Facultad de Ciencias ** *... **... ... * *... *** ** **

Facultad de Ciencias Lucilia sericala Cluysamya a/bi 'eps hrysoml'a ch/oropyga hrl'sumya illclinala 'hr)',\oiill'a liiargiliafis Chrysomya liiegacepha/a 'hrysomva norrisi Chrysomya pil1gllis Chrysomya pllloria Chrysomya rt(fi[acies Chrysomya semililelallica Chrysomya vuripes Lllcilia sericala Chrysomya a/biceps Chry umya ch/oropygo Chrysomya in c- fi llala Chrysomya IIIO/p,ina/is Chrysomya megacepha/u Chrysomya nurrisi Chrysomya pil1guis Chrysomya pulorio Chrysomya rufi/ucies Chry omya semimelal/ica Chrysomya vuripes Lucilia sericara Chrysomya a/biceps Cillysumyu ch/oropyga Chlysomya inclinala Chrysomya murgillalis Chrysomya megacepha/a Cluysolllya no rrisi Chr),somyu pinguis Chrysomya putoria Chrysamya rlifija c;ies Chrysamya semimelal/ica Chrysamya ""ripes ATTTGTATTTTTATTTACTGTAGGAGGATTAA TGGAGTTLJrlT r GCTA AT TGlA'l TTTT 1\ TGTALJGAGGA rt ACTGGAGTTGTTTTAGCTA ATrl'G'rA Tn-ATTTACTGTAGll GATT GGAC,TIGTTTTAG TA CTTAn A 'TGTAGGAGG 1 A ACTGGAllTAGTTTT CTA ATTTGTA I TTATTT CTGTAGGAGGA ITAACTGGAGTTCiTTTTAGCTA ATTIGTATlCii'A'l ITA 'TGT GG AG(jA r AA 'T GGAGTAGTTTTAGCTA ATIC ~TATT1TT TTTA TGTA GG AG ATrAACi\GGAGTTGrtTYAGCTA /\T IT 'I'ATTTTTATIT CTGTAll(jACiGACTAAC'.4,CiGAGTTGn AG AA AI TTGTATT ATTTA TGTAGGAGG ATTA TG,A TTGnTrAGCAA CiTTCG'lA r ITATTTACTGTAGGAGGATTACCT GAGTTCiTTCTAGCTA TTTGTATTTTTATTT C CiTAGGAGliA'1 TAACTGGACiTTGTTTTAGCTA ATTTGl n n A TGTAGGAGGl raactggagttg1t lt GC A ** *... **..... ATT IT CAG I rgafatt TTCTTCATGACACAT TTATGTAGTTG CTCAT ATTCTTCA ATTGATATTATT TTCATGACACt\TATTATGTA,TAGC1CAT ATT TTCA ATTGATATT TTCTACATGATACA I TTATGTAGT GCTCAT ACT TT AATTGATATTAT rttacatgacacatat1argtagtagctcac ATTCAT 'TATTGATA A'ITTTACATGA1ACAT nargt GTAGCTCAC A CATCTATT rac ATTATTTT ATGATACATACTAT it, TAG TC C ATTc CTATTG ratiattttacatgatactiactatgtagt/\ C r 'AC ACTCTTCTATTG TATTATTTTACATGATA CA[ATTATGTA TAGC 'AC CAT(A ATTGACATTATTTT CATGATACLJTATTATGTAGT Ci CTCAC ATT TCA ATT CATTATTTTA ATGACACATACTATGTAGTA r 'T 'AC ATT "ITCT n 'GA LI\TTATTCTA ATGACACATATTAT T GTTGC C C ACTCTT ' Gl - rg TATTATTTTAC TG ATACATA TA'rGTAGTAGCT *** ** ** TTCCACTATGTA1T ATCAATAGCiAGCTG "ITCGCIArT TAG AGGGTT TTCCA TATGTATTATCAATAGGAG TGTATTCGCT TTATAGCAGGGTT IT ' ATGTATTATCAATAGGAGL'I'GTATTTGCTA ATAGCAGG TT TrCCA T TGTATT TCAATAGG AG TGTATTTGCTATIATAG 'AGGATT n 'c ATT ATGT rctlt AATAG GAGCTGTI\TTCGC1ATTMAG 'AGGATT TTCCATTATGTTCTITCAATA GG AG -T GTATTTGCT,\"ITATAG 'A J ratt TTC '/\ TATGTATTAT ATAGGAGCTGTAn-TGCTA TA GCT,GATT TIC A1TATGHCTTTCTATA GAGCTGTATTTGCTAn ATAGCT,GTTT TICCAJTATCiTIClAfCAATGGGAGCTGTAIITGCTATrATAGCAGCiATT TTCCATTACGT' TTATCA ATGGG AG TGTATTTGCTATTATAG AG ATT -ITCCATT TGTATIATCAATAGGAGCTGT TTTGCTAl ATAGCAGGATT TTCCATIATGTTTI TCAATGGGAG TGTATTTGCTATIATAGCA GGATT... * *..... Cada secuencia corresponde a un individuo con 400 pares de bases comparadas. Las secuencias deben alinearse manualmente y posteriormente con la ayuda de un algoritmo mate matico median te un software como CLUSTAL 0 MEGA. Un alineamiento es una comparacion nucleotido a nucleotido de una secuencia 0 cadena de ADN. La comparacion se hace para todas las especies en bloques de 50 nucleotidos. Gracias al polimoriismo entre especies existen fragmentos de secuencias presentes 0 caracteris ticas en una especie y no en otra Con base en secuencias de ADN para el genero Chrysomya se conoce que C_ a/biceps C. rufifacies y C. putoria, constituyen Ifneas monofileticas que se separaron hace mas de un millon de anos. Las secuencias del gen Citocromo oxidasa permiten diferenciar claramente las especies del genero que se confunden moriologicamente en el troipico y con base en RFLPS puede disenarse una prueba diagnostica para cada especie y aun para cada raza 0 variante geografica de una especie. La variabilidad geogratica es diferenciable y cuantificable con base en las secuencias permitiendo precisar los niveles intra e interespecificos y utilizar fragmentos de secuencias como marcadores moleculares. 92 ENTOMOLOG A FORE1\ISE

