VI TALLER DE SEGUIMIENTO TÉCNICO DE PROYECTOS FONTAGRO
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- Samuel Acuña Sánchez
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1 Fundamentos para el desarrollo de estrategias de control biológico del perforador del fruto Neoleucinodes elegantalis (Guenée) (Lepidoptera: Crambidae) en frutas solanáceas Andinas exóticas VI TALLER DE SEGUIMIENTO TÉCNICO DE PROYECTOS FONTAGRO 15 al 17 de Junio de 2011 Cochabamba, Bolivia
2 NUEVO CONSORCIO
3 EJECUTORES Investigador Líder: Ana Elizabeth Díaz Montilla Entomóloga CORPOICA Correo electrónico: Coejecutor: Gerardo José Gallego Laboratorio marcadores moleculares y genómica Laboratorio de Biotecnología CIAT Correo electrónico: g.gallego@cgiar.org Coejecutor: Wilson Vásquez, Líder Programa Nacional de Fruticultura, INIAP Ecuador Correo electrónico: wilovasquez@yahoo.com
4 ANTECEDENTES Control químico generalizado Carbamatos, organofosforados y piretroides Categoría toxicológica I Control químico es ineficiente por el hábito de la larva (Madrugada) Deterioro del ambiente Afecta la salud humana Residuos tóxicos (Rechazo Pulpa Canadá) Altera la interacción enemigos naturales insecto plaga Incremento en costos de producción (20-25%)
5 ANTECEDENTES Demanda mundial de frutas exóticas Colombia- MADR, pequeños productores hectáreas toneladas/año Ecuador hectáreas de naranjilla
6 N. elegantalis Principal insecto plaga de frutas solanáceas. Causa pérdidas del 60.3% en cosecha. Plaga cuarentenaria para varios países
7 Distribución geográfica Neoleucinodes elegantalis Rango altitudinal: msnm (Capps, 1948) (Gallego, 1960; ICA , 1984, 1988, 1993)
8 ES URGENTE Buscar opciones diferentes y/o complementarias al control químico CONTROL BIOLÓGICO ES UNA ALTERNATIVA con posibilidades de éxito Estudios básicos de bioecología
9 OBJETIVO GENERAL Desarrollar conocimientos, metodologías y técnicas que permitan implementar estrategias de control biológico de Neouleucinodes elegantalis en cultivos de lulo y tomate de árbol en Colombia y Ecuador
10 OBJETIVOS ESPECÍFICOS 1. Determinar razas, biotipos o subespecies de N. elegantalis en diferentes cultivos solanáceos 2. Validar una técnica de recuperación del parasitoide Copidosoma sp. en cultivos de tomate de árbol. 3. Desarrollar una metodología para la producción masiva del parasitoide Lixophaga sp. para ser utilizado en cultivos de lulo. 4. Identificar plantas asociadas a cultivos de lulo y tomate de árbol con el fin de manejar el hábitat para conservar y facilitar la actividad parasítica de los principales enemigos naturales de N. elegantalis. 5. Divulgar los resultados de la investigación
11 OBJETIVO 1 Actividad 1.1. Colectas para obtener adultos de Neoleucinodes en áreas geográficas de Ecuador (CorpoIniap) y en el Dpto. de Cauca en Colombia (CORPOICA) Actividad 1.2. Análisis morfológico de poblaciones de N. elegantalis (CORPOICA) Actividad 1.3. Extracción de ADN. Análisis molecular de poblaciones de N. elegantalis (CIAT) y ajuste de Método Barcoding (CIAT) para caracterización molecular Actividad 1.4. Compatibilidad reproductiva entre poblaciones de Neoleucinodes (CORPOICA y MIZA) Actividad 1.5. Uso de la feromona sexual de N. elegantalis en ambientes silvestres para verificar posibles diferencias entre biotipos (CORPOICA y MIZA)
12 Análisis molecular de poblaciones de N. elegantalis y ajuste de Método Barcoding. No se ha logrado obtener gran numero de amplificaciones del gen COI y los espaciadores ITS por que se tuvieron dificultades, al inhibirse la PCR por efecto de contaminantes en 40 muestras Se espera mejorar la obtención de ADN de buena calidad mediante el. kit GF-1 Tissue DNA extraction, pero se ha tenido contratiempos en su adquisición
