PRAC TICA DE LABO RATO RIO: GRUP OS SANG UINEO S

Transcripción

1 PRAC TICA DE LABO RATO RIO: GRUP OS SANG UINEO S 1.- INTRODUCCION: La determinación del grupo sanguíneo es una práctica habitual e imprescindible para la transfusión de componente hemáticos. La razón está en que el sistema inmune de algunos individuos rechaza los hematíes de otros. Esta reacción inmunológica está mediada por anticuerpos y es fácilmente visualizarlo in vitro mediante reacciones de aglutinación. Se conocen más de 20 grupos de antígenos eritrocitarios codificados en otros tantos loci génicos, para los cuales existen múltiples variantes alélicas. El resultado son más de 200 antígenos eritrocitarios identificables. Estos antígenos varían en su inmunogenicidad. Los más importantes a efectos transfusionales son los antígenos del sistema H / ABO y los del sistema Rhesus (Rh). Los grupos sanguíneos humanos ocupan un lugar especial en la genética, en primer lugar por sus contribuciones al establecimiento de algunos principios genéticos y luego por su importancia clínica en la transfusión de sangre en obstetricia. 1 PRACTICA DE LABORATORIO-GENETICA GENERAL

2 2.- FUNDAMENTO TEORICO Se denomina antígeno a toda sustancia extraña al organismo capaz de generar anticuerpos como medida de defensa provocando una respuesta inmune. La mayoría de los antígenos son sustancias proteicas, aunque también pueden ser polisacáridos. La pared celular, la cápsula, los cilios, etc. de las bacterias pueden actuar como antígenos, igual que los virus, hongos, toxinas, el polen, sustancias químicas y partículas del aire, entre otros. La reacción antígeno-anticuerpo se produce cuando los anticuerpos, también de origen proteico, capturan a los antígenos con el fin de eliminarlos del organismo, ya sea por fagocitosis o por medio de la aglutinación. La aglutinación es una reacción que ocurre cuando las aglutininas (anticuerpos) presentes en el plasma sanguíneo se unen a los aglutinógenos (antígenos) transportados o ubicados en la superficie de los glóbulos rojos y los glóbulos blancos. Como resultado de la reacción se forman grumos y apilamientos de células sanguíneas, producto de la degradación de sus membranas celulares. Un claro ejemplo de aglutinación sucede cuando se transfunde sangre de grupos incompatibles. Los grupos sanguíneos son los distintos tipos en que se clasifica la sangre de los animales respecto de los antígenos que están naturalmente presentes en los glóbulos rojos. Están determinados por la presencia de aglutinógenos en la membrana plasmática de los glóbulos rojos que se comportan como antígenos. En los humanos existen los aglutinógenos A y B. Por otra parte, en el plasma sanguíneo se encuentran las aglutininas anti A y anti B (anticuerpos) que han de reaccionar contra los aglutinógenos. 2 PRACTICA DE LABORATORIO-GENETICA GENERAL

3 GRUPOS SANGUÍNEOS HUMANOS En la especie humana, los grupos sanguíneos son cuatro, denominándose con las letras A - B - O - AB. -Grupo A: en la membrana plasmática de los glóbulos rojos posee aglutinógenos A. En el plasma, aglutininas anti B (contra el aglutinógeno B). - Grupo B: con aglutinógenos B en los eritrocitos y aglutininas anti A (contra el aglutinógeno A) en el plasma sanguíneo. - Grupo O: este grupo carece de aglutinógenos en la superficie de sus eritrocitos. En el plasma contiene dos tipos de aglutininas, las anti A y las anti B (contra ambos tipos de aglutinógenos). - Grupo AB: a diferencia del grupo O, el grupo AB posee los dos aglutinógenos A y B en las membranas plasmáticas de los glóbulos rojos, pero carece de aglutininas plasmáticas. La mencionada clasificación deja en claro que los grupos sanguíneos se establecen de acuerdo a la presencia o no de aglutinógenos y aglutininas. Estas dos sustancias, como ya fue señalado, son moléculas de proteínas. Los individuos cuya sangre es del grupo A (proteína de membrana A) han de producir anticuerpos contra la proteína B de membrana. Los del grupo B producirán aglutininas contra el proteína A. Aquellas personas que poseen el grupo AB (aglutinógenos A y B en sus eritrocitos) no producen anticuerpos contra las proteínas A y B. Por último, los representantes del grupo O elaboran anticuerpos contra las proteínas A y B. 3 PRACTICA DE LABORATORIO-GENETICA GENERAL

