EFICACIA PULGUICIDA Y GARRAPATICIDA DE UNA FORMULACION SPOT ON, CONTENIENDO IMIDACLOPRID, PERMETRINA Y BUTOXIDO DE PIPERONILO, ENSAYOS DE CAMPO

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1 EFICACIA PULGUICIDA Y GARRAPATICIDA DE UNA FORMULACION SPOT ON, CONTENIENDO IMIDACLOPRID, PERMETRINA Y BUTOXIDO DE PIPERONILO, ENSAYOS DE CAMPO Autores: Dr. Sepiurka, Leonardo- Dr. Doti Fernando Dr. Leonardo Sepiurka: Especialista en Clínica de caninos y felinos domésticos del Colegio de Veterinarios de la Prov. de Buenos Aires -Director Hospital Veterinario Tortuguitas. Profesional Superior Docente A.T.P. Univ. Nac. Del Centro. Ex Profesor Adjunto de Clínica Médica y Quirúrgica de Animales Pequeños FCV-UBA. Dr. Fernando Doti: Director técnico de Laboratorio Ruminal-Virbac, ex director técnico de los Laboratorios Bayer y Novartis, autor de varias publicaciones sobre de eficacia y poder residual de formulaciones contra ectoparasitos en diferentes especies animales. Autor del libro: Uso práctico de los antibioticos en la clínica de caninos y felinos. Ex docente de la Catedra de Farmacología, FCV UBA. RESUMEN: El producto en estudio, demostró ser eficaz en el control de pulgas y garrapatas en ensayos realizados en dos establecimientos con alta población de caninos parasitados con pulgas y garrapatas, durante la temporada estival de 2011 en la Provincia de Buenos Aires. La evaluación se realizó sobre dos grupos, cada uno de 20 caninos mestizos, uno de los grupos naturalmente infestado con una elevada carga de pulgas (Ctenocephalides sp.) y el otro grupo, naturalmente infestado con garrapatas de la especie Rhipicephalus sanguineus también naturalmente infestado. En uno de los establecimientos, la formulación en estudio, aplicada por el metodo spot on demostró una eficacia en el control de Ctenocephalides sp. del 98,43% al las 24 horas posteriores al tratamiento y del 99,82% de eficacia al día +2 post-tratamiento, a partir del día +3 presentó un 100% de eficacia, la que se mantuvo durante los 32 días de duración del ensayo. En el otro establecimiento, se trataron 20 caninos mestizos, naturalmente infestados con garrapatas, y la misma formulación aplicada en forma de spot on, demostró una eficacia, en el control de Rhipicephalus sanguineus del 97,76% el primer día posttratamiento y del 98,86% el segundo día post-tratamiento. A partir del tercer día y hasta el día 28 días de observación, presentó una eficacia del 100%. A pesar de que el día 32 la eficacia disminuyó al 98,07% aún se mantuvo en un buen nivel. Ambos grupos fueron comparados con animales testigos, los que se mantuvieron parasitados con pulgas y garrapatas durante los 32 días de duración del ensayo.

