dahliae y de tratamientos con agentes de biocontrol
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- Samuel Arroyo Gómez
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1 IX Foro INIA Olivar y Aceite de Oliva Córdoba, 13/2/212 Manejo Integrado de la Verticilosis del Olivo: uso de patrones resistentes al patotipo defoliante de Verticillium dahliae y de tratamientos con agentes de biocontrol Rafael Manuel Jiménez Díaz Instituto de Agricultura Sostenible, CSIC Real Academia de Doctores de España ETSIAM Universidad de Córdoba
2 Manejo Integrado de la Verticilosis del Olivo: uso de patrones resistentes al patotipo defoliante de Verticillium dahliae y de tratamientos con agentes de biocontrol *Equipo Investigador y relaciones con otros equipos : Daniel Jiménez Fernández, Dr. Ciencias Investigador contratado, UCO Concepción Olivares García, Lda. Ciencias Biológicas, Investigadora contratada, UCO José Luis Trapero Casas, Titulado Técnico Grado Medio Funcionario, IAS-CSIC *Miembros del Grupo PAIDI IAS-CSIC/UCO: AGR-136 Sanidad Vegetal
3 Manejo Integrado de la Verticilosis del Olivo: uso de patrones resistentes al patotipo defoliante de Verticillium dahliae y de tratamientos con agentes de biocontrol *Líneas actuales de investigación y proyectos que las financian Manejo integrado de la Verticilosis del olivo Proyecto de Excelencia P1-AGR 682. Consejería de Innovación, Ciencia y Empresa; Junta de Andalucía ( ) Convenio específico de Colaboración: Universidad de Córdoba, la Organización Interprofesional del Aceite de Oliva Español y Citoliva (Cofinanciación del proyecto P1-AGR-682) ( ) Diversidad genética y potencial evolutivo de Verticillium dahliae Proyecto AGL : Biología de poblaciones de Verticillium dahliae. Desentrañando el origen y desarrollo del patotipo defoliante de algodón y olivo mediante genotipado por secuenciación (Vertigen). Mº de Economía y Competitividad ( )
4 Resultados de investigaciones durante los últimos años Marcadores genéticos y moleculares, y protocolos de análisis, para la identificación y diagnóstico simultáneo de los patotipos defoliante (D) y nodefoliante de V. dahliae en olivos sintomáticos y asintomáticos QLK5-CT y Fundación R. Areces: Mercado-Blanco et al. 23. Plant Disease 87: ; Jiménez-Díaz, et al. 26. Phytopathology 96: ; Collado-Romero et al. 26. Phytopathology 96: ; Mercado Blanco et al. 25. Olivae 14: 36-45; ES B1 (BO Prop. Industrial 16/5/24); WO 2/97131 (5/12/ 22); NBT y UCO Epidemiología de la Verticilosis: Distribución y medios de dispersión del patotipo D en Andalucía mediante el uso de dichos protocolos Jiménez Díaz et al Phytopathology 11:34-315; Navas-Cortés et al. 28. Phytopathology 98: Control de infecciones de olivo Picual por el patotipo D mediante tratamientos del sistema radical de plantones con un formulado de estirpes de Trichoderma spp. Contrato I+D: ISAGRO S.L. Jiménez Díaz et al. 29. Vida Rural (Octubre): Jiménez-Díaz et al. 21. Boletín Sanidad Vegetal Plagas 35: Desarrollo de clones de acebuche (Ac-13, Ac-18, PC-1, PC-3) altamente resistentes a aislados del patotipo D para su uso como patrones en el control de la Verticilosis en variedades susceptibles
