ERA. Endometrial Receptivity Analysis
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- Dolores García Hernández
- hace 7 años
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1 ERA Endometrial Receptivity Analysis
2 ERA is a customized array to diagnose the receptivity status of the endometrium in the Window of Implantation (WOI) ERA es un array genético personalizado para diagnosticar el estado de receptividad del endometrio en la ventana de implantación 01
3 Test ERA The ERA assay consists on: El ensayo ERA consiste en: A proprietary microarray that quantifies the expression of 238 genes involved in endometrial receptivity. Un microarray exclusivo que cuantifica la expresión de 238 genes implicados en receptividad endometrial. A molecular tool based on gene expression to determine if the endometrium is receptive. Es una herramienta molecular basada en la expresión génica para determinar si el endometrio es receptivo. A informatic predictor that analyzes the gene expression data and classifies the endometrium as Receptive" or "Non Receptive with a sensitivity of and a specificity of Un predictor informático que analiza los datos de expresión génica y clasifica el endometrio como Receptivo o No Receptivo con una sensibilidad de y una especificidad de Patented in 2009: PCT/ES 2009/ Patentado en 2009: PCT/ES 2009/
4 Scientific Support EVIDENCIA CIENTÍFICA The development of this tool was published by Díaz-Gimeno et al., 2011 (Fertil Steril January; 95(1):50-60, 60.e1-15), and the accuracy and reproducibility of the ERA test was proven in Díaz-Gimeno et al., 2012 (Fertil Steril October; doi: /j.fertnstert ). Finally, its clinical applicability in patients with repeated implantation failures was demonstrated in Ruiz-Alonso et al., 2013 (Fertil Steril. 2013; submitted). A prospective, randomized study on the effectiveness of the ERA test in patients who have not received previous assisted reproduction treatments is presently underway. El desarrollo del array customizado ha sido publicado por Díaz-Gimeno et al, 2011 (Fertil Steril January; 95(1):50-60, 60.e1-15). Así mismo, su eficacia y consistencia se ha demostrado en el trabajo Díaz-Gimeno et al, 2012 (Fertil Steril October; doi: /j.fertnstert ). Finalmente su aplicabilidad clínica en pacientes con fallo de implantación se ha constatado en la publicación Ruiz-Alonso et al, 2013 (Fertil Steril. 2013; submitted). Actualmente se encuentra en proceso un estudio randomizado para evaluar su aplicabilidad en pacientes sin tratamientos previos de reproducción asistida. 03
5 Scientific Support EVIDENCIA CIENTÍFICA Receptive Receptivas Pre-receptive Pre-receptivas LH+3 LH+1 LH+5 LH+7 LH+9 Hierarchical clustering Agrupamiento jerárquico 04
6 Diagnostic Value VALOR DIAGNÓSTICO Endometrial Evaluation: Diagnose the state of the endometrium during the Window of Implantation and determine the time frame for embryo transfer. Evaluación endometrial: Diagnosticar el estado del endometrio durante la Ventana de Implantación y determinar el momento para la transferencia de embriones. Kappa value In a blinded study ERA classifies better than Noyes criteria: En un estudio ciego el ERA clasificó mejor que dos patólogos independientes siguiendo los criterios de Noyes: Pathologist 1 (P1) Pathologist 2 (P2) P1 vs P2 ERA ( ) ( ) ( ) ( ) Kappa value: Good Concordance Very Good Concordance Buena concordancia Muy buena concordancia Díaz-Gimeno et al., 2012 (Fertil Steril October; doi: /j.fertnstert ) 05
7 Biopsy BIOPSIA Natural cycle The biopsy must be taken on the 7th day after the LH surge (LH+7). LH surge can be determined in urine or serum once the follicle has reached 15 mm under ultrasound monitoring. Considering the peak of LH as day 0, seven days must be counted from that day. Hormone replacement therapy Biopsy will be taken on day P+5, assuming that the day of administration of Progesterone is day P+0. Ciclo natural La biopsia debe ser tomada en el séptimo día tras el pico de LH (LH+7). El pico de LH se puede determinar en orina o sangre una vez que el folículo ha alcanzado 15mm según se puede monitorizar por ecografía. Considerando el pico de LH como día 0, se contarán siete días a partir de ese momento. Ciclo sustituido (HRT) La biopsia se tomará en el día P+5, asumiendo que el día de la administración de progesterona es día P+0. ENDOMETRIUM ENDOMETRIO E 2 Días E 2 Days P 4 Días P 4 Days Controlled Ovarian Stimulation Biopsy can be taken on the next natural or HRT cycle. Ciclo estimulado La biopsia se puede tomar en el ciclo siguiente, natural o sustituido. NATURAL CYCLE CICLO NATURAL LH LH Surge Pico de LH Biopsiy Biopsia P+0 P+1 P+2 P+3 P+4 P+5 ECOGRAFÍA: 7mm; Trilaminar Ultrasound: 7mm; Triple layer Biopsia Biopsy 06