13 OBJETIVOS ESPECÍFICOS 1. Determinar razas, biotipos o subespecies de N. elegantalis en diferentes cultivos solanáceos 2. Validar una técnica de recuperación del parasitoide Copidosoma sp. en cultivos de tomate de árbol. 3. Desarrollar una metodología para la producción masiva del parasitoide Lixophaga sp. para ser utilizado en cultivos de lulo. 4. Identificar plantas asociadas a cultivos de lulo y tomate de árbol con el fin de manejar el hábitat para conservar y facilitar la actividad parasítica de los principales enemigos naturales de N. elegantalis. 5. Divulgar los resultados de la investigación
14 Recuperación Copidosoma sp msnm 70% parasitismo natural
15 TRATAMIENTOS Bio M.I. M.I. (fo) Sector Llanogrande, corregimiento de San Clemente, Municipio Guática, Risaralda: tres fincas, tomate árbol, Cajamarqueño Diseño: BCA Parcela Exp.: 36 arboles Parcela Útil: 16 arboles Variables % de infestación Parasitoides recuperados Relación B/C 4 PM en adelante Tiametoxam Lambdacihalotrina (Engeo ) Emamectina Benzoato (Proclaim ) Methoxyfenozide (Intrepid ) Bacillus thuringiensis Dispersante pegante: (Break thru) Tes Testigo agricultor Recolección de frutos afectados al inicio del ensayo 9 AM Metomil Cipermetrina
16 PORCENTAJE DE DAÑO POR N. elegantalis EN TOMATE DE ÁRBOL 2010: Ola Invernal: Evaluación previa de daño: 13%
17 M.I.(fo) M.I. Bio Tes M.I.(fo) M.I. Bio Tes M.I.(fo) M.I. Bio Tes M.I.(fo) M.I. Bio Tes M.I.(fo) M.I. Bio Tes # FRUTOS PERFORADOS INFESTACIÓN POR N. elegantalis EN TOMATE INFESTACION DE ÁRBOL 180,0 160,0 140,0 120,0 100,0 80,0 60,0 40,0 20,0 0,0 Abril - Mayo Junio - Julio Agosto - Septiembre Septiembre Octubre - Noviembre Octubre 245 mm 773 mm 515 FECHA mm 663 mm Noviembre- Diciembre
18 PARASITISMO DE LARVAS DE N. elegantalis POR Copidosoma sp. EN TOMATE DE ÁRBOL PERIODO Abril - Mayo Junio - Julio Agosto - Septienbre Octubre - Noviembre TRATAMIENTO PARASITISMO PROMEDIO M.I. 26,80% Bio 30,10% M.I. 26% Bio 27,80% M.I. 27,60% Bio 32,10% M.I. 35,60% Bio 37,60%
19 Bajo las condiciones del estudio se presentaron muy bajos porcentajes de daño (0,16% a 5,16%) por N. elegantalis, que no permitieron valorar la eficiencia de la técnica de recuperación del parasitoide Copidosoma sp. en el control de N. elegantalis. La practica de recolección de frutos afectados por N. elegantalis influye positivamente en la disminución de los niveles de daño subsecuentes. Los niveles de daño estuvieron severamente afectados por las condiciones climáticas reinantes durante el estudio. No obstante lo anterior, los porcentajes de parasitismo de N. elegantalis por Copidosoma sp. oscilaron entre 26% y 35,6% Bajo las condiciones del estudio, el uso de insecticidas bioracionales no parece influenciar negativamente los niveles de parasitismo natural de Copidosoma sp. sobre N. elegantalis
20 OBJETIVOS ESPECÍFICOS 1. Determinar razas, biotipos o subespecies de N. elegantalis en diferentes cultivos solanáceos 2. Validar una técnica de recuperación del parasitoide Copidosoma sp. en cultivos de tomate de árbol. 3. Desarrollar una metodología para la producción masiva del parasitoide Lixophaga sp. para ser utilizado en cultivos de lulo. 4. Identificar plantas asociadas a cultivos de lulo y tomate de árbol con el fin de manejar el hábitat para conservar y facilitar la actividad parasítica de los principales enemigos naturales de N. elegantalis. 5. Divulgar los resultados de la investigación
21 Parasitoide de larvas (Diptera: Tachinidae) Lixophaga sp. C/marca: msnm Caldas: msnm Valle: msnm
22 OBJETIVO 3 Actividad 3.1 Identificación precisa de la especie de Lixophaga a usar. Actividad 3.2. Establecimiento de una cría masal de Galleria melonella. Actividad 3.3. Establecimiento de una cría masal de Lixophaga sp. en Galleria melonella. Actividad 3.4. Desarrollo de criterios y sistemas para mantener la calidad de la cría de Lixophaga.
