Estudio de alternativas para mejorar los porcentajes de preñez en protocolos de IATF en bovinos
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- Veronica Carrizo Pinto
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1 Estudio de alternativas para mejorar los porcentajes de preñez en protocolos de IATF en bovinos EEA COLONIA BENÍTEZ Augusto G. Schulz
2 Estudio de alternativas para mejorar los porcentajes de preñez en protocolos de IATF en bovinos. Cod. Prod.: 3913-Cod. Act.: Prieto, P.N.; Stahringer, R.; Vispo, P. Introducción En la actual situación de la ganadería argentina se exige a los productores máxima eficiencia para garantizar el retorno económico. En este contexto, la optimización de la eficiencia reproductiva es uno de los principales factores que contribuyen para mejorar las ganancias en los sistemas de cría (Bó, 2002; Baruselli, 2004). Por ello la capacidad de inducir y manipular el ciclo estral mediante los diferentes protocolos de sincronización presenta numerosas ventajas, particularmente cuando se realizan en conjunto con la inseminación artificial (Odde, 1990). El principal objetivo de la implementación de un programa de inseminación artificial (IA) en una ganadería dedicada a la producción de carne, sería el de producir un progreso genético en el establecimiento en corto tiempo (Cutaia et al., 2004). A pesar de esto, menos del 1 % del rodeo bovino de los países del Mercosur está incluido en estos esquemas. El desarrollo de la IA en ganado de carne ha sido más lento debido a problemas de la detección de estro y el manejo de grandes rodeos. Pero las nuevas técnicas de sincronización del celo y la ovulación están ayudando a la difusión de la técnica en estos rodeos (IRAC, 2008). Actividad 1: GnRH vs BE como sincronizadores de la onda folicular en protocolos de IATF. Introducción El reclutamiento de una nueva onda folicular es el primer paso en un protocolo de IATF. Esto se consigue con la combinación de una fuente de progesterona más benzoato de estradiol o GnRH (acetato de gonadorelina). En el ganado de carne en Sudamérica el tratamiento más utilizado es con benzoato de estradiol, sin embargo, existen prohibiciones de uso de dicho compuesto en ciertos lugares como EEUU y Europa. Esto motiva la necesidad de realizar estudios de protocolos que suplanten la utilización de derivados estrogénicos por aquellos Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria EEA Colonia Benítez 2
3 que no presenten prohibiciones y evaluar la respuesta en el ganado de carne cruza cebú. La aplicación de análogos de la GnRH induce un reinicio de la onda folicular a las horas de su aplicación (Martínez et al., 1997) comparado con el benzoato que induce el inicio de la onda entre horas después de su aplicación (Bo et al., 1995). Esto podría permitir llegar al momento del retiro del dispositivo con un mayor desarrollo folicular. Objetivo: Evaluar el reemplazo de una sal de estradiol (benzoato de estradiol; BE) por la GnRH como sincronizador de la onda folicular al inicio de un protocolo de sincronización de celo e IATF en ganado de carne cruza cebú. Materiales y métodos La experiencia se llevó a cabo en la EEA Colonia Benítez utilizando 61 vaquillas tipo Braford de 22 a 26 meses de edad. Al inicio del protocolo (03/10/16) se dividieron en forma aleatoria en dos grupos. El protocolo que se utilizó fue el siguiente: Día 0 = Colocación de un dispositivo intravaginal bovino (DIB) de 0,5 g de progesterona + tratamiento con BE (2 ml; 31 vaquillas) o GnRH (acetato de gonadorelina; 2 ml; 30 vaquillas). En todos los animales se determinó el peso vivo (PV; kg), condición corporal (CC; escala de 1 a 9), escore genital (SG; escala de 1 a 