EFECTO DE LA APLICACIÓN DE GNRH EN DIFERENTES HORARIOS DE IATF (48hs vs.54hs.) EN VACAS CRUZA CEBÚ CON CRIA AL PIE SOBRE LOS PORCENTAJES DE PREÑEZ

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1 UNIVERSIDAD NACIONAL DE CORDOBA FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS ESCUELA PARA GRADUADOS INSTITUTO DE REPRODUCCION ANIMAL CORDOBA (IRAC) ESPECIALIZACIÓN EN REPRODUCIÓN BOVINA EFECTO DE LA APLICACIÓN DE GNRH EN DIFERENTES HORARIOS DE IATF (48hs vs.54hs.) EN VACAS CRUZA CEBÚ CON CRIA AL PIE SOBRE LOS PORCENTAJES DE PREÑEZ M.V. ARIEL MASSAD M.V. RAUL INFANTE M.V. JAVIER MENDOZA CÓRDOBA,

2 AGRADECIMIENTOS -A la empresa QUITILIPI TELEVISORA COLOR Sociedad de Responsabilidad Limitada, propietaria del establecimiento, a todo el personal, y en especial a Claudio y Don Coco De Langhe, por participar y apoyar este trabajo apostando constantemente a las biotecnologías para hacer mas eficiente nuestra ganadería. -A los doctores Juan José Vallejos y Hernán Trejo por su aporte a este trabajo, excelentes profesionales, pero por sobre todo, mejores personas. -A Lucas Cutaia y Nicolás Zabala por su apoyo incondicional y su predisposición a todos los detalles para la realización del trabajo. -A todos los integrantes del IRAC que, con humildad y valor humano nos forman y actualizan constantemente en las biotecnologías reproductivas. -A toda la familia y los amigos. 2

3 INTRODUCCIÓN La optimización de la eficiencia reproductiva es uno de los principales factores que contribuyen a mejorar el retorno económico de una explotación ganadera. Sin lugar a dudas la tasa de preñez y sobre todo su distribución, tienen un impacto muy importante sobre la ecuación económica de un establecimiento dedicado a la cría. Lograr un ternero por vaca y por año en un sistema de producción, significa que, restando a los 365 días del año, 283 del periodo de gestación, las hembras deberían estar nuevamente preñadas a los 82 días de paridas (Bo et al., 2005). Numerosos factores han hecho que la inseminación artificial a tiempo fijo (IATF) se haya expandido en la industria de bovinos de carne en los últimos 15 años. El incremento en el uso de la IA a través de la implementación de programas de IATF maximiza la incorporación de animales de alta genética al rodeo. Así mismo, se puede observar una reducción en la duración de la temporada de servicio y se evitan los costos asociados con la detección del estro. (Cruppe, L.H, Michael y L. Day.2011). Para la realización del presente trabajo, se hace un breve comentario sobre como actúan los estrógenos y GnRH (hormona liberadora de gonadotrofinas) en el proceso de ovulación y los trabajos tomados como referencia para realizar la experiencia. Los fármacos utilizados para inducir ovulación sincrónica actúan por retroalimentación positiva sobre la liberación pulsátil de LH (estrógenos o GnRH).El estradiol desencadena la secreción preovulatoria de LH aumentando la sensibilidad hipofisiaria al estimulo de la GnRH, aumenta el numero de receptores para GnRH en las células hipofisiarias, estimula la biosíntesis de gonadotrofinas, dado el incremento que se observa en el contenido de ARNm para estas hormonas previo y durante la descarga de LH, aumenta el efecto preparador de la GnRH, esto es el proceso mediante el cual la GnRH incrementa la respuesta hipofisiaria a exposiciones sucesivas de la hormona y establece un mecanismo a nivel hipotalámico que 3

4 culmina en la liberación de una descarga de GnRH, que a su vez induce el pico preovulatorio de gonadotrofinas. Las funciones principales de la LH son la maduración folicular final, la activación del ovocito para que continúe la meiosis (se encuentra en profase 1, ovocito1) y el mantenimiento del Cl (Cuerpo Lúteo). (IRAC, 2008) La GnRH y sus agonistas han estado comercialmente disponibles en el mercado por casi 20 años. Al principio, la GnRH fue usada solamente para el tratamiento de la degeneración quística folicular en la vaca. Mas tarde, se la utilizó en la sincronización de la ovulación en vacas repetidoras. (IRAC, 2008). En el caso de la administración de GnRH el intervalo entre la administración y la ocurrencia de ovulación es de 26 a 30 horas. Los agonistas de la GnRH son sustancias con mayor afinidad que la GnRH endógena por sus propios receptores en la adenohipofisis, y a los cuales permanecen unidos más tiempo, estimulando su actividad fisiológica; tienen una vida media prolongada, lo que los hace mas potente que la GnRH endógena (López Landa, 2009) En un primer estudio hecho en Brasil, se demostró que es posible obtener tasas similares de preñez utilizando BE (benzoato de estradiol) 4 manejos y utilizando GnRH o Hcg (3 manejos) como inductores de ovulación. Pero el inconveniente que se presenta es el costo de la GnRh o Hcg en comparación con los estrógenos. (Sa Filho et al., 2011) En un ensayo realizado sobre 156 vacas Aberdeen Angus, el grupo al que se aplicó Acetato de Buserelina (Análogo sintético de GnRH) al momento de la IATF, como segundo inductor de ovulación, se lograron diferencias significativas en las preñeces a favor del grupo Acetato de Buserelina (52%) sobre el grupo control (32%).(Chesta, P y Becker, B., 2012). En otros trabajos hechos con parches de pintura, colocados en la base de la cola, al realizar el retiro de los dispositivos intravaginales, permitía identificar así las vacas que se desvían del protocolo de IATF, donde no hay detección visual de celos, ya que son estas las que 4

