ACCU TELL Prueba Rápida en Cassette Troponina I Sólo para uso diagnóstico in vitro Para muestras de sangre completa/suero/plasma
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- Catalina Montoya Revuelta
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1 ACCU TELL Prueba Rápida en Cassette Troponina I Sólo para uso diagnóstico in vitro Para muestras de sangre completa/suero/plasma Este inserto es aplicable para los siguientes productos: Número de Catálogo ABT-CT-B59 completa Nombre del producto Prueba Rápida en cassette Troponina I en sangre Una prueba rápida para el diagnóstico de infarto al miocardio (IM) para detectar Troponina I cardíaca (TnIc) cualitativamente en sangre completa, suero o plasma. Sólo para uso profesional de diagnóstico in vitro. USO PREVISTO completa/suero/plasma) es un inmunoensayo cromatográfico rápido para la detección cualitativa de Troponina I cardíaca en sangre completa, suero o plasma para ayudar en el diagnóstico de infarto al miocardio (IM). RESUMEN
2 Troponina I cardíaca (TnIc) es una proteína que se encuentra en el músculo cardíaco con un peso molecular de 22.5 kda.¹ La Troponina I es parte de un complejo de tres subunidades que compuesto por Troponina T y Troponina C. Junto con la tropomiosina, este complejo estructural forma el componente principal que regula la actividad ATPasa sensible al calcio de la actomiosina en el músculo esquelético estriado y cardíaco.² Después de que ocurre una lesión cardíaca, la Troponina I se libera a la sangre entre las 4-6 horas después del inicio del dolor. El patrón de liberación de TnIc es similar CK-MB, pero mientras que los niveles de CK-MB vuelven a la normalidad después de 72 horas, la Troponina I permanece elevada durante 6-10 días, lo que permite una mayor detección de lesiones cardíacas. La alta especificidad de las mediciones de TnIc para la identificación del daño del miocardio se ha demostrado en afecciones tales como período perioperatorio, después de carreras de maratón y traumatismo cerrado de tórax.³ La liberación de TnIc también se ha documentado en afecciones cardíacas distintas del infarto agudo al miocardio (IAM) como angina inestable, insuficiencia cardíaca congestiva y daño isquémico debido a cirugía de bypass de arteria coronaria.⁴ Debido a su alta especificidad y sensibilidad en el tejido miocardial, la Troponina I se ha convertido recientemente en el biomarcador preferido para el infarto de miocardio.⁵ completa/suero/plasma) es una prueba simple que utiliza una combinación de partículas recubiertas con anticuerpos anti-tnic y reactivo de captura para detectar TnIc en sangre completa, suero o plasma. El nivel mínimo de detección es 0.5 ng/ml. PRINCIPIO completa/suero/plasma) es un inmunoensayo cualitativo basado en una membrana para la detección de Troponina I cardíaca (TnIc) en sangre completa, suero o plasma. En este procedimiento de prueba, el reactivo de captura se inmoviliza en la región de línea de prueba. Después de que la muestra se agrega al área de muestra del cassette, reacciona con partículas de oro coloidal recubiertas con anticuerpos anti-tnic en la prueba. Esta mezcla migra cromatograficamente a lo largo de la prueba e interactúa con el reactivo de captura inmovilizado. El formato de prueba puede detectar Troponina I cardíaca (TnIc) en muestras. La muestra contiene Troponina I cardíaca (TnIc), aparecerá una línea coloreada en la región de la línea de prueba, lo que indica un resultado positivo. Si la muestra no contiene Troponina I cardíaca (TnIc), la línea coloreada no aparecerá en esta región, lo que indica un resultado negativo. Para servir como un control de procedimiento, siempre aparecerá una línea coloreada en la región de línea de control, lo que indica que se ha agregado el volumen adecuado de muestra y se ha producido la absorción de la membrana.