2 INTRODUCCION: Las pulgas y garrapatas se han convertido en un verdadero flagelo para la población canina, en nuestros días. Si tenemos en cuenta los cambios ambientales y la modificación de condiciones habitacionales y costumbres sociales a que son sometidas las mascotas las que favorecen el desarrollo y difusión de un número creciente de ectoparásitos, podremos comprender mejor el porque del aumento de ambas parasitosis. Además del daño primario que producen estos ectoparásitos sobre perros y gatos, debemos tener presente que son vectores, transmisores de enfermedades como la Babesiosis, la Erlichiosis o la Hepatozonosis, enfermedades que año a año incrementan su prevalencia dentro de nuestra población canina, y adicionalmente Dipylidium caninum cumple parte de su ciclo en la pulga. El control por parte del médico veterinario, de pulgas y garrapatas, así como de moscas y mosquitos se ha convertido hoy en prioritario para la prevención de enfermedades sistémicas que ocasionan a los animales mucho más daño que el que provocan los propios vectores, incluso pueden ocasionar la muerte del animal y hasta la propención a ciertas zoonosis como la Enfermedad de Lyme, la Leishmaniosis, etc. Por ello la necesidad de desarrollar nuevas herramientas terapéuticas que logren un mayor control contra estos ectoparásitos tanto en su ciclo biológico sobre el animal como así también sobre el ambiente, entendiéndose que pueden reformularse principios existentes ajustándose combinaciones y/o dosificaciones, además de investigar nuevas drogas. Esto determinó la combinación de tres principios activos como el Imidacloprid por su excelente efecto insecticida, contra pulgas, piojos y moscas, la Permetrina por su acción garrapaticida, insecticida y repelente de moscas, mosquitos y flebotomus como la (Lutzomya longipalpis), vector de la leishmania en América, sumando el Butóxido de piperonilo, que por sí solo no tiene efecto insecticida, pero se comporta con un sinergizador del efecto de piretrinas, piretroides y carbamatos. El Imidacloprid, derivado de las cloro nicotinil guanidinas, aplicado en los caninos por aspersión o bien por el método spot on, ha demostrado ser un excelente pulguicida y mosquicida al bloquear los receptores nicotínicos del parásito, no permite la transmisión nerviosa del mismo, ocasionando parálisis y posteriormente la muerte. Posee además sobre las pulgas y moscas chupadoras, un poderoso efecto antifeeding lo que significa que ante el menor contacto del parásito con el principio activo, el parásito sufre una inmediata paralisis de su sistema succionador, no pudiendo picar al animal protegido con Imidacloprid. Numerosos trabajos demuestran una acción larvicida ambiental contra larvas de pulgas por la descamación de restos de piel conteniendo el principio activo. El imidacloprid es un potente insecticida que actua por contacto sobre pulgas, moscas y mosquitos. La Permetrina es una sustancia química sintética que se usa mundialmente como insecticida y acaricida, así como repelente de insectos. Pertenece a la familia de

3 compuestos denominados piretroides cuyo mecanismo de acción es la neurotoxicidad por prolongación de la activación de los canales de sodio causando una despolarización sostenida. No surte efectos sobre las neuronas de mamíferos ni aves, por lo que tiene poca toxicidad con la excepción de reacciones de hipersensibilidad en mamíferos, incluyendo los seres humanos. La permetrina, igual que otros piretroides, imita en su acción plaguicida al piretro natural, sustancia que se comenzó a obtener del crisantemo a partir de El primer piretroide, la aletrina, se creó en un laboratorio en Desde entonces se han inventado más de mil piretroides sintéticos. Estas sustancias químicas se produjeron en abundancia con el predicamento de que eran no tóxicos o menos tóxicos que los plaguicidas organoclorados, organofosforados y carbamatos. Eso explica, en parte, que el uso de la permetrina para controlar insectos se haya extendido en una gran variedad de cultivos, en jardines y parques, en el interior de las viviendas, en la actividad ganadera e, incluso, directamente en los seres humanos. La permetrina es un piretroide de tercera generación. Se utiliza principalmente para matar insectos, como pulgas, garrapatas, piojos, arañas y orugas, como también para repeler una amplia gama de insectos como moscas, mosquitos y flebotomos. Puede ocasionar reacciones de hipersensibilidad en mamíferos, incluyendo a los seres humanos. Aún siendo uno de los piretroides con menor acción irritativa sobre la piel de los caninos, de toda la familia de piretroides. Es el piretroide aprobado para uso animal más extendido en el mundo. Está disponible en forma de aerosol para aplicar sobre los animales, como también en forma de baños, champúes, gotas para uso spot on o pour on, solución de unción y polvo para ser aplicado en perros, caballos, vacunos y porcinos en el control de pulgas, garrapatas, moscas y mosquitos. Como más arriba mencionáramos el butóxido de piperonilo (BOP) es un sinérgico de pesticidas. Por sí mismo no tiene propiedades pesticidas. Sin embargo, cuando se añade a compuestos pesticidas, tales como con los insecticidas; piretrina, piretroides, y carbamatos, su potencia es incrementada considerablemente. El butóxido de piperonilo es un potente inhibidor del Citocromo P450. Esta familia de enzimas son las que actuan en los mecanismos de detoxificación de muchos pesticidas. Inhibiendo los mecanismos de detoxificación permite que las concentraciones del insecticida dentro del organismo sea mayor ya que impide su metabolización y permanezca más tiempo dentro del cuerpo del insecto u organismo a eliminar. El butóxido de piperonilo es moderadamente estable, y es un derivado semisintético del safrol. En resumen, la combinación de estos tres activos combinados en formulación spot on aquí estudiada apunta a combatir pulgas, garrapatas, piojos, moscas y repeler mosquitos y flebotomos.

