Taller de Histocompatibilidad Nuevos alelos definidos en Modelos serologicos combinaciones DQA1/DQB1

Transcripción

1 Taller de Histocompatibilidad Nuevos alelos definidos en Modelos serologicos combinaciones DQA1/DQB1 Badajoz, 9/5/2014

2 Muchas gracias a todos los laboratorios que han participado en este estudio por su esfuerzo

3 Primer componente: consta de asignación e identificación de alelos HLA que prosigue abierto desde hace 3 años y dirigido por Antonio Balas del Centro de Transfusión de Madrid Segundo componente: Modelos serologicos de asignacion en combinaciones DQA1/DQB1 asumidos en ensayos de fase solida. Dirigido por Manuel Muro del Hospital Virgen de la Arrixaca de Murcia y Jaume Martorell del Hospital Clinic de Barcelona

4 TALLER 2014: MODELOS SEROLOGICOS DQA1/DQB1 RESPONSABLES DEL ENVIO DE RESULTADOS LABORATORIO QUE ENVIA RESULTADOS ALBERTO TORIO RUIZ HOSPITAL INSULAR - LAS PALMAS F. GONZALEZ ESCRIBANO/CRISTINA ABAD HOSPITAL VIRGEN DEL ROCIO SEVILLA MANUEL MURO/MARIA ROSA MOYA HOSPITAL VIRGEN DE LA ARRIXACA MURCIA LUIS ALBERTO MARIN RUBIO HOSPITAL CLINICO SALAMANCA NIEVES PUIG ALCARAZ CENTRO DE TRANSFUSIONES DE VALENCIA JAVIER GONZALO OCEJO H. MARQUES DE VALDECILLA SANTANDER IVAN BERNARDO HOSPITAL SAN PEDRO LOGROÑO CRISTINA MORENO CLINICA UNIVERSITARIA NAVARRA NATALIA MARTINEZ POMAR HOSPITAL SON ESPASES MALLORCA CRISTINA GONZALEZ ROIZ HOSPITAL INFANTA CRISTINA BADAJOZ ANTONIO NIETO HOSPITAL PUERTA DEL MAR CADIZ JESUS ONTAÑON RODRIGUEZ HOSPITAL GENERAL ALBACETE JOSE LUIS VICARIO CENTRO DE TRANSFUSIONES MADRID RAFAEL SOLANA/RAFAEL GONZALEZ JAUME MARTORELL PONS HOSPITAL REINA SOFIA CORDOBA HOSPITAL CLINIC BARCELONA Se envian 16 resultados, 8 pertenecientes a usuarios de Life Technologies y 8 pertenecientes a Usuarios de One Lambda

5 DRB1: DRB1*03:01, gran estabilidad (100% Labs), DRB1*11:01 y 11:04 aportado por 2 laboratorios DRB3/4/5: DRB3*02:02 y 03:01 (100%) DQA1: DQA01:01, 01:02, 01:03, 01:04, 02:01, 03:01, 03:02, 04:01, 06:01 (95%). 1 lab no informa DQA1*01 DQB1: DQB1*02:01, 03:02, 03:03, 04:01, 04:02, 05:01, 05:03, 06:01, 06:02, 06:03, 06:04 (95%). 1 laboratorio asigna, además, DQB1*02:02 Modelo serológico DQ: DQ4, DQ5, DQ6, DQ8, DQ9 (Asignado por el 100%), DQ2 asignado por el 25% DPA1: *02:01, *02:02, *04:01 (100%) DPB1: *05:01, *13:01, *14:01, *17:01, *19:01, *28:01 (88%). 1 lab da DPB1 negativo cpra: 100% 6 lab, 90% y 97% 1 lab Corte MFI estimado: 1688

6 DRB1: Negativo DRB3/4/5: Negativo DQA1: 01:01, 01:02, 01:03, 01:04, 03:01, 04:01, 06:01 (63%, 5/8). 2 laboratorios no informan 03:01, 04:01, 06:01 (25%, 2/8).1 lab informa negativo DQA1 DQB1: 03:01, 03:02, 03:03, 04:01, 05:01, 05:03, 06:01, 06:02, 06:03, 06:04 (88% 7/8). 1 laboratorio asigna, además, DQB1*04:02 y otro no asigna DQB1*04:01 Modelo serológico DQ: DQ6,DQ7, DQ9, DQ8, DQ5, DQ4 (7/8, 88%). Curiosamente un lab asiganando DQB1*04 no asigna serologico DPA1: Negativo DPB1: Negativo cpra: 87% 2 lab, 89% 2 lab, 94% 2 lab y 97% 2 lab Corte MFI estimado: 648