Sistematica Molecular Chrysomya semimetallica Lucilia sericata Chrysomya marginalis Chrysomya inclinata Chrysomya chloropyga Chrysomya putoria Chrysomya megacephala Chrysomya pinguis Chrysomya norrisi Chrysomya varipes Chrysomya albiceps Chrysomya rufifacies ENTOMOlOGIA FORENSE 93

Facult'ld de iencias Dado que no es del alcance del presente texto profundizar en el analisis molecular, se remite a textos especializados y a la literatura citada al final sobre secuenciaci6n y taxonomfa molecular. Tambien, los resultados finales del anal isis molecular de Diptera de importancia Forense con base en secuencias pr6ximo a publicarse.. Se incorporan los protocolos basicos de extracci6n y amplificaci6n del ADN a partir de insectos, como una forma de difusi6n de protocolas que sin duda seran una de las herramientas mas utiles para los entom610gos forenses en el futuro. Es importante aclara r. que cuando se usan tecnicas moleculares s610 se toma una porci6n de musculo toracico retirada con culdado mediante una incisi6n en el area del ala del insec to. Asi puede guardarse los especimenes como colecci6n de referencia y complementar las inferencias moleculares con las realizadas usando caracteres morfol6gicos,10 cual cons tituye la metodologia ideal. Las tecnicas moleculares en Entomologia forense, no son la panacea, pero sin duda cons tituyen una de las herramientas que mas se proyecta al futuro en Colombia y el mundo. EI futuro de la Entomologia forense en Colombia esta por construir y se precisa de la integraci6n de tecnicas y disciplinas pero sobre todo, del trabajo y discusi6n conjunta de los diversos grupos que a ella se dedican. 94 MOWC[A FORl!NSE

Sistematica Molecular Las ilustraciones fueron redibujadas por Federico Fernandez Gartner de los siguientes textos: GONZALES, R; CARREJO, N.S.1992. Introducci6n al estudio de los Diptera. Universidad del Valle. Cali, Colombia. P 197. MC ALPINE, J.F. et.a!. Manual of Neartic Diptera (Monograph/Agriculture Canada; 27-28). Ottawa: Minister of supply and services. Canada 1993. p 674. MC GAVIN, G.2001. Essential Entomology. Oxford University. New York, United States. P 318. SERNA, F.J. 1996. Entomologfa general, guia para reconocer 6rdenes y familias. Universidad Nacional de Colombia, Medellin, Colombia. P11 O. ENTOMOLOGiA FORE.NSE 95

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Sistematica Molecular Crupo de lnvestigaci6n : Sistematica Molecular: El grupo de investigaci6n esta adscrito a la Escuela de Biociencias, Facultad de Ciencias. Participan profesores de la Universidad Nacional de Colombia, sede Medellin, que trabajan conjuntamente con otras lmiversidades como la Universidad de Antioquia y la Universidad Javeriana. Las lineas de investigaci6n son Ecologia, Taxonomia molecular y Genetica de poblaciones. Reconocido recientemente por Colciencias y con un grupo semilla que reu.ne estudiantes de diferentes carreras, el grupo de investigaci6n proyecta su trabajo hacia la formaci6n de j6venes investigadores capaces de participar y liderar procesos investigativos en Sistematica Molecular con aplicaciones en areas como Entomologia Forense, Entomologia Agricola y Conservaci6n molecular.

Impreso en los TaUeres de (7/...IFU... ) ~ Medellin 2004