3 REACTIVOS completa/suero/plasma) contiene partículas de oro coloidal recubiertas con anticuerpos anti-tnic y un reactivo de captura recubierto en la membrana, 0.03% de Proclin 300. PRECAUCIONES Sólo para uso diagnóstico profesional in vitro. No usar después de la fecha de vencimiento. No comer, beber ni fumar en el área donde se manipulan las muestras o los kits. No usar la prueba si el envoltorio está dañado. Manejar todas las muestras como si contuvieran agentes infecciosos. Observar las precauciones establecidas contra los riesgos microbiológicos en todos los procedimientos y seguir los protocolos estándar para la eliminación adecuada de las muestras. Usar ropa protectora, como batas de laboratorio, guantes desechables y protección ocular cuando se analicen las muestras. La prueba utilizada debe desecharse de acuerdo con las regulaciones locales. La humedad y la temperatura pueden afectar negativamente los resultados. ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD Almacenar sellado a temperatura ambiente o refrigerado (2 30 C). La prueba es estable hasta la fecha de vencimiento impresa en el envoltorio sellado. La prueba debe permanecer en el envoltorio sellado hasta su uso. NO CONGELAR. No utilizar después de la fecha de vencimiento. RECOLECCIÓN Y PREPARACIÓN DE LA MUESTRA completa/suero/plasma) puede utilizarse usando sangre completa (venopunción o punción capilar), suero o plasma. Para la recolección de muestra de sangre completa por punción capilar: o Lave la mano del paciente con agua tibia y jabón o limpie con algodón con alcohol. Dejar secar. o Masajear la mano sin tocar el sitio de punción frotando la mano hacia la punta del dedo medio o anular.
4 o Puncionar en la piel con una lanceta estéril. Limpiar el primer signo de sangre. o Frotar suavemente la mano desde la muñeca a la palma y el dedo para formar una gota redonda de sangre sobre el sitio de la punción. o Agregue la muestra de sangre completa por punción capilar a la prueba mediante el uso de un tubo capilar: Toque el extremo del tubo capilar con la sangre hasta que se llene aproximadamente 75 µl. Evitar las burbujas de aire. Colocar la pipeta en el extremo superior del tubo capilar, luego apretar la pipeta para dispensar la sangre completa al área de muestra del cassette de prueba. Separar suero o plasma de la sangre lo antes posible para evitar la hemólisis. Usar solo muestras claras no hemolizadas. Las pruebas se deben realizar inmediatamente después de que se hayan recolectado las muestras. No dejar las muestras a temperatura ambiente durante períodos prolongados. Las muestras de suero y plasma pueden ser almacenadas a 2 8 C hasta 3 días. Para almacenar a largo plazo, las muestras deben mantenerse por debajo los -20 C. La sangre completa recolectada mediante venopunción deben almacenarse a 2 8 C si la prueba se realizará dentro de 2 días de la recolección. No congelar las muestras de sangre completa. La sangre completa recolectada por punción capilar debe ser analizada inmediatamente. Poner las muestras a temperatura ambiente antes de realizar la prueba. Las muestras congeladas deben descongelarse completamente y mezclarse bien antes de realizar la prueba. Las muestras no deben congelarse y descongelarse repetidamente. Si se deben enviar muestras, deben embalarse de acuerdo con las regulaciones locales que cubren el transporte de agentes etiológicos. MATERIALES Materiales proporcionados Cassette de prueba Pipeta Buffer Inserto Materiales requeridos pero no proporcionados Contenedor de recolección de muestra Centrífuga Temporizador Para punción capilar de sangre completa
5 Lancetas Tubos capilares heparinizados y pipeta desechable PROCEDIMIENTO DE PRUEBA Permitir que la prueba, la muestra, el buffer y/o los controles alcancen la temperatura ambiente (15 30 C) antes de realizar la prueba. 1. Poner el envoltorio a temperatura ambiente antes de abrir. Retirar el cassette de prueba del envoltorio sellado y usar lo antes posible. 2. Colocar el cassette en una superficie limpia y nivelada. Para muestras de Suero o Plasma: Sostener la pipeta verticalmente y transferir 2 gotas de suero o plasma (aproximadamente 50 µl) al área de muestra, después agregar 1 gota de buffer (aproximadamente 40 µl) y encender el temporizador. Ver la ilustración a continuación. Para muestras de Sangre Completa por Venopunción: Sostener la pipeta verticalmente y transferir 3 gotas de sangre completa (aproximadamente 75 µl) al área de muestra, después agregar 1 gota de buffer (aproximadamente 40 µl) y encender el temporizador. Ver la ilustración a continuación. Para muestras de Sangre Completa por Punción Capilar: Para usar un tubo capilar: llenar el tubo capilar y transferir aproximadamente 75 µl de muestra de sangre completa por punción capilar al área de muestra del cassette de prueba, después agregar 1 gota de buffer (aproximadamente 40 µl) y encender el temporizador. Ver la ilustración a continuación. 3. Esperar a que aparezcan la línea(s). Leer los resultados a los 10 minutos. No interpretar los resultados después de 20 minutos.