4 MATERIALES Y METODO: Los trabajos se llevaron a cabo en dos establecimientos con alta densidad de población canina (refúgios) pertenecientes: uno a la localidad de Tortuguitas (Refúgio Juan Morell) (ensayo pulgas) y el otro al partido de Quilmes (Sadac), (ensayo de garrapatas), ubicados en la Provincia de Buenos Aires. Ambos establecimientos contaban con caniles que permitían el agrupamiento de los animales, los que a su vez eran identificados por números en chapa identificatoria adosada a un pretal. Los pisos eran de cemento y ambos establecimientos contaban con areas de recreo de tierra y cesped. En el ensayo N 1, establecimiento (Juan Morell) se trabajó con un total de 30 animales con alta parasitación de pulgas (Ctenocephalides sp.) de los cuales 20 caninos fueron tratados y 10 caninos se utilizaron como grupo testigo. Todos los animales eran mestizos de diferente sexo, edad y largo de pelaje. En el ensayo N 2, establecimiento (Sadac) se trabaj ó con un total de 30 animales con alta parasitación de garrapatas (Riphicephalus sangineus), de los cuales 20 caninos fueron tratados y 10 caninos se utilizaron como grupo testigo. Todos los animales eran mestizos de diferente sexo, edad y largo de pelaje. El producto en estudio posee la siguiente formula cualicuantitativa: Imidacloprid 11,40 g, Permetrina 53,50 g, Butóxido de piperonilo 1 g y N-metil-2 pirrolidona c.s.p. 100 ml La dosificación administrada a los animales fue de 1 ml de la formulación Spot on, cada 10 kg de peso (rango mínimo de dosificación). Por lo tanto cada animal recibió una dosis de Imidacloprid de 11,4 mg/kg de peso, Permetrina de 53,5 mg/kg y Butóxido de piperonilo 1 mg/kg. El sitio de aplicación del producto fue en la región de la cruz, sin extenderse de esta hacia el lomo, separando el pelaje, dejando la piel expuesta y colocando la solución en contacto con la misma. A lo largo de los 32 días de duración del ensayo se fue examinando la zona de aplicación del producto, en cada animal tratado, no habiendo podido constatarse ningún tipo de reacción o irritación local.

5 A) Método de recuento de pulgas: Para el recuento de pulgas tanto en los animales tratados como en los testigos se utilizó el Método de Dryden (1994), el cual consiste en la determinación de distintas áreas sobre el cuerpo del canino: 1- región de la nuca, 2-línea media dorsal, 3- región lumbar, 4-región lateral anterior derecha, 5- región lateral anterior izquierda, 6 región inguinal. El recuento se realiza en forma visual, separando el pelaje y contando las pulgas, solo 1 minuto por área. La sumatoria de las seis areas es multiplicada por un factor de corrección de 4,3. B) Método de recuento de garrapatas: Se revisó todo el cuerpo del animal, prestando especial atención a los pabellones auriculares, tabla del cuello y margen inferior del mismo, cara interna de las extremidades, región perianal y espacios interdigitales. Se consideró el número total de formas parasitarias halladas, tanto teleoginas ovigeras como también larvas y ninfas. En ambos trabajos se revisaron los animales y se recontaron pulgas y garrapatas de los animales tratados y testigos los días -1, 0, +1, +2, +7, +14, +21, +28 y +32. C) Método de evaluación de los resultados: Pulgas: Para evaluar la eficacia y el poder residual del producto contra pulgas, se recurrió a la fórmula de Dryden: NPA-NPD x 100= porcentaje de eficacia NPA Donde: NPA = Promedio del número de pulgas antes del tratamiento NPD = Promedio del número de pulgas post-tratamiento