4 La distribución mundial de los grupos sanguíneos indica que el grupo O es el más numeroso, mientras que el AB obtiene el menor porcentaje. Distribución de los grupos sanguíneos HERENCIA DE LOS GRUPOS SANGUÍNEOS A - B - O Se entiende por alelo a cada uno de los dos genes localizados en el mismo lugar de un par de cromosomas homólogos, y que determinan un mismo carácter. Genotipo es el conjunto de genes presentes en un organismo. 4 PRACTICA DE LABORATORIO-GENETICA GENERAL

5 Fenotipo es la manifestación física del genotipo, que en algunos casos puede ser alterada o modificada por el ambiente. Cada individuo hereda del padre y de la madre los grupos sanguíneos. Estos grupos se encuentran en genes que poseen los alelos A, B, i, donde A y B son dominantes y el alelo i es recesivo. El alelo i corresponde al O. Las personas que heredan los alelos AA o Ai (AO) tienen grupos sanguíneos A (fenotipo A), los que heredan BB o Bi (BO) serán de grupos B (fenotipo B) y aquellos que heredan los alelos ii (OO) son del grupo O (fenotipo O) ya que, como se dijo, el alelo O es recesivo. En el caso del grupo AB, al haber codominancia entre los alelos A y B, los individuos con ese grupo poseen doble fenotipo AB. La herencia de los grupos sanguíneos se detalla en la siguiente tabla. Determinación de los grupos sanguíneos A - B - O TRANSFUSIONES DE SANGRE Dos grupos de sangre serán compatibles o incompatibles de acuerdo a la presencia de aglutinógenos. La transfusión de sangre grupo A a una persona que tiene grupo B, da lugar a que las aglutininas anti A del receptor reaccionen destruyendo los eritrocitos transfundidos del dador. De acuerdo a la cantidad de sangre administrada, los efectos de la incompatibilidad van desde reacciones imperceptibles o leves hasta graves alteraciones renales, cuadros de shock y muerte. 5 PRACTICA DE LABORATORIO-GENETICA GENERAL

6 En general, cuando las transfusiones se realizan entre individuos que poseen el mismo grupo de sangre no se presentan inconvenientes. No obstante, hay grupos que pueden dar o recibir otros tipos de sangre. En la siguiente tabla se indica la compatibilidad existente entre los distintos grupos sanguíneos. FACTOR Rh Es otro aglutinógeno que está en la membrana plasmática de los glóbulos rojos. Fue descubierto en 1940 a partir de los eritrocitos del mono Macacus rhesus. El 85% de las personas poseen el factor Rh, por lo que se clasifican en este caso como Rh positivas (Rh+). El 15% restante corresponde a las personas Rh negativas (Rh-) por carecer de dicho factor. Al nacimiento, tanto las personas Rh+ como las Rh- no tienen aglutininas en el plasma sanguíneo. Solo es posible elaborarlas cuando el donante sea Rh+ y el receptor Rh-, situación posible tras una gestación o, menos probable, ante el error de transfundir sangre incompatible. En efecto, la sangre del individuo Rhno reconoce los aglutinógenos de membrana del donante Rh+, por lo que empieza a producir aglutininas anti Rh. Por el contrario, cuando el dador es Rh- no ocasiona reacciones en un receptor con factor Rh+ ya que carece de aglutinógenos. Vamos a suponer que una mujer con factor Rh- está gestando un feto con factor Rh+. Ante la posibilidad que los eritrocitos fetales tomen contacto con la sangre materna, por ejemplo, tras una caída, toma de muestras de sangre directamente 6 PRACTICA DE LABORATORIO-GENETICA GENERAL