5 de Anderson), diámetro del folículo ovárico mayor (DFM) y presencia de cuerpo lúteo (CL) mediante ultrasonido. Día 4 = En todos los animales se determinó el diámetro del folículo ovárico mayor (DFM) y presencia de cuerpo lúteo (CL) mediante ultrasonido. Día 8 = Retiro del DIB + 2 ml de prostaglandina + 1 ml de cipionato de estradiol en todas las vaquillas. Asimismo, se determinó el diámetro del folículo ovárico mayor (DFM) y presencia de cuerpo lúteo (CL) mediante ultrasonido. Día 10 = IA a las 48 hs del retiro del DIB y determinación del DFM preovulatorio en todas las vaquillas. Día 20 = Inicio del servicio con toros. Día 40 = Ecografía para diagnóstico de gestación a los 35 días de la IA (diagnóstico de preñez a la IATF). Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria EEA Colonia Benítez 3
4 Las variables cuantitativas se analizarán mediante ANOVA y las cualitativas bajo distribución de X 2. SAS 9.2. Resultados Los grupos de tratamientos no eran diferentes entre sí al inicio del experimento para las variables analizadas (Tabla 1). Tabla 1. Variables de crecimiento y reproductivas (medias±ee) al inicio del protocolo de sincronización de celo e IATF en vaquillas cruza cebú de meses. Tratamientos PV (kg) inicial CC inicial SG inicial % ciclicidad inicial BE 340±7,3 5,5±0,2 3,8±0,2 58 (18/31) GnRH 343±7,5 5,7±0,2 4,2±0,2 70 (21/30) Letras diferentes entre filas indican diferencias significativas (p 0,05) En la Tabla 2 se informan el tamaño del folículo dominante por tratamiento al momento de realizar la aplicación del DIB. Dicho folículo no presentaba un tamaño diferente entre grupos al Día 0. Por otra parte, el tamaño del folículo generado por la GnRH al día 4 y al día 8 de la onda fue estadísticamente mayor que el tamaño del folículo generado a partir del BE. El mayor tamaño del DFM al día 4 en el tratamiento GnRH, podría indicar una menor eficiencia de este tratamiento en el reinicio de la onda folicular. Sin embargo, estas diferencias se diluyen para el momento de la IA, ya que el DFM pre ovulatorio resultó igual entre tratamientos. Tabla 2. Evolución del tamaño del folículo ovárico mayor (dominante) a lo largo de la sincronización y porcentaje de preñez por tratamiento en vaquillas cruza cebú de meses. Tratamientos DFM inicial DFM día 4 DFM al DFM pre % de retiro ovulatorio preñez BE 7,5±0,4 6,2±0,4b 8,1±0,3b 9,5±0,4 58 (18/31) GnRH 8,3±0,5 7,8±0,4a 9,6±0,4a 10,1±0,4 43 (13/30) Letras diferentes entre filas indican diferencias significativas (p 0,05) En cuanto al porcentaje de preñez, la diferencia no fue estadísticamente significativa entre tratamientos. Sin embargo, el grupo que recibió BE al inicio de la sincronización arrojó 15 puntos más de preñez que el que recibió GnRH. Por otro lado, no hubo efecto de semen Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria EEA Colonia Benítez 4
5 utilizado en el resultado alcanzado, ya que el porcentaje de preñez por toro no difirió entre los dos utilizados (50 % Marcasilla vs 52 % Mateo). Tabla 3. Distribución de celo por tratamiento y su efecto sobre el diámetro del folículo preovulatorio y el porcentaje de preñez a la IATF. Tratamientos Celo % (n) DFO x Celo (mm) Preñez x Celo (%) Si No Si No BE 80,6 (25/31) 9, ,7 GnRH 70 (21/30) 10,7 8,8 38,1 55,6 La presentación de celo fue similar entre tratamientos. Las vaquillas que presentaron celo mostraron un mayor diámetro del folículo preovulatorio que aquellas que no lo manifestaron, como hemos observado en otros trabajos. Las vaquillas con manifestación de celo del tratamiento BE lograron una mayor preñez a la IATF que las que no lo presentaron, coincidiendo con lo observado en nuestros trabajos anteriores. Sin