Evaluación de microorganismos asociados a pudrición ácida mediante inoculaciones desafiadas

Transcripción

1 Evaluación de microorganismos asociados a pudrición ácida mediante inoculaciones desafiadas Ensayo I. Inoculaciones desafiadas Ensayo II. Inoculaciones desafiadas Ensayo III. Pruebas de patogenicidad Ensayo IV. Inoculaciones desafiadas

2 Objetivos Evaluar el efecto de inoculaciones con diferentes microorganismos asociados a pudrición ácida en uva Red Globe,, y luego desafiarlos todos contra todos Evaluar la patogenicidad de éstos en inoculaciones individuales, e identificar las principales especies comprometidas

3 Ensayo I Se inocularon bayas cv. Red Globe (16ºB) procedentes de Vicuña, sin daño aparente Microorganismos* inoculados: Aspergillus sp. Cladosporium sp. Penicillium sp. Bacteria acética Testigo (sólo agua)

4 Aislamientos obtenidos desde racimos enfermos

5 Metodología Bayas desinfectadas con hipoc. de Na (1%) y luego lavadas con ADE. Los hongos fueron inoculados con una concentración de 1 x 10 6 conidias/ml La bacteria se inoculó con una concentración de 1 x 10 8 ufc/ml

6 Inoculación inicial Ej: Aspergillus (incubación a 25ºC por 4 días) A los 4 días re-inoculación Aspergillus Cladosporium Penicillium bacteria Testigo

7 Metodología Se emplearon un total de 75 cámaras húmedas, 15 bandejas por microorganismo, o por el tratamiento testigo. Se hizo la inoculación, y se dejó incubando cada bandeja por espacio de 4 días a 25ºC. A los 4 días se inocularon nuevamente los patógenos obteniéndose un diseño factorial de 5 x 5 x 3

8 Ensayo 1. Inoculación sucesivas mixtas Asp-Asp Asp-Cla Asp-Pen Asp-Bac Asp-Tes Cla-Asp Cla-Cla Cla-Pen Cla-Bac Cla-Tes Pen-Asp Pen-Cla Pen-Pen Pen-Bac Pen-Tes Bac-Asp Bac-Cla Bac-Pen Bac-Bac Bac-Tes Tes-Asp Tes-Cla Tes-Pen Tes-Bac Tes-Tes Tratamientos Area con pudrición a de g d ef bc bc bc bc bc bc bc c b Resultados

9 Inoculaciones desafiadas Bacteria-Penicillium Cladosporium-Penicillium Testigo-Penicillium Aspergillus-Testigo

10 Principales Resultados Mayor daño fue obtenido con tratamiento Aspergillus-Aspergillus Daño significativo de Aspergillus- Penicillium o Penicillium-Aspergillus Cepa de Cladosporium o de bacteria acética no causa un daño significativo

11 Ensayo II. Se inocularon bayas cv. Red Globe provenientes de RM Se empleó la misma metodología de Ensayo I Se inoculó: Penicillium Aspergillus Botrytis Cepa de levadura Cepa de bacteria acética

12 Área de Daño, mm Ensayo II de Inoculaciones desafiadas a a a Penicillium Aspergillus Botrytis Levadura Bacteria b b

13 Principales Resultados Penicillium, Botrytis y Aspergillus figuran como los hongos capaces de causar un daño considerable en bayas cv. Red Globe La cepa de bacteria o de levadura empleada causaron un daño mínimo en las bayas inoculadas

14 Ensayo III. Prueba de patogenicidad Se inocularon bayas aparentemente sanas de cv. Red Globe (VI R, 18ºB) con 10 diferentes microorganismos, evaluando su efecto de cada uno por separado. 1.Cladosporium sp. 7. Bacteria 1 2. Aspergillus sp. 8. Bacteria 2 3. Ulocladium sp. 9. Levadura 1 4. Botrytis sp. 10. Levadura 2 5. Rhizopus sp. 11. Testigo (sólo agua) 6. Penicillium sp.

15 Metodología Los inóculos fueron obtenidos a partir de bayas de racimos enfermos. La concentración de estos inóculos es de 1*10 6 conidias/ml de solución para los hongos, 1*10 8 conidias/ml para las levaduras y de 1*10 8 UFC/ml para las bacterias. Previamente, las bayas fueron desinfectadas en una solución de hipoclorito de sodio al 1%, y luego lavadas con ADE.

16 Ensayo III. Prueba de patogenicidad Inoculaciones III Área lesionada (cm2) 45,00 40,00 35,00 30,00 25,00 20,00 15,00 10,00 5,00 0,00 a d d Cladosporium Aspergillus Ulocladium Botrytis Rhizopus Penicillium Bacteria 1 Bacteria 2 Levadura 1 Levadura 2 Testigo

17 Testigo Levadura 2 Bacteria 1 Cladosporium

18 Rhizopus Aspergillus Botrytis Penicillium

19 Ensayo IV. Inoculaciones desafiadas Se inocularon bayas cv. Red Globe provenientes de VI región Se empleó la misma metodología de Ensayo I Se inoculó: Cepa de bacteria Cepa de levadura Aspergillus Botrytis Penicillium Rhizopus Testigo (sólo agua)

20 Ensayo IV 0,00 5,00 10,00 15,00 20,00 25,00 30,00 35,00 40,00 45,00 50,00 Bact-Bact Bact- Lev Bact-Asp Bact-Bot Bact-Pen Bact-Rhiz Bact-Test Lev- Bact Lev-Lev Lev-Asp Lev-Bot Lev-Pen Lev-Rhiz Lev-Test Asp-Bact Asp-Lev Asp-Asp Asp-Bot Asp-Pen Asp-Rhiz Asp-Test Bot-Bact Bot-Lev Bot-Asp Bot-Bot Bot-Pen Bot-Rhiz Bot-Test Pen-Bact Pen-Lev Pen-Asp Pen-Bot Pen-Pen Pen-Rhiz Pen-Test Rhiz-Bact Rhiz-Lev Rhiz-Asp Rhiz-Bot Rhiz-Pen Rhiz-Rhiz Rhiz-Test Test-Bact Test-Lev Test-Asp Test-Bot Test-Pen Test-Rhiz Test-Test Tratamientos Área lesionada (cm 2)

21 Principales Conclusiones Los agentes causales de pudrición del racimo en vides cv. Red Globe son hongos de los géneros: Penicillium, Aspergillus, Rhizopus y Botrytis Rhizopus y Aspergillus fueron los hongos más agresivos, sin embargo, en esta temporada el hongo que presentó la mayor frecuencia fue Penicillium