegada y descansa contra la superficie interior de dicho cilindro. Cuando la bolsa interior se llena se expande en la dirección vertical dentro del cilindro. El pliegue de la parte periférica de la bolsa interior, que es el resultado de que dicha bolsa tenga un diámetro mayor que el de la parte central 16, ha demostrado tener sólo una intrusión marginal dentro del volumen máximo, que puede ser aceptada en la bolsa interior. La bolsa exterior 1 tiene un diámetro demasiado grande para que su borde interior ajuste dentro de la pestaña 18. Con respecto al montaje dentro de la parte central, la bolsa exterior en forma de anillo es acortada una sección de dicho anillo, sobre la que se ejerce tracción para formar un pliegue 24 que queda tendido sobre de dicho anillo. Se rompe así la comunicación continua de fluido dentro de dicho anillo. En el caso de que dicho anillo sea cortado por medio de una soldadura o similar, aquél es acortado por el extremo que queda tendido en relación de solape. Con el acortamiento del anillo, la bolsa adoptará una forma cónica sin ser plegada, y puede ser sujetada fácilmente a la pestaña inclinada cónica 18 formada del mismo modo sobre el cilindro 16. De esta manera, el sistema de bolsa tiene un diámetro menor, y puede ser utilizado en rotores de centrifugación pequeños, con independencia de que las bolsas sean fabricadas con un diámetro que dependa del volumen que se desee tenga la bolsa interior 2, es decir, la sección central de la bolsa exterior. La fig. 7 muestra un corte a través de un juego de bolsas colocado en un rotor de centrifugación 26 destinado al sistema. En este caso, el juego de bolsas tiene una bolsa interior con una cámara superior 27 y una cámara inferior 28. La fig. 8 muestra el rotor visto desde abajo. Con 29 se indica la base del rotor, y con 30 su cubierta. Un canal 31 para fluido hidráulico pasa a través del eje del rotor hacia el compartimiento anular 32 de dicho rotor, donde hay una cámara hidráulica 33 en forma de anillo delimitada por una membrana 34 que la separa del resto del compartimiento anular. La bolsa exterior es colocada en dicho compartimiento anular, y su parte protuberante 7 es situada en el hueco 3 entre la base del rotor y su cubierta. El tubo de conexión 3, que cuenta con un orificio en la protuberancia 7 de la bolsa exterior, se divide en una rama 36 que dispone de un orificio en la cámara27delabolsa interior superior, y otra rama 37 dispone de un orificio en la inferior. Los conductos ramificados están colocados en unas válvulas de retención 38 y 39, que son controladas por el funcionamiento programado del centrifugador y/o las fotocélulas, que detectan el desplazamiento de la superficie limítrofe de la fase en el tubo de conexión 3. La bolsa exterior está conectada a un tubo adicional 6, que es extraído a través del orificio 22 de la parte central y, además, a través de un orificio 40 en la cubierta del rotor. El tubo se utiliza para llenar el recipiente exterior con el fluido que ha de ser separado, por lo que es accesible desde el exterior del rotor. Después de llenar el recipiente exterior, el tubo se cierra con unas tenazas de soldar y se coloca en una ranura 41 de la cubierta del rotor. En lugar de un tubo conectador ramificado 3, la bolsa exterior puede estar conectada a cada una de las cámaras de la bolsa interior por tubos separados y válvulas unidireccionales, del mismo modo que se describe en el documento WO 89/02273, y el juego de bolsas puede ser utilizado para operaciones de lavado, tales como las que se describen en dicho documento. El juego de bolsas de acuerdo con la invención puede ser utilizado así para la separación de sangre y de otros fluidos biológicos, y con tratamiento de tales fluidos con componentes diferentes. El sistema con cámaras de bolsa interior dobles y tubo conectador ramificado entre la bolsa exterior y la interior, puede ser utilizado cuando deba producirse una separación en tres fracciones diferentes. Cada una de dos fracciones es conducida a su respectiva cámara de bolsa interior, y la tercera permanece en la bolsa exterior. El juego de bolsas de acuerdo con la invención está destinado, especialmente, a la recuperación de suspensiones de trombocitos de fracciones de capas superficiales de plasma coagulado amarillentas aisladas, que se muestra esquemáticamente en las figs. 9 a 11. La capa coagulada amarillenta es recuperada como una fracción intermedia mediante separación centrífuga de sangre íntegra. Un cierto número de dichas capas coaguladas amarillentas 42, por ejemplo seis, son transferidas a travésdeltubo6alabolsaexterior 1, después de lo cual, el