Principales tipos de ARN producidos en las Células

Transcripción

1 Víctor Hugo Casco

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3 Principales tipos de ARN producidos en las Células Tipo de ARN ARN mensajero ARN ribosomal ARN de transferencia ARNs pequeños nucleares ARNs pequeños nucleolares Otros ARNs no codificantes Función Código para la síntesis de proteínas Forma la estructura básica de los ribosomas y cataliza la síntesis de proteínas Centrales para la síntesis de proteínas como adaptadores entre el ARNm y los aminoácidos Funcionan en una variedad de procesos nucleares, incluyendo el splicing de pre-arnm Usados para procesar y modificar químicamente ARNrs Actúan en diversos procesos celulares, incluyendo la síntesis de los ARNs de la síntesis de telómeros, inactivación del cromosoma-x, transporte de proteínas hacia el RER.

4 ARN polimerasa de E. coli ω

5 ARN polimerasa de E. coli β β ω

6 Transcripción por la ARN polimerasa de E. coli

7 Terminación de la Transcripción ADN ARN Formación del stem loop Disociación del ARN a partir de molde de ADN Repetición rica en GC - invertida ADN

8 Control negativo del operón lac

9 Control positivo del operón lac por glucosa Proteína activadora de genes catabólicos

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11 Separación e identificación de las tres ARN polimerasas eucariontes Experimento usando - amanitina (octapéptido de acción diferencial) Polimerasa I: nucleolar (pre-arnrs) Polimerasa II: ARNm y cuatro ARNnps Polimerasa III: ARNts, ARNr 5,S y ARNp estables (U6, S7)

12 En eucariotas ARN que transcribe cada ARN Polimerasa también es diferente ARN polimerasa I produce pre-arn ribosómico (pre-arnr) 18S, 5.8S y 28S ARN polimerasa II produce pre-arn mensajero (pre- ARNm) y ARN pequeño nuclear (ARNsn) ARN polimerasa III produce el pre-arn de transferencia (pre-arnt), ARNr 5S y otros ARNsn ARN polimerasa mitocondrial produce el ARN mitocondrial

13 Comparación de las subunidades de las ARN polimerasas de las Levaduras con las de E. coli

14 ARN polimerasa II holoenzima La holoenzima consiste de un complejo preformado de ARN Polimerasa II, los factores de transcripción generales: TFIIB, TFIIE, TFIIF, and TFIIH, y otras proteínas que activan la transcripción Este complejo puede ser reclutado directamente a un promotor vía la interacción con TFIID (TBP + TAFs).

15 Complejo de Iniciación de la Polimerasa II y factores de transcripción generales aislados

16 Complejos ARN polimerasa - mediador

17 Iniciación de la transcripción del ADNr

18 Transcripción de los genes de la polimerasa III

19 Un promotor eucariótico típico Ejemplo del promotor del gen de timidina-quinasa del gen de virus herpes simple contiene tres elementos de secuencias corriente arriba de la caja TATA que son requeridos para una transcripción eficiente: una caja CCAAT y dos cajas GC (secuencias consensa GGGCGG).

20 El amplificador SV40 El promotor de SV40 para la expresión de genes de expresión temprana contiene una caja TATA y seis cajas GC agrupadas en tres conjuntos de secuencias repetidas. Adicionalmente, la transcripción eficiente requiere de un amplificador corriente arriba consistente de dos repeticiones de 72 pares de bases

21 Acción de los amplificadores Sin un amplificador, el gen es transcripto a un bajo nivel basal (A). La adición de un amplificador E para el ejemplo del SV40 las repeticiones de 72-pares de bases estimula la transcripción. El amplificador es activo no sólo cuando se lo coloca muy próximo corriente arriba sino (B), sino que también lo hace cuando se lo ubica varias kilobases corriente arriba o abajo (C y D). Adicionalmente los amplificadores son activos tanto en orientación forward o backward (E).

22 Torsión del ADN

23 Secuencias reguladoras de genes ADN espaciador Proteínas reguladoras de genes Factores generales de transcripción ARN polimerasa Corriente abajo Caja TATA Promotor Comienzo de la transcripción

24 Las distintas etapas en el metabolismo del ARNm pueden ser reguladas ADN Núcleo Citosol Control de la Degradación del ARN ARNm Transcripto primario ARNm ARNm ARNm inactivo Control transcripcional Control del procesamiento del ARNm Control del transporte del ARNm Control de la traducción Control de la actividad proteica Proteína Proteína Inactiva

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27 Splicing El proceso consiste en el corte de los intrones y empalme de los exones

28 Splicing

29 Formación del extremo 3 de ARNms eucariotas