embargo, paradójicamente las vaquillas tratadas con GnRH que no presentaron celo mostraron un mayor porcentaje de preñez que las que sí lo presentaron. Esto podría relacionarse con el hecho de que el folículo preovulatorio de las vaquillas tratadas con GnRH presentara una menor fertilidad por no pertenecer a una nueva onda folicular, al no haberse reiniciado la onda folicular luego del tratamiento con GnRH como parece indicar el diámetro del folículo mayor al día 4. Tabla 4. Porcentaje de presencia de cuerpo lúteo en distintos días del protocolo por tratamiento y preñez. Presencia CL (%) Tratamientos Día 0 Día 8 Preñada Vacía Preñada Vacía BE 61,1 53,8 5,6 30,8 GnRH 76,9 64,7 38,5 23,5 En la Tabla 4 se muestra el porcentaje de CL al inicio de la sincronización y a la finalización del protocolo. Se observa una caída en el porcentaje de cuerpos lúteos en las vaquillas de ambos tratamientos, siendo esta merma más marcada en las vaquillas preñadas del tratamiento BE. Ninguna de las vaquillas tratadas con GnRH presentó un cuerpo lúteo nuevo Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria EEA Colonia Benítez 5
6 a la ecografía en el día 8. En el tratamiento BE, sólo 1 vaquilla (n=31; 3,2%) presentó un nuevo cuerpo lúteo al día 8. Según lo mencionado anteriormente, el reclutamiento de un nuevo pool de folículos en forma sincrónica en todas las hembras es el primer paso de un protocolo de IATF. Farmacológicamente esto puede ser realizado induciendo la ovulación del folículo dominante (acción preponderante de la GnRH) o la atresia del folículo (acción preponderante del benzoato de estradiol). En protocolos que usan GnRH para sincronizar la aparición de una nueva onda (por ejemplo, el Ovsynch), la inducción de la ovulación en un alto porcentaje de animales, es fundamental para obtener resultados satisfactorios; como se ha demostrado en el ganado lechero (Vasconcelos et al., 1999). La dinámica folicular de vacas en anestro y de las vaquillas pre púberes es caracterizada por varias ondas anovulatorias del folículo dominante, de manera tal que la desviación ocurre pero el folículo dominante no llega a sus etapas finales de desarrollo debido a una insuficiente frecuencia en los pulsos de hormona luteinizante (LH). Por lo tanto, la probabilidad de ovulación con el tratamiento de GnRH es baja en vacas que no están ciclando (Fernández et al., 2001). Además, las vacas en anestro que no ovulan al primer estímulo ovulatorio, pero que ovulan al segundo, probablemente sufran una luteólisis prematura porque la ovulación se produjo sin una exposición previa a progesterona. Aunque con el DIB se proporciona progesterona exógena para evitar la luteólisis prematura entre el primer y segundo estímulo ovulatorio, las vacas que no ovulan al primer estímulo ovulatorio no se sincronizan, reduciendo la probabilidad de éxito del protocolo. Los protocolos basados en la sincronización de la aparición de las ondas foliculares con progesterona más estradiol, fue el tratamiento más eficiente en vaquillas cruza cebú, que el basado en la sincronización aparición de las ondas foliculares con GnRH. Actividad 2: Efecto del momento de aplicación de prostaglandina sobre la tasa de preñez en vaquillas cruza cebú sometidas a un protocolo de IATF. Sistematización de los datos. Introducción En la región NEA el clima subtropical ha determinado que la mayoría de los rodeos de carne sean cruza cebú, debido a su mayor adaptación a las características ambientales (temperatura, calidad de forraje, ectoparásitos). Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria EEA Colonia Benítez 6