6 INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS (Por favor consultar la ilustración de arriba) POSITIVO:* Aparecen dos líneas. Una línea coloreada debe estar en la región de control (C) y la otra línea aparentemente coloreada debe estar en la región de línea de prueba (T). *NOTA: la intensidad de color en la región de línea de prueba (T) variará dependiendo de la concentración de Troponina I cardíaca (TnIc) presente en la muestra. Por lo tanto, cualquier tono de color en la región de línea de prueba (T) debe considerarse positivo. NEGATIVO: Aparece 1 línea coloreada en la región de control (C). No aparece ninguna línea coloreada en la región de línea de prueba (T). INVALIDO: La línea de control no aparece. El volumen de muestra es insuficiente o las técnicas de procedimiento son incorrectas son las razones más probables para la falla en la línea de control. Revisar el procedimiento y repetir la prueba con un cassette de prueba nuevo. Si el problema persiste, suspender el uso del kit de prueba inmediatamente y contactar a su distribuidor local. CONTROL DE CALIDAD Se incluye un control de procedimiento en la prueba. Una línea coloreada que aparece en la región de control (C) se considera un control de procedimiento interno. Confirma un volumen de muestra suficiente, una membrana que absorbe adecuadamente y correcta técnica de procedimiento. No se proporciona control estándar con este kit; sin embargo, se recomienda que los controles positivos y negativos se prueben como una buena práctica de
7 laboratorio para confirmar el procedimiento y verificar el rendimiento adecuado de la prueba. LIMITACIONES 1. completa/suero/plasma) es solo para uso diagnóstico in vitro. La prueba solo debe usarse para la detección de Troponina I en muestras de sangre completa, suero o plasma. Ni el valor cuantitativo ni la tasa de incremento de TnIc se pueden determinar mediante esta prueba cualitativa. 2. completa/suero/plasma) solo indica el nivel cualitativo de TnIc en la muestra y no debe utilizarse como único criterio para el diagnóstico de infarto al miocardio. 3. completa/suero/plasma) no puede detectar menos de 0.5 ng/ml de TnIc en muestras. Si en cualquier momento se obtiene un resultado negativo, no se excluye la posibilidad de infarto al miocardio. 4. Al igual que con todas las pruebas de diagnóstico, todos los resultados deben ser interpretados junto con otra información clínica disponible para el médico. 5. Algunas muestras que contienen títulos inusualmente altos de anticuerpos heterófilos o factor reumatoide (FR) pueden afectar los resultados esperados. Incluso si los resultados de la prueba son positivos, se debe considerar una evaluación clínica adicional con otra información clínica disponible para el médico. 6. Existe una ligera posibilidad de que algunas muestras de sangre completa con alta viscosidad o que se hayan almacenado durante más de 2 días, no funcionen correctamente en el cassette de prueba. Repetir la prueba con una muestra de suero o plasma del mismo paciente usando un nuevo cassette de prueba. VALORES ESPERADOS completa/suero/plasma) ha sido comparada con una prueba líder comercial de EIA TnIc que demuestra una precisión global del 98.8%. CARACTERÍSTICAS DE PRESENTACIÓN Sensibilidad y Especificidad completa/suero/plasma) ha sido evaluado con una prueba líder comercial de EIA TnIc utilizando muestras clínicas. Los resultados muestran que la sensibilidad de la prueba rápida en cassette Troponina I ACCU-TELL (Sangre completa/suero/plasma) es de 98.8% y la especificidad es de 98.9% relativa a la prueba líder comercial de EIA.