7 del cordón umbilical, por un aborto o un examen prenatal invasivo, se producirá una reacción con producción de aglutininas maternas anti Rh y consecuente destrucción de glóbulos rojos del feto. Ello es debido a que los eritrocitos maternos consideran extraños a los eritrocitos fetales. Teniendo en cuenta que la formación de anticuerpos demanda un tiempo relativamente largo, es posible que el feto no sufra consecuencias o bien nazca de manera prematura. En estos casos, la madre quedó sensibilizada contra los aglutinógenos Rh+. Si con el tiempo sucede otro embarazo de un feto factor Rh+, los anticuerpos antes generados atraviesan la placenta para combatir los eritrocitos Rh+ fetales, ocasionando diversos trastornos que van desde una leve ictericia por aumento de bilirrubina en sangre hasta un cuadro grave de anemia por destrucción de glóbulos rojos (hemólisis) que puede ocasionar un aborto espontáneo. Esta enfermedad se conoce como eritroblastosis fetal o enfermedad hemolítica del recién nacido. El tratamiento puede realizarse en forma intrauterina (antes del nacimiento) por medio de fármacos o transfusiones de sangre a través del cordón umbilical. La forma de evitar esta enfermedad es identificar a las madres Rh- en los primeros meses del embarazo mediante un análisis de su sangre. Las que poseen dicho factor deben recibir inmunoglobulina Rh en los primeros meses del embarazo y una segunda dosis a las 72 horas de producido el parto. De esa forma se previene que los anticuerpos Rh- maternos reaccionen con las células Rh+ fetales. La mujer puede también quedar sensibilizada al momento del parto, donde se desprende la placenta y los glóbulos rojos del bebé Rh+ toman contacto con los de la madre Rh-. El niño nace normalmente, pero la madre queda inmunizada con aglutininas anti Rh que entrarán en acción ante una futura gestación de un feto Rh+. Aunque no es común, puede suceder una situación similar de incompatibilidad sanguínea entre los grupos A - B - O maternos y fetales en los siguientes casos: 7 PRACTICA DE LABORATORIO-GENETICA GENERAL

8 Cabe señalar que el gen Rh+ es dominante, es decir, prevalece sobre el Rh-. El recién nacido hereda un gen Rh del padre y otro gen Rh de la madre. La secuencia para la determinación del factor Rh es la siguiente: 1: Dos padres con los dos genes Rh+ tendrán siempre hijos Rh+ (Rh+/+) 2: El padre Rh+ y la madre Rh- tendrán hijos Rh+/- 3: Dos padres Rh- tendrán siempre hijos Rh- (Rh-/-) 4: Un padre Rh- y una madre Rh+/- tendrán hijos Rh- o hijos Rh+/- 5: En este caso, ambos padres son Rh+ pero portan el gen Rh- (Rh+/-), con lo cual sus hijos pueden nacer Rh+, Rh+/- o Rh- Además de lo establecido para los factores A - B - O, las personas con factor Rhpueden donar sangre para las de su mismo factor y para las Rh+. Por el contrario, los individuos Rh+ solo pueden recibir sangre de otro Rh+. Cuando se transfunde sangre de un individuo Rh+ a otro Rh-, este último genera anticuerpos anti Rh, que tras sucesivas transfusiones darán como resultado la destrucción de los glóbulos rojos del donante Rh+. 8 PRACTICA DE LABORATORIO-GENETICA GENERAL

9 Posibilidades de transfusión entre factores Rh El factor Rh es independiente de los grupos A - B - O - AB. Si se toman ambos tipos antigénicos, los grupos sanguíneos suman un total de ocho. Ellos son: Compatibilidades sanguíneas 9 PRACTICA DE LABORATORIO-GENETICA GENERAL

10 El grupo O factor Rh- es considerado dador universal, ya que su sangre puede ser transfundida a todos los grupos existentes, pero solo puede recibir de su mismo grupo O factor Rh-. En el extremo opuesto se ubica el grupo AB+, consideradoreceptor universal, ya que recibe sangre de todos los grupos y no puede donar sangre a ningún otro grupo que no sea el AB+. EL DESCUBRIMIENTO DE LOS GRUPOS SANGUÍNEOS Cerca de tres siglos después di que William Harvey explicara k circulación de la sangre, el inmunólogo austríaco Karl Landsteiner (foto) se dio cuenta de que no toda la sangre era igual. Landsteiner, que aprendió patología realizando más de cuatro mil autopsias durante los diez años que estuvo en el Instituto Patológico de Viena, descubrió en 1900 que la sangre extraída de una persona a menudo se aglutinaba o coagulaba cuando se mezclaba con las células sanguíneas de otra. Al año siguiente, demostró que la coagulación era causada por los distintos anticuerpos contenidos en la sangre. Estos eran característicos de los diferentes grupos sanguíneos, que Landsteiner denominó A, B y O (más tarde añadió el AB). Su hallazgo rescató a la cirugía de la barbarie de las extracciones de sangre al azar, seguida a veces de letales transfusiones. Los cirujanos utilizaban sangre de todo tipo (de animales, e incluso leche) para las transfusiones, sin saber si los cuarenta años después, Landsteiner identificó el factor Rhesus en la sangre humana (antes hallado intervenciones salvarían o matarían al paciente. 10 PRACTICA DE LABORATORIO-GENETICA GENERAL