7 Sin embargo, este tipo de ganado presenta algunas particularidades en su fisiología reproductiva, como por ejemplo, una mayor sensibilidad a los niveles de progesterona. Meneghetti et al. (2009) demostraron que el tratamiento con agentes luteolíticos previo al retiro del DIB en hembras Bos indicus con cuerpo lúteo incrementa los porcentajes de preñez. Objetivo: Evaluar el efecto del momento de aplicación de la prostaglandina (48 h antes vs. inmediatamente después del retiro del DIB) sobre las tasas de preñez en vaquillas cruza cebú sometidas a un protocolo de sincronización de celo para inseminación a tiempo fijo. Materiales y métodos Se llevó a cabo la sistematización de los datos producidos a partir de una experiencia realizada en el año Dicha experiencia involucró a tres Estaciones Experimentales de INTA, Colonia Benítez, Corrientes y Reconquista, con la finalidad de evaluar los efectos de tratamientos con progestágenos en diferentes momentos de la IATF (inseminación artificial a tiempo fijo), sobre las tasas de preñez de hembras cruzas Bos taurus indicus x Bos taurus taurus. Para ello se utilizaron 254 vaquillas Braford con un índice de Condición Corporal (CC) promedio de 6±0,3 en la escala de 1 a 9. Estas se distribuyeron en 2 grupos experimentales según el día en que recibieron el tratamiento. El Día 0 se llevó a cabo un seguimiento ovárico mediante ecógrafo por vía transrectal y se aplicó un dispositivo intravaginal impregnado con 0,5 g de progesterona más una dosis de 2 mg de benzoato de estradiol por vía IM. El Día 7 se llevó a cabo una nueva ecografía para identificar la presencia o ausencia de Cuerpo Lúteo (CL) y tamaño folicular, y se diferenció a las hembras por corte de cola, se aplicó a un grupo de animales el tratamiento con 1 ml de prostaglandina (cloprostenol), (se identificaron mediante pintura), 1 ml de CPE (Cipionato de Estradiol) por vía IM y por último 1, 5 ml ecg (Novormon). El Día 9 luego de retirar el dispositivo intravaginal el resto de animales que no recibieron el tratamiento el día 7 lo hicieron el día 9, y 48 h posterior a la extracción de los dispositivos se inseminó a todo el lote. A los 35 días de la inseminación se procedió a la evaluación del lote, por medio de palpación rectal y ecografía transrectal, para verificar preñez. Resultados En los tres establecimientos las vaquillas alcanzaron el peso vivo promedio de entore entre 345 a 360 kg. Asimismo, la CC fue adecuada para el inicio de servicio, obteniéndose porcentajes de preñez general mayores al 50 % (57,2 % en la EEA Colonia Benítez, 53,1 % en la EEA Corrientes y 51,2% de EEA Reconquista). Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria EEA Colonia Benítez 7
8 Los porcentajes de preñez obtenidos por tratamiento fueron del 58% con los tratamientos de PG9SI y PG7SI, mientras que con los tratamientos PG7NO un 55% y el menor porcentaje fue de 42% PG9NO coincidiendo con el menor crecimiento folicular a la IATF. Al evaluar la relación entre el SG y el porcentaje de preñez en las vaquillas no hubo diferencias entre % de preñez entre puntos de escore genital; pero las vaquillas maduras (SG 4 y 5) al inicio de la temporada reproductiva, arrojaron tasas de preñez mayores ( 59 % a la IATF y 97 % final). La aplicación de PG 48 h antes del retiro de los dispositivos no mejoró el porcentaje de preñez en el grupo de animales que recibió este tratamiento. Estos resultados, sumados a la necesidad de realizar un encierre adicional para dicha aplicación, tornan a esta alternativa en no recomendable por el momento. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria EEA Colonia Benítez 8
Efecto de la dosis de P4 contenida en un dispositivo intravaginal con P4 y la inducción de lueólisis temprana.
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