7 DRB1: 01:03, 03:01, 04:01, 04:02, 04:03, 04:05, 07:01, 08:01, 09:01, 10:01, 14:01, 14:04 (100%) DRB3/4/5: DRB4*01 (100%) DQA1: 03:01, 03:02, 06:01(88%, 7/8). 1 laboratorio informa negativo. 1 lab informa DQA1*01:04 adicional DQB1: 03:02, 03:03 (63% 5/8). 3 laboratorios asignan negativo Modelo serológico DQ: DQ9, DQ8 (5/8, 63%). Correspondencia exacta con alelos DQB1 DPA1: *04:01, 4 lab, 4 negativo DPB1: *03:01, *04:01, *13:01, *18:01 4 lab, 1 lab da DPB1*19:01 y *28:01 adicional, 3 lab dan negativo cpra: 30% 1 lab, 76% 3 lab, 52% 1 lab, 81% 1 lab Corte MFI estimado: 2368

8 DRB1: 01:01, 01:02, 01:03, 04:01, 04:03, 04:05, 07:01, 09:01, 10:01, 12:01, 14:01, 14:04, 15:01 (100%) DRB3/4/5: DRB3*01:01, *03:01, DRB4*01:01, DRB5*01:01, *02:02 (100%) DQA1: 01:01, 01:04, 02:01, 03:01, 03:02, 04:01 (100%) DQB1: 03:02, 03:03, 04:01, 04:02, 05:01, 05:03 (100%) Modelo serológico DQ: DQ4, DQ5, DQ8, DQ9 (100%). Correspondencia exacta con alelos DQB1 DPA1: *02:02, 6 lab, 2 negativo DPB1: *04:01, *14:01 7 lab, 1 lab da negativo cpra: 100% 5 lab, 97% 1 lab, 84% 1 lab, 73% 1 lab Corte MFI estimado: 2279

9 DRB1: 03:01, 03:02, 07:01, 09:01, 11:01, 11:04, 12:01, 12:02, 13:01, 13:03, 14:01,14:02, 14:54, 15:01, 15:02 (100%) DRB3/4/5: DRB3*01:01,*03:01,*02:02 (100%) DQA1: DQA1*01:02, *01:03 (4/8 50%), 2 lab DQA1*01:01 adicional y 2 lab negativo DQB1: 05:01, 05:02, 06:01, 06:02, 06:03, 06:04, 06:09 (88% 7/8), 1 lab negativo Modelo serológico DQ: DQ5, DQ6 (100%). Correspondencia exacta con alelos DQB1, 2 laboratorios se arriesgan a dar DQA1*01 DPA1: Negativo DPB1: Negativo cpra: 99% 3 lab, 98% 4 lab, 92% 1 lab Corte MFI estimado: 1452

10 DRB1: 01:03, 03:01, 03:02, 04:01, 04:02, 04:03, 04:04, 04:05, 11:01, 11:04, 12:01, 12:02, 13:01, 13:03, 14:01, 14:02, 14:54, 15:01, 15:02, 15:03, 16:01, 16:02 (100%) DRB3/4/5: DRB3*03:01, *02:02, *01:01 (2 lab ) con DRB5*01:01,*01:02 adicional - 6 lab DQA1: DQA1*01:02,*01:03 (3 lab), *06:01,*05:03,*05:05 1 lab DQA1*03:02 (5 lab), adicional, 1 lab 01:01 adicional DQB1: 05:01, 05:02, 06:01, 06:02, 06:03, 06:04, 06:09 (88% 7/8), 1 lab 03:03 adicional, 1 lab negativo Modelo serológico DQ: DQ5, DQ6 (100%). Correspondencia con alelos DQB1, 1 lab DQ9 adicional DPA1: 01:04 3 lab, adicional 05:01, 02:01, 4 negativo DPB1: 02:01, 03:01, 04:02, 06:01, 09:01, 10:01, 14:01, 17:01, 18:01, 28:01, 1 lab negativo cpra: 96-97% 100% lab Corte MFI estimado: 1650

11 DRB1: DRB1*01:01, DRB1*01:02 (100%) DRB3/4/5: Negativos (100%) DQA1: DQA1*01:01, *01:03, *01:02 (4 lab), DQA1*01:03,*01:02 (2 lab), 2 lab negativo DQB1: 05:01, 05:02, 06:01, 06:02, 06:03, 06:04, 06:09 (88% 7/8), 1 lab negativo Modelo serológico DQ: DQ5, DQ6 (100%). Correspondencia alelos DQB1, 1 lab se arriesga a dar DQA1*01 DPA1: negativo (100%) DPB1: negativo (7/8 88%), 1 lab da DP9 cpra: 58% (5 lab), 53% 2 lab, 64% 1 lab Corte MFI estimado: 1154