11 Unos en el mono Rhesus), un avance que permitió a la medicina moderna buscar nuevos caminos para evitar la muerte de los embriones afectados por la falta del factor RH de sus madres. El descubrimiento de Landsteiner tuvo poco eco hasta la Primera Guerra Mundial, cuando la carnicerí general que se cernía sobre Europa creó una desesperada necesidad de sangre. Los masivos manejos de sangre de los años de la guerra se realizaron siguiendo el esquema de grupos sanguíneos que él confeccionó, abriendo así el camino a los modernos bancos de sangre. 3.- OBJETIVOS: OBJETIVO GENERAL: Reconocer y diferenciar los grupos sanguíneos Analizar la importancia que tienen los grupos sanguíneos del sistema ABO y del factor Rh en las transfusiones sanguíneas de persona a persona. OBJETIVOS ESPECIFICOS: Observar y reconocer el grupo sanguíneo en las muestras de sangre de cada persona en preparaciones microscópicas Utilizar correctamente los diferentes sueros para identificar en el laboratorio los grupos de sangre y el factor Rh. Identificar los mecanismos genéticos que regulan la herencia de grupos de sangre y del factor Rh. Adquirir la habilidad para preparar especímenes para observar al microscopio utilizando técnicas adecuadas. Manejo de material y técnicas de laboratorio 4.- MATERIALES Y EQUIPOS Placas de grupo sanguíneo o portaobjetos Reactivos 11 PRACTICA DE LABORATORIO-GENETICA GENERAL

12 Lanceta desechable estériles Algodón Alcohol Sangre 5.- PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL 12 PRACTICA DE LABORATORIO-GENETICA GENERAL

13 PASO N 01: Tome los portaobjetos limpios y secos y divídalos el tres partes, la división se hace con plumón indeleble. PASO N 02: Limpie la yema de uno de los dedos de la mano, con un algodón empapado con alcohol y déjelo secar. Permita que su instructor le pinche el dedo con una lanceta desechable estéril. Apretando ligeramente el dedo, deposite una gota de sangre en cada extremo del portaobjeto. Con algodón estéril comprima la pequeña herida para impedir la salida de más sangre. PASO N 03: Rápidamente antes que se coagule la sangre, agregue en el extremo correspondiente del porta objeto una gota de suero anti A, en el otro extremo una gota de suero anti B y en el medio aplique el anti - D. En las anteriores 13 PRACTICA DE LABORATORIO-GENETICA GENERAL

14 operaciones evite que la punta de los goteros de los sueros toque las gotas de sangre. Usando un palillo diferente, agite cada una de éstas mezclas y observe si se produce o no aglutinación y registre los resultados. 14 PRACTICA DE LABORATORIO-GENETICA GENERAL

15 6.- COCLUSIONES De este informe de laboratorio podemos concluir: Sí la sangre aglutina con el suero anti A, es del grupo A. Sí la sangre aglutina con el suero anti B, es del grupo B. Sí la sangre aglutina con ambos sueros anti A y anti B, entonces pertenece al grupo AB Sí la sangre no aglutina con el suero anti A, ni con el anti B, es del grupo O. 7.- BIBLIOGRAFIA Griffith,A; Miller, J; Suzuki, D; Lewontn, R. y Gelbart, W.(1995). Genética Editorial McGraw-Hill. Puertas,M.(1993). Genética. Fundamentos y Perspectivas. Editorial McGraw-Hill. Genética: Un Enfoque Conceptual., Pierce, PIERCE BENJAMIN LINKOGRAFIA: PRACTICA DE LABORATORIO-GENETICA GENERAL