5 permanecen sin despintar los parches, cuando pasan por la manga, al momento de realizar la IATF. Se utilizó Licerelina (análogo sintético de GnRH) mejorando así la fertilidad de las vacas que permanecían (DMN -sin despintar), lo que sugiere un incremento en la tasa de ovulación que podría estar desfasada en este grupo (López Del Cerro et al., 2011). Habiéndose realizado trabajos experimentales, en los cuales se llevó a cabo la detección de celos posteriores a la IATF, se logró mejorar la preñez del protocolo, indicando que una proporción de las hembras sufrieron un atraso en la sincronización del proceso celoovulación, con estos datos obtenidos habría que realizar trabajos con aplicación de GnRH para inducir ovulación en las hembras que presentan los detectores de monta negativos, para así mejorar la fertilidad en los protocolos. (Scándolo et al., 2011). Se toman como referencia, los últimos trabajos realizados (Zabala et al., 2011), en los cuales se concluye que al momento de la IATF (48hs Vs 54hs), en vacas cruza cebú con cría al pie, tratadas con dispositivos que contienen 0,5 gramos de P4 y combinando con Ecg y cipionato de estradiol como inductor de la ovulación, llevan como resultado la no afectación en el porcentaje de preñez final. De esta manera se logra visualizar en el desarrollo del trabajo, el objetivo del mismo, que consiste en evaluar el efecto de la aplicación de GnRH como segundo inductor de ovulación, al momento de realizar la IATF, sobre los porcentajes de preñez, en dos horarios de IATF (48hs Vs. 54hs). 5

6 MATERIALES Y METODOS El trabajo se realizó en el establecimiento María Herminia ubicado a 12 Km de la localidad de Pampa del Indio, Departamento San Martin, Provincia de Chaco. Realizado el mismo en el mes de diciembre, en el cual se utilizaron 128 vacas cruza Índica, la mayoría Brangus, con cría al pie de 4 y 5 partos (50 y 60 días de nacidos los terneros) foto1. Con un 46,1% de ciclicidad y una condición corporal al inicio del tratamiento en promedio entre 4 y 5 (escala 1 al 9), foto 2. Se realizó un pre servicio y se estableció el grado de estatus ovárico en cuerpo lúteo, folículos y ovarios sin estructura. Todas las vacas recibieron en el día 0, un dispositivo intravaginal liberador de progesterona, (Dib 0,5; 0,5 gramos de P4; Syntex S.A., Argentina) y 2 miligramos de benzoato de estradiol (Eb; Syntex S.A).En el día 8 se retiraron los Dib y se les aplicaron 500 microgramos de Cloprostenol sódico (Ciclase Dl, Syntex) junto a 400 unidades internacionales de Ecg (Gonadotrofina Coriónica Equina) (Novormon, Syntex) mas 0,5 miligramos de cipionato de estradiol (CE; Cipiosyn, Syntex). A partir de ese momento los animales fueron divididos al azar para la IATF. Al momento de realizar la IATF se utilizaron tres toros de fertilidad probada (mas de 70 % de espermatozoides normales y mas de 25% de motilidad progresiva con vigor 3 a la hora 0 de descongelado). (IRAC,2009) Posteriormente se formaron cuatro grupos al azar en un diseño de 2 x 2 factorial. Un grupo se inseminó a las 48hs, con un total de 65 vacas, las cuales a su vez se subdividieron para recibir o no 100 microgramos de Gonadorelina Acetato (Análogo sintético de GnRH) (Gonasyn GRD; Syintex S.A.).Otro grupo de 63 vacas se inseminó a las 54hs, y también fueron subdivididas para recibir o no 100 microgramos de Gonadorelina Acetato (Gonasyn GRD; Syntex S.A.). 6