tubo 6 es cortado y obturado con unas tenazas de soldar (fig. 9). Las capas coaguladas amarillentas son centrifugadas y divididas en un plasma 43 rico en trombocitos, y queda un volumen restante (fig. 10). Esta centrifugación se efectúa con cierto cuidado, con objeto de evitar la centrifugación de las células de trombocitos. El ángulo cónico de la bolsa exterior yeldiámetro relativamente pequeño constituyen, por tanto, una gran ventaja. Después se aplica una presión a la bolsa exterior, y la suspensión de trombocitos es presionada durante la centrifugación en marcha a través del tubo 3 hacia la bolsa interior 2 (fig. 11). Por tanto, dicha bolsa interior se expandirá con ello en dirección vertical, mientras que su expansión radial queda fija por la parte central (no mostrada). Dado que la suspensión de trombocitos es transferida al centro del rotor, y es mantenida en un área limitada en la dirección radial, estará sometidasólo a un fuerza de centrifugación débil tan pronto como sea recuperada. Si la suspensión de trombocitos es sometida a una fuerza centrífuga duradera y fuerte, se produce una formación indeseada de agregados y pérdida 4

5 7 ES T3 8 de células de trombocitos. Los requerimientos especiales para la recuperación de una suspensión de trombocitos de alta calidad y alto rendimiento se logran así con el juego de bolsas de la presente invención. Otro campo de aplicación en el que el juego de bolsa de acuerdo con la invención resulta especialmente adecuado es la separación de médula ósea. Dicha separación de médula ósea es aplicada en relación con tratamientos de cáncer que utilizan grandes dosis de tratamiento por radiación. Médula ósea es tomada del paciente antes del tratamiento de radiación, y a través de varias separaciones y procedimientos de lavado son aisladas células de médula ósea, que luego son retransfusionadas después del tratamiento de radiación. Un procedimiento conocido para aislar células de médula ósea comprende las operaciones siguientes: a) separación centrífuga de una suspensión de médula ósea en tres fracciones, y recogida de la fracción intermedia, o capa superficial de plasma coagulado amarillenta; b) la fracción de dicha capa de plasma coagulado amarillenta de la operación a) es centrifugada una vez más en un fluido de separación, por lo general FICOLL R (Amersham Pharmacia Biotech AB), y se recoge una fracción intermedia quecontienelascélulas de médula ósea; c) lavado de la fracción recogida en la operación b) para recuperar las células de médula ósea retransfusionables. El juego de bolsas de acuerdo con la invención puede ser utilizado en dicho proceso de la siguiente manera: En la operación a) se utiliza un juego de bolsas con cámaras dobles en la bolsa interior, y un conducto de conexión ramificada desde la bolsa exterior a las bolsas interiores, es decir, del tipo mostrado en la fig. 7. A la bolsa exterior se le suministra una tanda de suspensión de médula ósea, que mediante la centrifugación es dividida en plasma, capa superficial de plasma coagulado amarillenta (que comprende las células de médula ósea), y productos restantes. Debido a la influencia de la presión sobre la bolsa exterior, la fracción de plasma es presionada después, durante el giro en marcha, hacia la primera bolsa interior, ydespués, una cantidad determinada de capa coagulada amarillenta hacia la segunda bolsa interior, y los productos restantes se dejan en la bolsa exterior En la operación b) se utiliza un juego de bolsas similares al de la operación a). El fluido de separación (Ficoll) es suministrado a la bolsa exterior, y una suspensión de fracción de capa coagulada amarillenta de la operación a) es añadida cuidadosamente, de modo que forma una capa por encima del fluido de separación. La centrifugación se inicia despacio, de modo que se evite la mezcla. En función del peso específico de las células, éstas emigrarán a través del fluido de separación o permanecerán encima de él durante la centrifugación. Las células de médula ósea son enriquecidas en una capa encima del fluido de separación. El fluido supernatátil (plasma) es prensado luego durante la centrifugación en marcha, dentro de la primera cámara de la bolsa interior, ydespués, una fracción intermedia consistente en la capa más próxima encima del fluido de separación (que contiene las células de médula ósea) es presionada para pasar al interior de la segunda cámara de la bolsa interior. El material de células más pesadas permanece en la bolsa exterior. En la operación c) puede ser utilizado un juego de bolsas con una bolsa interior de una única cámara, es decir, del tipo que se describe con