23 1. Macho setas orbitales visibles Tórax de color amarillo con manchas negras claramente distinguibles. Abdomen alargado y angosto. Clasper o surstylus (sust) alargado, carácter diferencial de la especie. Genitalia del macho 2. Hembra Cuerpo de mayor tamaño. Tórax de color amarillo con manchas negras pequeñas poco distinguibles Abdomen ancho y abultado con manchas amarillas más notorias 5.3 mm 5.6 mm.
24 OBJETIVO 3 Actividad 3.1 Identificación precisa de la especie de Lixophaga a usar. Actividad 3.2. Establecimiento de una cría masal de Galleria melonella. Actividad 3.3. Establecimiento de una cría masal de Lixophaga sp. en Galleria melonella. Actividad 3.4. Desarrollo de criterios y sistemas para mantener la calidad de la cría de Lixophaga.
25 Se mantiene una cría de Galleria (hospedero de cría) en dieta artificial con un suministro permanente de larvas de último instar para los ensayos de parasitación con Lixophaga días 18 días 17.2 días Unidades de cría de larvas de Galleria 24 días
26 OBJETIVO 3 Actividad 3.1 Identificación precisa de la especie de Lixophaga a usar. Actividad 3.2. Establecimiento de una cría masal de Galleria melonella. Actividad 3.3. Establecimiento de una cría masal de Lixophaga sp. en Galleria melonella. Actividad 3.4. Desarrollo de criterios y sistemas para mantener la calidad de la cría de Lixophaga.
27 Experimentos para evaluar copula en laboratorio Relaciones 1 :1 Algodón con solución azucarada 2 :1 3 :1 1 :3 1 :3 Recipientes y cámara oscura de copula NOTA: Contemplado evaluar diferentes dietas (polen, pescado descompuesto, mermelada de mora, etc.) y ambientes (Jaulas) para la copula: Buscando la maduración de huevos
28 Se obtuvo copula sin maduración de huevos en las relaciones 1 : 1 y 2 : 1 Hembra sin copular, oocitos intactos en ovarios Hembra copulada
29 Cria de Lixophaga sp.: Parasitación en laboratorio
30 Parasitismo de Lixophaga sobre N. elegantalis en campo y sobre Galleria en laboratorio Porcentaje de parasitismo ,65 27,56 16,08 Restrepo (cultivo 2) Anserma (Cultivo 1) Laboratorio Localidades El parasitoide acepta, a Galleria como hospedero de cría.
31 OBJETIVO 3 Actividad 3.1 Identificación precisa de la especie de Lixophaga a usar. Actividad 3.2. Establecimiento de una cría masal de Galleria melonella. Actividad 3.3. Establecimiento de una cría masal de Lixophaga sp. en Galleria melonella. Actividad 3.4. Desarrollo de criterios y sistemas para mantener la calidad de la cría de Lixophaga.
32 Parámetros de Calidad Localidad Peso de puparios (g.) Proporción de sexos : % de emergencia de adultos Anserma (Cultivo 1) : Restrepo (Cultivo 2) : Laboratorio :1 88.8
33 OBJETIVOS ESPECÍFICOS 1. Determinar razas, biotipos o subespecies de N. elegantalis en diferentes cultivos solanáceos 2. Validar una técnica de recuperación del parasitoide Copidosoma sp. en cultivos de tomate de árbol. 3. Desarrollar una metodología para la producción masiva del parasitoide Lixophaga sp. para ser utilizado en cultivos de lulo. 4. Identificar plantas asociadas a cultivos de lulo y tomate de árbol con el fin de manejar el hábitat para conservar y facilitar la actividad parasítica de los principales enemigos naturales de N. elegantalis. 5. Divulgar los resultados de la investigación
34 OBJETIVO 4 Actividad 4.1 Establecimiento de especies vegetales predominantes en los cultivos. Actividad 4.2 Determinación de la composición de especies vegetales. Actividad 4.3 Observación directa en campo de insectos adultos (himenópteros y dípteros) parasitoides de N. elegantalis que se encuentren sobre especies vegetales identificadas.