6 Garrapatas: Para evaluar la eficacia y el poder residual del producto contra garrapatas se recurrió a la fórmula de Henderson & Tilton: 100 (100 x promedio de garrapatas del lote tratado) x promedio garrapatas lote testigo pre-tratamiento promedio garrapatas lote testigo promedio garrapatas lote tratado pre-tratamiento En los dos establecimientos se trabajó con grupos testigos de animales sin tratamiento cuya parasitación se detalla en anexos.2 y 4 Ninguno de los animales en estudio recibió medicación alguna durante el transcurso de la prueba ni se realizó en las instalaciones aplicación de ningún insecticida y/o acaricida de acción ambiental, habiéndose constatado que tampoco se lo hubiera hecho en los treinta días previos para descartar cualquier tipo de reacción residual. RESULTADOS: El detalle de los resultados puede observarse y analizarse en anexos (Tabla N 1, N 2, N 3 y N 4). El producto en estudio demostró tener una eficacia como pulguicida del 98,43% el primer día post-tratamiento y del 99,82% el segundo día. Al día + 7 presentó una eficacia del 100%, la que se mantuvo hasta el día + 32, fecha en que se dío por concluido el ensayo. Ver tabla N 1 La eficacia garrapaticida obtenida en el ensayo N 2 fue del 97,76% el primer día posttratamiento, el segundo día, la eficacia fue del 98,86%. A partir del tercer día comprobamos un 100% de eficacia que se extendió hasta el día + 28, donde observamos una reducción de la misma al 98,07% A pesar de que el día +32, la eficacia disminuyó al 98,07% aún se mantuvo en un buen nivel, dandose por concluida la prueba. Ver Tabla 3 Las garrapatas observadas al tercer día post-tratamiento, eran todas teleoginas ovigeras muertas que no alcanzaron a desprenderse de los animales sobre todo en los perros de pelaje largo, lo que seguramente determinó una dispersión mas lenta del producto sobre el cuerpo de los animales. En ambos casos los grupos testigos sin tratamiento se mantuvieron con una infestación elevada de pulgas y garrapatas, superior o igual a la infestación inicial. Ver Tabla 2 y 4

7 % Eficacia contra pulgas % Eficacia contra pulgas 99, ,43 DIA 1 DIA 2 DIA 7 DIA 14 DIA 21 DIA 28 DIA 32 % Eficacia contra garrapatas % Eficacia contra garrapatas ,86 97,76 98,07 DIA 1 DIA 2 DIA 7 DIA 14 DIA 21 DIA 28 DIA 32

8 CONCLUSIONES: La eficacia y el poder residual del producto estudiado fueron excelentes y la leve reinfestación de garrapatas al día 32 post-tratamiento, comparada con la infestación de los grupos testigo sin tratar, nos permite concluir que la formulación en estudio sobre los animales presenta una muy buena acción ectoparasiticida que se mantuvo durante los 32 días en que duró el estudio. Como dato a destacar, en la prueba N 1 fue llamat ivo el poderoso efecto de volteo él que no es común observar en otros productos similares- que lograba en pocas horas liberar de pulgas a la totalidad de los animales tratados. La persistencia y eficacia del producto permite recomendar su aplicación cada 4 semanas en el caso de garrapatas y cada 30 días en pulgas para asegurar máxima efectividad. NOTA: El producto testeado por los autores, es una formulación perteneciente al Laboratorio GREFMAYER N inscripción SENASA Dr Leonardo Sepiurka Dr. Fernando Doti