AMPLIACIÓN BIOLOGÍA 4º ESO Taller Biología 4º E.S.O. BLOQUE 8. GENÉTICA PRÁCTICA 2 EXTRACCIÓN DE ADN INTRODUCCIÓN El ácido desoxirribonucleico, frecuentemente abreviado como ADN (y también DNA, del inglés DeoxyriboNucleic Acid), es un tipo de ácido nucleico, una macromolécula que forma parte de todas las células. Contiene la información genética usada en el desarrollo y el funcionamiento de los organismos vivos conocidos y de algunos virus, siendo el responsable de su transmisión hereditaria. Desde el punto de vista químico, el ADN es un polímero de nucleótidos, es 5
DEPTO. BIOLOGÍA-GEOLOGÍA. IES CEUTÍ. decir, un polinucleótido. Un polímero es un compuesto formado por muchas unidades simples conectadas entre sí, como si fuera un largo tren formado por vagones. En el ADN, cada vagón es un núcleotido, y cada nucleótido, a su vez, está formado por un azúcar (la desoxirribosa), una base nitrogenada (que puede ser adenina A, timina T, citosina C o guanina G) y un grupo fosfato que actúa como enganche de cada vagón con el siguiente. Lo que distingue a un vagón (nucleótido) de otro es, entonces, la base nitrogenada, y por ello la secuencia del ADN se especifica nombrando sólo la secuencia de sus bases. La disposición secuencial de estas cuatro bases a lo largo de la cadena (el ordenamiento de los cuatro tipos de vagones a lo largo de todo el tren) es la que codifica la información genética: por ejemplo, una secuencia de ADN puede ser ATGCTAGATCGC... En los organismos vivos, el ADN se presenta como una doble cadena de nucleótidos, en la que las dos hebras están unidas entre sí por unas conexiones denominadas puentes de hidrógeno. (entrada ADN de la Wikipedia) OBJETIVOS. 1. Extraer ADN de organismos diferentes. 2. Interpretar los diferentes pasos del desarrollo de la práctica. MÉTODO 1: EXTRACCIÓN A PARTIR DE FRESAS O GUISANTES. MATERIAL. Fresas, guisantes, otros Batidora o licuadora, colador Sal de mesa Agua fría Detergente casero Enzimas (zumo piña, papaya o ablandador de carne) Alcohol isopropílico 80% o etílico Tubos de ensayo Palillos y algodón DESARROLLO DE LA PRÁCTICA. 1. Con la ayuda de la batidora o de la licuadora hay que conseguir un batido de guisantes (usa el doble de agua fría que de guisantes: 100ml de 6
AMPLIACIÓN BIOLOGÍA 4º ESO guisantes/200ml de agua). 2. Vierte el batido a través de un colador en un vaso de precipitados. 3. Añade media cucharada de sal común. Mezclar bien. 4. Añade 30 ml de detergente (un par de cucharadas soperas), mezcla bien y deja reposar 5 minutos. 5. Reparte la mezcla en tubos de ensayo. No los llenes más de un tercio de su capacidad. 6. Añade a los tubos un pellizco de enzimas (reblandecedor de carne o zumo de papaya o piña, incluso nos vale un líquido limpiador de lentes de contacto). Agita con suavidad. 7. Inclina los tubos de ensayo y vierte alcohol en ellos dejándolo resbalar lentamente por la pared lateral hasta tener partes iguales de alcohol y de la mezcla. 7
DEPTO. BIOLOGÍA-GEOLOGÍA. IES CEUTÍ. 8. Cuando se hayan formado grumos en la parte superior del tubo introduce un palillo y extrae la masa filamentosa de ADN. MÉTODO 2: EXTRACCIÓN DE TU PROPIO ADN. MATERIAL. Vaso y cucharillas de plástico desechables Disolución de sal de mesa al 6% (una cucharada en un tazón de agua) Disolución de lavavajilas no concentrado al 25% en agua Enzimas (zumo piña, papaya o ablandador de carne) Alcohol etílico de 96º muy frío (metido en cubitos de hielo) Tubos de ensayo y gradilla Varilla fina de vidrio o palillo de barbacoa 8
AMPLIACIÓN BIOLOGÍA 4º ESO DESARROLLO DE LA PRÁCTICA 1. Vertemos una cucharada de agua en un vaso. 2. Nos enjuagamos la boca durante medio minuto y la devolvemos al vaso (sin echar saliva). 3. Añadimos una cucharada sopera de la disolución de sal y otra de la solución de lavavajillas. Mezclamos bien y vertemos la mezcla en un tubo de ensayo. 4. Con el tubo inclinado dejamos resbalar por su pared, con mucho cuidado, una cucharada de alcohol muy frío que debe quedarse flotando sobre la solución acuosa. 5. Dejamos reposar durante unos minutos hasta que aparezcan unas burbujitas en la superficie que separa los dos líquidos. 6. Sumergimos la varilla hasta que roce el límite entre las dos capas y la hacemos girar, siempre en la misma dirección y sin rozar las paredes del tubo, para recoger las hebras de ADN. 9
DEPTO. BIOLOGÍA-GEOLOGÍA. IES CEUTÍ. RESULTADOS Y CUESTIONES. 1. Crees que es necesario añadir una mezcla de agua y sal al batido?, qué conseguimos con eso? 2. Para qué utilizamos el detergente? 3. Qué se consigue al añadir enzimas?, por cierto, qué es una enzima? 4. Qué conseguimos al emplear el alcohol? EN CASA Te proponemos pensar en casa un poco sobre la práctica que has realizado, podemos extraer ADN de otras fuentes?, cuáles producen más ADN?, Todos los detergentes hacen el mismo efecto?, podemos extraer el ADN cambiando los pasos o eliminando alguno de ellos? Prueba en casa (todos los materiales utilizados están a tu disposición en casa si cambias los tubos de ensayo por algún otro contenedor estrecho: vasos de chupitos o algo así) a experimentar diversas situaciones y presenta un informe con tus conclusiones. 10