5 Detección positiva (%) Detección del ADN de V. dahliae defoliante (D) y no defoliante (ND) en olivos co-infectados natural o artificialmente (duplex, nested-pcr) 2ª PCR Raíz V4I (ND) V138I (D) V4I/V138I M D ND C NI Muestras de raíz y tallo 21 días tras inoculación 824 pb (ND) 334 pb (D) Tallos 83,3% N+ND (13,5%) ND (15,6%) D (54,2%) 43,8% 41,7% D 334 pb Nested PCR Aislamiento microbiológico 16,7% Arbequina (3-5 años) Picual (8 años) Variedad y edad del árbol 1ª: DB19/DB22 + NDf/NDr 2ª: DB19/espdef1 + INTND2f/INTND2r Detección simultánea de los patotipos D y ND en una misma planta de olivo infectada
6 Árboles sanos Distribución de los patotipo defoliante y no-defoliante de Verticillium dahliae en olivares en Andalucía Árboles enfermos kg/árbol Defoliación y muerte del árbol 1983 Defoliante, prevalencia 83%, 78% de 637 aislados No-defoliante, prevalencia 17%, 22% de aislados % 1% 13, 1% 1% 4,2 4,2 16% 44% 3º año 4ºaño
7 Incidencia de enfermedad (%) Nº árboles enfermos Dispersión de V. dahlaie e incremento de Verticilosis en una plantación de Arbequina de no-laboreo y regada por goteo El número de árboles enfermos se incrementó de 3 en 1999 a 147 en 23. Los árboles enfermos presentaron un patrón de agregación, y el número y tamaño de focos aumentó en el tiempo según un proceso contagioso (el estado de un árbol dependió del de su vecino más próximo) (Análisis de índices de distancias SADIE) Curvas de incremento de enfermedad Patotipo de V. dahliae Total Defoliante No-Defoliante Incidencia final de enfermedad (8%) 127 (87%) 83% 2 1 D F A J A O D F A J A O D F A J A O D F A J A % 2 (13%) Total D ND
8 Severidad (-4) Control de la Verticilosis en olivo Picual tratados con estirpes de Trichoderma asperellum yt. gamsii en microparcelas solarizadas e infestadas con el patotipo defoliante de V. dahliae (3/27-1/29) 4 3 Verticillium dahliae D Verticillium dahliae D +Trichoderma spp. 2 1 Mar 7 Jul 7 Nov 7 Mar 8 Jul 8 Nov 8 Tiempo después del transplante e inoculación
9 Control de la Verticilosis en olivo Picual tratados con estirpes de Trichoderma spp. en microparcelas solarizadas e infestadas con V. dahliae Severidad Incidencia Julio 7 Enero 8 Julio 8 Enero Vd V. dahliae +Trichoderma A A 2,2 2,4 1,1 1,3 B,7 B,4,8 1, Julio 7 Enero 8 Julio 8 Enero Perímetro del tronco (cm) A B V. dahliae Vd+Trichoderma Plantones de 6 meses tratados con Trichoderma spp.e incubados 3 meses a 25ºC, se trataron en el transplante a microparcelas solarizadas e infestadas con el patógeno, y 1 año mas tarde.
10 Incidencia de enfermedad (%) Reacción de clones de acebuche (Ac-13, Ac-18 ) y olivo Picual 3 meses después de la inoculación con aislados de Verticillium dahliae defoliante por inmersión radical en 1 7 conidias ml -1 o trasplante a suelo infestado Picual Picual V. dahliae V-138I VCG1A V. dahliae V-138I VCG1A 4 Ac-13/Ac-18 Ac-13 Frantoio Severidad de síntomas (-4) Picual+Gm Ac-18 -Glomus intraradices Ac-13/-Gi Ac-13/+Gi Ac-18/-Gi Ac-18/+Gi Picual/+Gi (Semanas) +Gm Testigo V138I V19I Testigo V278I V138I V19I V138I Testig. V138 Testig. V138I
11 Olivo Picual injertado sobre Ac-13 Inoculado con V138I Olivo Picual injertado sobre Ac-18 Inoculado con V138I
12 Muchas gracias por su atención!
Metodología. Ac-4. Ac-18. Zona Alta. Media
Metodología Zona Alta Ac-18 Ac-4 Media Inoculación por inmersión en 1 7 esporas/ml, 2 min o transplante a suelo pasteurizado e infestado (2 1 7 6 1 7 propágulos/g suelo) e incubación 12 a 15 semanas Baja
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