referencia a la fig.. La fracción de células de médula ósea contaminadas con fluido de separación de la operación b) es transferida a la bolsa exterior, y se suministra un fluido de lavado adecuado. Después de la centrifugación, el fluido de lavado utilizado es presionado para entrar en la bolsa interior. Nuevo fluido de lavado puede ser suministrado entonces a la bolsa exterior a través de un tubo (como se muestra en la fig. 7) accesible desde el exterior de la cubierta del rotor, y el procedimiento de lavado puede ser repetido según se precise. Las células de médula ósea son aisladas en la bolsa exterior. Con el juego de bolsas de acuerdo con la invención puede obtenerse un juego de tratamiento de precio económico, que permite la separación de fluidos biológicos durante la centrifugación en marcha en recipientes de componente separados, sin que los fluidos pasen por acoplamientos giratorios complicados, costosos, y de esterilidad insegura. A pesar del diámetro pequeño, que puede ser adaptado al tipo de centrifugador existente, en la bolsa interior pueden recibirse volúmenes relativamente grandes. Por tanto, el juego de bolsas es utilizable para muchos tipos diferentes de separaciones. 60 6

6 9 ES T3 10 REIVINDICACIONES 1. Un juego de bolsas para uso en separaciones centrífugas, que comprende una bolsa exterior (1) esencialmente en forma de anillo; y una bolsa interior central (2) formada de la parte central de dicho anillo, y que es separable de él; y uno omás tubos de conexión (3, 36, 37) entre los interiores de dichas bolsas; caracterizado por una parte central, circular y rígida (16) sobre la que es montada la bolsa exterior (1) en posición de centrifugación, con lo que a la bolsa exterior (1) se le da forma cónica en torno a la parte central rígida (16) por medio de acortamiento de contracción del anillo de dicha bolsa (1). 2. Un juego de bolsas de acuerdo con la reivindicación 1 ā, caracterizado porque la bolsa exterior tiene dos extremos libres, que están formados por corte del anillo y obturación de los extremos resultantes, y porque dichos extremos libres son envueltos uno sobre otro para acortar dicho anillo cuando la bolsa exterior (1) es montada sobre la parte central rígida (16). 3. Un juego de bolsas de acuerdo con la reivindicación 2 ā, caracterizado porque el anillo es cortado en dos lugares, y la sección de material entre ellos es retirada. 4. Un juego de bolsas de acuerdo con la reivindicación 1 ā, caracterizado porque la bolsa exterior (1) es acortada mediante un pliegue después de la separación de la bolsa interior central (2).. Un juego de bolsas de acuerdo con la reivindicación 1 ā, caracterizado porque la bolsa exterior tiene una extensión radial (7) dirigida hacia dentro, en la que está situada una abertura para el tubo de conexión. 6. Un juego de bolsas de acuerdo con la reivindicación 1 ā, caracterizado porque la parte central de la bolsa exterior (1), que es utilizada como bolsa interior (2), está situada algo excéntricamente, de modo que la bolsa exterior (1) es más ancha por un lado, y porque hay una abertura (4) para el tubo de conexión situada en el borde interior de dicho lado más ancho. 7. Un juego de bolsas de acuerdo con la reivindicación 1 ā, caracterizado porque la bolsa interior (2) comprende dos o más cámaras (27, 28) dispuestas una sobre la otra, cada una de las cuales comunica con la bolsa exterior (1) a través de tubos de conexión separados o ramificados. 8. Un juego de bolsas de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 ā a7 ā, caracterizado porque la parte central rígida (16) tiene una cavidad (17) en la que está situada la bolsa interior (2), y cuya cavidad está dispuesta para limitar la dimensión radial de dicha bolsa interior (2), pero para permitir la expansión axial de dicha bolsa cuando ésta se llena con un líquido. 9. Un método para la separación centrífuga de una suspensión de trombocitos de una capa superficial de plasma coagulado amarillenta obtenida de separaciones de sangre íntegra, utilizando el juego de bolsas de acuerdo con la reivindicación 8 ā, y un centrifugador que tiene un rotor (26) con un espacio de tratamiento concéntrico con respecto al eje de giro del rotor, cuyo espacio de tratamiento comprende un compartimiento central del rotor y un compartimiento anular (32) de dicho rotor, y cuenta con medios (31, 33, 34) para reducir el volumen del compartimiento anular del rotor durante el giro de éste; caracterizado por: - suministrar dicha capa superficial de plasma coagulado amarillenta a la bolsa exterior (1) en forma de anillo del juego de ellas, y colocar dicho juego de bolsas en el