7 Foto 1: Terneros con 50 a 60 días de nacidos al momento de la IATF 7

8 Foto 2: Condición corporal 4 a 5 de promedio al inicio del protocolo (escala de 1 a 9) 8

9 RESULTADOS ULTRASONOGRAFIA Todas las vacas fueron examinadas por ultrasonografía transrectal (Chison D 600 con transductor 5.0 MHz) el día 0 del tratamiento para evaluar ciclicidad, los diagnósticos de preñez, fueron realizados por ultrasonografía a los 32 días de la IATF. ANALISIS ESTADISTICO Para evaluar el efecto de la aplicación de GnRH sobre la preñez en los diferentes horarios se realizó un análisis por medio de tablas de contingencias. Tabla n 1: Porcentajes de preñez con aplicación de GnRH en dos horario de IATF (48hs Vs. 54hs) Preñadas Vacías 48 GnRH ,67% A 48 NO ,33% Ab 54 GnRH ,67% B 54 NO ,58% B P=0,08 Se observa que el grupo Ab tuvo una diferencia significativa sobre la preñez del grupo A. Y que en el grupo B, se observa un mayor porcentaje de preñez, pero entre estos grupos la diferencia no es significativa. 9

10 Fig.1: Se observa que la aplicación de GnRH a las 48hs presentó menor tasa de preñez. No así cuando fue aplicada a las 54 Hs en la cual la diferencia no es significativa. 10

11 DISCUSIÓN Sobre los resultados obtenidos y en las condiciones bajo la cual se llevó a cabo el ensayo, se había planteado que, el uso de GnRH como segundo inductor de ovulación al momento de la IATF, sumada a las ventajas de inducir ovulación con estrógenos, mejoraría los resultados en los porcentajes de preñez, sobre las vacas que se desvían del protocolo al momento de la sincronización de ovulación. Con estos datos preliminares, no se justificaría el costo adicional que genera la utilización de análogos sintéticos de GnRH como segundo inductor de ovulación, cuando se la aplica para IATF a las 48hs de retirado los dispositivos intravaginales. Habría que incluir lotes mas numerosos en futuros trabajos, para aseverar así, que la aplicación de GnRH al momento de la IATF, en vacas cruza índica con cría al pie, no mejora los porcentajes de preñez, cuando se insemina a las 48hs, como sí se logra en las razas británicas,(aberdeen Angus )tal cual citamos en la introducción. 11

12 CONCLUSIÓN De esta manera se concluye que la aplicación de GnRH como segundo inductor de ovulación, al momento de la IATF, presenta menores porcentajes de preñez cuando se utiliza a las 48 HS de retirado el dispositivo de progesterona, difiriendo así, de los resultados observados en trabajos hechos con vacas de razas británicas, y en la cual, el costo adicional que se genera en el protocolo, se justifica en una diferencia significativa, sobre los porcentajes de preñez obtenidos, significando un retorno económico al rodeo de cría. 12

13 BIBLIOGRAFIA: Bo, G.; Cutaia, L.; Chesta, P.; Balla, E.; Pincinato, E.; Peres, L.; Maraña, D.; Aviles, M.; Menchaca, A.; Venerada, G.; Baruselli, P.2005.Implementacion de Programa de Inseminación Artificial en Rodeos de Cría de Argentina.VI Simposio Internacional de Reproducción Animal, Córdoba, Argentina. Tomo I, pp Chesta, P., Becker, B., Utilización de Buserelina Zoovet al momento de la inseminación en protocolos de IATF. Boletín informativo trimestral, septiembre, octubre, noviembre Cruppe, L.H; Michael, L.Day Maximización de las tasas de preñez con inseminación artificial a tiempo fijo con el programa Co-Synch CIDER de 5 días. IX Simposio internacional de reproducción animal, Córdoba, Argentina, p.193. Irac Fisiología de la reproducción de la vaca. Unidad 2. Irac Sincronización de celos e inseminación artificial p 73. Irac Evaluación de toros y calidad seminal p

14 La hormona liberadora de gonadotrofinas GnRh y su papel en la reproducción bovina. Lopez del Cerro, P.; Scándolo, D.G; Vanzetti, L.; Cuatrín, A.; Scándolo, D.; Maciel. M Efecto de la aplicación de licerelina en la fertilidad de vaquillas braford que no manifiestan celo previo a la IATF. Sá Filho, M.; Sales, J.; Baruselli, P Actualización de protocolos de IATF en hembras bovinas de carne. IX Simposio Internacional De Reproducción Animal. Córdoba, Argentina, p.168. Sá Filho, M.; Sales, J.; Baruselli, P Actualización de protocolos de IATF en hembras bovinas de carne. IX Simposio Internacional De Reproducción Animal. Córdoba, Argentina, p.170. Scandolo, D.G.; Scandolo, D.; Vottero D.; Cuatrín. A.; Maciel. M Relación entre la presencia de celo y la preñez en un protocolo de sincronización de ovulación. Zabala, N.; Repiso, G.; López, A.; Cutaia, L Efecto del momento de la IATF (48 VS. 54h) en vacas cruza cebú con cría al pie tratadas con dispositivos con 0,5 g de progesterona y cipionato de estradiol sobre los porcentajes de preñez. IX simposio internacional de reproducción animal, Córdoba, Argentina 2011.p