8 Prueba Rápida Troponina I cardíaca vs. EIA Método EIA Resultados ACCU- Resultados Positivo Negativo Totales TELL Prueba Positivo Rápida en Cassette Troponina I (Sangre Negativo Total / Suero / Plasma) Resultados Totales Sensibilidad Relativa: 158/160 = 98.8% (95% IC*: 95.6% %) Especificidad Relativa: 603/610 = 98.9% (95% IC*: 97.7% %) Precisión: ( )/( ) = 98.8% (95% IC*: 97.8% %) *Intervalo de Confianza PRECISIÓN Intra Ensayo La precisión interna se ha determinado mediante el uso de 15 repeticiones de cinco muestras: una negativa, positiva de TnIc 1.0 ng/ml, positiva de TnIc 5.0 ng/ml, positiva de TnIc 10 ng/ml y positiva de TnIc 40 ng/ml. La negativa, positiva de TnIc 1.0 ng/ml, positiva de TnIc 5.0 ng/ml, positiva de TnIc 10 ng/ml y positiva de TnIc 40 ng/ml fueron identificadas correctamente >99% de las veces. Inter Ensayo La precisión entre corridas se ha determinado mediante 15 ensayos independientes en las mismas cinco muestras: una negativa, positiva de TnIc 1.0 ng/ml, positiva de TnIc 5.0 ng/ml, positiva de TnIc 10 ng/ml y positiva de TnIc 40 ng/ml. Se probaron tres lotes diferentes de la prueba rápida en cassette Troponina I ACCU-TELL (Sangre completa/suero/plasma) durante un periodo de 3 días usando muestras negativa, positiva de TnIc 1.0 ng/ml, positiva de TnIc 5.0 ng/ml, positiva de TnIc 10 ng/ml y positiva de TnIc 40 ng/ml. Las muestras fueron identificadas correctamente >99% de las veces Reactividad cruzada completa/suero/plasma) ha sido probada con muestras positivas de 10,000 ng/ml de Troponina I Esquelética, 2,000 ng/ml de Troponina T, 20,000 ng/ml de Miosina Cardíaca, HBsAg, HBsAb, HBeAg, HBeAb, HBcAb, sífilis, anti-vih, anti-h.pylori, MONO, anti-cmv, anti-rubéola y anti-toxoplasmosis. Los resultados no mostraron reactividad cruzada.
9 Sustancias Interferentes Las siguientes sustancias potencialmente interferentes se agregaron a TnIc, muestras negativas y positivas, respectivamente Acetaminofeno: 20 mg/dl Cafeína: 20 mg/dl Ácido Acetilsalicílico: 20 mg/dl Ácido Gentílico: 20 mg/dl Ácido Ascórbico: 20 mg/dl Albúmina: 10,500 mg/dl Creatinina: 200 mg/dl Hemoglobina: 1,000 mg/dl Bilirrubina: 1,000 mg/dl Ácido Oxálico: 600 mg/dl Colesterol: 800 mg/dl Triglicéridos: 1,600 mg/dl Ninguna de las sustancias en las concentraciones probadas interfirió en el ensayo. Bibliografía 1. Adams, et al. Biochemical Markers of myocardial injury, Immunoassay Circulation 88: , Mehegan JP, Tobacman LS. Cooperative interaction between tropin molecules bound to the cardiac thin filament. J.Biol.Chem. 266:966, Adams, et al. Diagnosis of Perioperative myocardial infarction with measurements of cardiac tropinin I. N.Eng.J.Med 330:670, Hossein-Nia M, et al. Cardiac tropinin I release in heart transplantation. Ann. Thorac. Surg. 61:227, Alpert JS, et al. Myocardial Infarction Redefined, Joint European Society of Cardiology American College of Cardiology: J. Am. Coll. Cardio., 36(3):959, 2000.
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