12 DRB1: DRB1*01:01, *01:02, *01:03, *07:01, *09:01, *09:02, *10:01, *15:01, *15:02, *15:03, *16:01, *16:02 (100%) DRB3/4/5: DRB5*02;02 (5/8) (63%), 1 lab DRB5+, 1 lab neg DQA1: DQA1*05:01 (5 lab), negativo (3 lab) DQB1: *02:01, *02:02 (88% 7/8), 1 lab no da DQB1*02:02 Modelo serológico DQ: DQ2 (100%). Correspondencia alelos DQB1, 1 lab se arriesga a dar DQA1*01 DPA1: negativo (100%) DPB1: DPB1*03:01, *06:01, *09:01, *14:01, *17:01 (7/8 88%), 1 lab da negativo cpra: 84% (5 lab), 78% 2 lab, 91% 1 lab Corte MFI estimado: 959

13 Locus OL LT TOTAL DRB1 296 esp 99 9% 256 esp 99 8% 552 esp 99.9% DRB3 48 esp 100% 32 esp 100% 80 esp 100% DRB4 0 esp 100% 32 esp 100% 32 esp 100% DRB5 32 esp 100% 16 esp 100% 48 esp 100% DQA1 96 esp 91.2% 201 esp 89.6% 297 esp 90.3% DQB1 184 esp 97.8% 224 esp 95.9% 408 esp 96.5% DPA1 24 esp 100% 40 esp 100% 64 esp 100% DPB1 128 esp 98.3% 112 esp 96.4% 240 esp 97.9% Modelo ser 56 esp 94.9% 144 ags 93.8% 200 esp 94.1% cpra 98% coinciden 97% coinciden 97.5% coinciden

14 Gran consenso en los loci DRB1 (99.9%), DRB3/4/5 (100%) en el asignamiento de especifidades en los resultados de los usuarios de ambas casas comerciales Gran consenso en DPA1 (100%) sobre todo y DPB1 (97.9%) en los resultados de los usuarios de ambas casas comerciales cpra con ligeras diferencias en los porcentajes, oscilando <10% en la asignación. Coincidencia del 97%

15 Las mayores diferencias encontradas son en DQA1 (90.3%) y DQB1 (96.5%) Y en el asignamiento de modelos serológicos DQ 94.1%. En algunos locus es, evidentemente, normal el porcentaje tan similar de especificidades asignadas ya que los resultados son output de 2 laboratorios de dos casas comerciales Lo idoneo hubiera sido enviar los sueros en vez de los outputs y, seguramente, la dispersion hubiera sido mucho mayor. Razones economicas

16 La asignacion de especificidades no se ajusta a valores de MFI determinados. La asignacion de alguna especifidad llega a bajar hasta MFI 600 en un suero. Posteriores estudios podrian ser necesarios para la clarificación de modelos La historia de sensibilizaciones del suero es de suma importancia para la asignación de DQA1

17 Las casas comerciales ya incorporan separacion de cadenas en DQ y DP, asi como analisis de eplets Las nuevas versiones de kits, con mayor nº de especificidades testadas y programas mas complejos seguramente llevaran a una asignacion mas correcta de estas especificidades reales del suero problema

18 Reflexiones de Jaume sobre beads DQA1/DQB1

19 Propongo que hasta que no tengamos más trabajado como realizar estas traducciones seamos muy cautos en la utilización de la traducción de anticuerpos a anti DQA por serología

20 Qué estudiamos el año que viene en el Taller 2015? Voluntarios en temas concretos Temas no muy ambiciosos y que no generen una excesiva carga de trabajo sobre los participantes, así como para los organizadores

21 CELIACOS, DQA, DQB ALTA cpra ESPAÑOL CALCULADORA JESUS ONTAÑON INFLUENCIA DE ANTI-DP EN MULTICENTRICO SELECCIÓN RECEPTORES EN FUNCION CDC, LUMINEX, TIPAJE, DEMO VALORACION CLINICA C1Q DESENSIBILIZACION, RHA ACS NO HLA, C1Q COMPARATIVA CDC/CF/LX DISCREPANCIAS CDC Y LUMINEX BIOMARCADORES MOLECULARES RA CM EC Y MONITORIZACION CM CF: INTERPRETACION DE RESULTADOS, METODOLOGIA EN DTE VIVO, SI TIENEN EN CUENTA CII Y LX+ LISTA DE H3 NACIONAL BASE DATOS NACIONAL TX, TIPAJE,ACS SA,DSA, PATHI - ONT INCLUIR 2-3 SUEROS QUE PUDIERAN SERVIR DE PATRON ESTUDIO DE SUEROS CON AMR SEGÚN CLINICOS Y NEGATIVOS ABS Y AL CONTRARIO