35 MÉTODO PROPUESTO POR Matteucci y Colma Tomate de árbol y Lulo: Guatica (Risaralda) y Anserma (Caldas) Cuadrante de 1m 2 utilizado para la determinación del área mínima de la comunidad
36 Área mínima: Evaluación de tres cuadrantes. Tomate de árbol Compositae (Ageratum conyzoides, Bidens pilosa, Jaegeria hirta, Ageratum sp. y Conyza bonaeriensis): % Cobertura: 0.43 y 22.5% Poaceae (Hypochoeris radicata, Holcus lanatus y Pennisetum clandestinum): % Cobertura: 0.56 y 21,51%
37 Lulo Compositae (Bidens pilosa, Jaegeria hirta, Galinsoga parviflora, Emilia sonchifolia y Coniza bonaeriensis): % Cobertura: 3.4 y 21.4% Poaceae (Chloris radiata): % Cobertura 15.8%
38 Arvenses encontradas en cultivos de tomate de árbol y lulo. (A) Ageratum conyzoides. (B) Hypochoeris radicata. (C) Holcus lanatus. (D) Ageratum sp. (E) Jaegeria hirta. (F) Bidens pilosa. (G) Galinsoga parviflora. (H) Emilia sonchifolia. (I) Conyza bonaeriensis. (J) Chloris radiata. (K) Pennisetum clandestinum
39 OBJETIVO 4 Actividad 4.1 Establecimiento de especies vegetales predominantes en los cultivos Actividad 4.2 Determinación de la composición de especies vegetales. Actividad 4.3 Observación directa en campo de insectos adultos (himenópteros y dípteros) parasitoides de N. elegantalis que se encuentren sobre especies vegetales identificadas.
40 OBJETIVOS ESPECÍFICOS 1. Determinar razas, biotipos o subespecies de N. elegantalis en diferentes cultivos solanáceos 2. Validar una técnica de recuperación del parasitoide Copidosoma sp. en cultivos de tomate de árbol. 3. Desarrollar una metodología para la producción masiva del parasitoide Lixophaga sp. para ser utilizado en cultivos de lulo. 4. Identificar plantas asociadas a cultivos de lulo y tomate de árbol con el fin de manejar el hábitat para conservar y facilitar la actividad parasítica de los principales enemigos naturales de N. elegantalis. 5. Divulgar los resultados de la investigación
41 Dos Artículos sometidos a publicación Revista SOCOLEN: Uso del código de barras de ADN para identificar posibles biotipos del perforador del fruto Neoleucinodes elegantalis (Guenée) (Lepidoptera: Crambidae), una importante plaga de frutas solanáceas Andinas Autores: Harold G. Suárez-Baron, Gerardo Gallego Sánchez, Ana Elizabeth Díaz y Joe Tohme. Entrecruzamiento de poblaciones Neoleucinodes elegantalis (lepidoptera: crambidae) provenientes de solanum spp. (Solanaceae) Autores: Nathalie Baena-Bejarano, Ana Elizabeth Díaz, James Montoya-Lerma. Se ha enviado dos resúmenes para participar en el XXXVIII Congreso de la Sociedad Colombiana de Entomología SOCOLEN, evento que se realizará en el mes de julio de 2011 en Manizales. Se hará la presentación oral de los trabajos: (1). Variabilidad morfométrica de Neoleucinodes elegantalis Gueneé (Lepidoptera: Crambidae): perforador de fruto de las solanáceas de importancia económica (2). Avances sobre la cría de Lixophaga n sp. parasitoide de larvas del perforador del fruto Neoleucinodes elegantalis (Lepidoptera: Crambidae) en cultivos de lulo Se escribió el capítulo ARTRÓPODOS PLAGA DEL LULO DE CASTILLA para la publicación Tecnología para el Cultivo del Lulo, la cual recibirá los créditos de Fontagro y el Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural (MADR) de Colombia.
42 PARTICIPANTES EN EL PROYECTO Alma Solís - Ph. D.,Investigadora líder SEL-USDA Nicolás Jaramillo - Ph. D, Profesor Universidad de Antioquia James Montoya - Ph. D, Profesor Universidad del Valle Francisco Yepes - M. Sc. Profesor Universidad Nacional de Colombia sede Medellín Tito Bacca - Ph.D, Profesor Universidad de Nariño Pablo Tamayo - M. Sc. Fitopatólogo CORPOICA La Selva Gilberto Higinio - Auxiliar de Investigación, CORPOICA La Selva Héctor Jaime Salazar - CIAT Micke Salazar - CIAT Harold Suárez - CIAT Viviana Obando - I.A, Estudiante Maestría UNAL sede Medellín Natalie Baena - Estudiante Biología Universidad del Valle Wilmar Colorado - Estudiante Agronomía, UNAL sede Bogotá Derían Delgado - Estudiante Agronomía, Universidad de Nariño Jibram González - I.A, Estudiante Maestría UNAL Sede Medellín Leidy Johana Zuluaga Torres Estudiante Agronomía, Universidad de Caldas Diana Marcela Zuluaga Torres Estudiante Agronomía, Universidad de Caldas David Sanín Botánico, Docente, Universidad de Caldas Luis Fernando Vallejo Espinosa Entomólogo, Docente, Universidad de Caldas
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