citado espacio de tratamiento, de modo que la parte central circular rígida (16) quede situada en dicho compartimiento central del rotor, y la bolsa exterior en forma de anillo esté situada en dicho compartimiento anular (32) del rotor; - centrifugar la citada capa de plasma coagulado amarillenta para separarla en una fase ligera que comprende dicha suspensión de trombocitos, y una fase más densa de productos restantes; - expulsar dicha suspensión de trombocitos de la citada bolsa exterior (1) a la bolsa interior del juego de ellas durante el giro del rotor mediante la reducción del volumen de dicho compartimiento anular (32) del rotor; y - obtener dicha suspensión de trombocitos en la citada bolsa interior (2). 10. Un método para la separación centrífuga de células de médula ósea de suspensiones de dicha médula ósea, utilizando el juego de bolsas de acuerdo con la reivindicación 8 ā en lo que depende de la reivindicación 7 ā, y un centrifugador de un tipo que tiene un rotor (26) con un espacio de tratamiento concéntrico con respecto al eje de giro del rotor, cuyo espacio de tratamiento comprende un compartimiento central del rotor y un compartimiento anular (32) del rotor, y cuenta con medios (31, 33, 34) para reducir el volumen del compartimiento anular del rotor durante el giro de éste; caracterizado por: - suministrar dicha suspensión de médula ósea a la bolsa exterior (1) en forma de anillo del juego de ellas, y colocar dicho juego de bolsas en el citado espacio de tratamiento de modo que la parte central circular y rígida (16) quede situada en dicho compartimiento central del rotor, y la bolsa exterior en forma de anillo quede situada en dicho compartimiento anular (32) del rotor; - centrifugar dicha suspensión de médula ósea para separarla en una fracción de plasma ligera, una fracción intermedia de capa superficial de plasma coagulado amarillenta, y una fracción más densa de productos restantes; - expulsar dicha fracción de plasma ligera de dicha bolsa exterior (1) a una primera cámara (27) de la bolsa interior del juego de ellas, y después expulsar dicha fracción intermedia de capa de plasma coagulado amarillenta a una segunda cámara (28) de dicha bolsa interior durante el giro del rotor, mediante la reducción del volumen de dicho compartimiento anular (32) del rotor; y - recoger dicha fracción de capa de plasma coagulado amarillenta de dicha cámara (28) de la segunda bolsa para separación continuada. 11. El método de acuerdo con la reivindicación 10 ā, caracterizado porque dicha separación continuada se ejecuta en un segundo juego de bolsas de acuerdo con la reivindicación 8 ā,y comprende el suministro de un fluido de separación a la bolsa exterior (1) en forma de anillo de dicho segundo juego de bolsas, suminis-

7 11 ES T3 12 trando dicha fracción recogida intermedia de capa de plasma coagulado amarillenta como una capa por encima del fluido de separación en dicha bolsa exterior, y colocando dicho juego de bolsas en el espacio de tratamiento del rotor de modo que la parte central circular rígida (16) se sitúe en dicho compartimiento central del rotor, y la bolsa exterior en forma de anillo se sitúe en dicho compartimiento anular (32) del rotor; - centrifugar dicha fracción recogida con el citado fluido de separación en dicha bolsa exterior para separar la fracción recogida en una fracción de plasma ligera, una fracción intermedia dispuesta en una capa encima del fluido de separación, y una fracción más densa; expulsar dicha fracción de plasma ligera de dicha bolsa exterior (1) hacia una primera cámara (27) de la bolsa interior de dicho segundo juego de bolsas, y después expulsar dicha fracción intermedia hacia una segunda cámara (28) de dicha bolsa interior durante el giro del rotor, por reducción del volumen de dicho compartimiento anular (32) del citado rotor; - recoger la citada fracción intermedia, que contiene las células de médula ósea, de dicha segunda cámara de bolsa para tratamiento continuado; y lavar dicha fracción intermedia recogida para obtener células de médula ósea retransfusionables NOTA INFORMATIVA: Conforme a la reserva del art del Convenio de Patentes Europeas (CPE) y a la Disposición Transitoria del RD 2424/1986, de 10 de octubre, relativo a la aplicación del Convenio de Patente Europea, las patentes europeas que designen a España y solicitadas antes del , no producirán ningún efecto en España en la medida en que confieran protección a productos químicos y farmacéuticos como tales. Esta información no prejuzga que la patente esté o no incluída en la mencionada reserva. 7

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