8 Biopsy and Storage BIOPSIA Y CONSERVACIÓN Biopsy Prepare and label one of the supplied cryotubes. Inmediately after the biopsy introduce the sample in the cryotube and shake it vigorously for 10 seconds. Biopsia Prepare y etiquete uno de los criotubos suministrados. Inmediatamente tras la toma de la biopsia introduzca la muestra en el criotubo y agite por 10 segundos. Storage Keep the biopsy sample in a fridge (4-8ºC) for at least 4 hours. This preserved sample, in the original cryotube, can then be immediately shipped at room temperature. Alternatively, the samples can be kept in the fridge for one month or frozen at -20ºC (recommended) until the moment of shipment, at room temperature. Conservación Guarde la muestra en nevera (4-8ºC) durante al menos 4 horas. Esta muestra, ya preservada, puede ser enviada a temperatura ambiente inmediatamente. Alternativamente se puede guardar en la nevera hasta 1 mes o congelarla a -20ºC hasta el momento del envío, a temperatura ambiente. 07
9 Shipment ENVÍO Samples are sent at room temperature with the patient informed consent and a filled request form. Samples shipped at room temperature should reach us in 4 to 5 days. For the instructions for the sample packaging please contact with support@igenomix.com Las muestras se envian a temperatura ambiente con el consentimiento informado y el formulario de petición. Las muestras enviadas a temperatura ambiente nos deben llegar en 4 o 5 días como máximo. Para las instrucciones del empaquetamiento de las muestras por favor contacte con support@igenomix.com Send to: Enviar a: IGENOMIX Att.: ERA DEPARTMENT Parc Cientific Universitat de Valencia C/ Catedrático Agustin Escardino, Paterna (Valencia) Spain Contact: Contacto: support@igenomix.com Tel.:
10 Results RESULTADOS The report of the results will be available 20 days after we receive the sample. El informe de resultados estará disponible a los 20 días de la recepción de la muestra en nuestras instalaciones. 09
11 RESULTS RESULTADOS Interpretation of results After the analysis, there are two possible results: Interpretación de los resultados Después del análisis, hay dos posibles resultados: Receptive (R): The gene expression profile is similar to that of a normal receptive endometrium with the diagnosis probability which is shown in the report. You are recommended to proceed with the embryo transfer in the same conditions, type of cycle and day, in which the endometrial biopsy has been performed. Receptivo (R): El perfil de expresión génica es similar al de un endometrio receptivo normal con la probabilidad de diagnóstico indicada en el informe. Se recomienda proceder con la transferencia de embriones en el mismo día y tipo de ciclo en el que se ha tomado esta biopsia de endometrio. Non Receptive (NR): The gene expression profile is similar to an endometrium out of the receptive phase with the probability which is shown in the report. We recommend taking a new endometrial biopsy to validate a displacement of the window of implantation and to guide the embryo transfer. No Receptivo (NR): El perfil de expresión génica es similar al de un endometrio fuera de la fase receptiva con la probabilidad de diagnóstico indicada en el informe. Se recomienda tomar una nueva biopsia endometrial para validar un posible desplazamiento de la ventana de implantación y guiarle en la transferencia embrionaria personalizada. 10
12 Clinical outcome Updated results 25/01/2013 Resultados clínicos Resultados actualizados a
13 Clinical Outcome in RIF Patients and Controls RESULTADOS CLÍNICOS EN PACIENTES CON FALLO DE IMPLANTACIÓN Y CONTROLES No. of patients Age (years) Nº OF RECEPTIVE ERA/TOTAL ANALYZED (%) No. of previous failed cycles Total Patients with pet after RECEPTIVE ERA Implantation rate after 1 ST pet (%) Pregnancy rate after 1 ST pet (%) Biochemical pregnancies (%) Clinical abortions (%) Ovum donation patients/total (%) Patients with pet after RECEPTIVE ERA Implantation rate after 1 ST pet (%) Pregnancy rate after 1 ST pet (%) Biochemical pregnancies (%) Clinical abortions (%) IVF/ICSI patients/total (%) Patients with pet after RECEPTIVE ERA Implantation rate after 1 ST pet (%) Pregnancy rate after 1 ST pet (%) Biochemical pregnancies (%) Clinical abortions (%) RIF ± /85 (74.1) 4.8 ± /56 (33.9) 15/29 (51.7) 3/15 (20.0) 0/15 (0.0) 22/63 (34.9) 16 12/33 (36.4) 9/16 (56.2) 2/9 (22.2) 0/9 (0.0) 41/63 (65.1) 13 7/23 (30.4) 6/13 (46.2) 1/6 (16.7) 0/6 (0.0) Control ± /25 (88.0) 0.5 ± /20 (55.0) 9/11 (81.8) 2/9 (22.2) 0/9 (0.0) 13/22 (59.1) 8 7/15 (46.7) 6/8 (75.0) 1/6 (16.7) 0/6 (0.0) 9/22 (40.9) 3 4/5 (80.0) 3/3 (100.0) 1/3 (33.3) 0/3 (0.0) Nº OF NON RECEPTIVE ERA/TOTAL ANALYZED (%) No. of previous failed cycles Ovum donation patients/total (%) IVF/ICSI patients/total (%) 22/85 (25.9) 5.0 ± /22 (50.0) 11/22 (50.0) 3/25 (12.0) 0.3 ± 0.6 2/3 (66.6) 1/3 (33.3) *pet Personalized Embryo Transfer 12
14 Clinical Outcome in ERA Receptive Patients RESULTADOS CLÍNICOS EN PACIENTES ERA RECEPTIVOS 80 PR IR 70 First Embryo transfer outcome after RECEPTIVE ERA Test in patients with RIF Resultado de la primera transferencia de embriones después de un test ERA RECEPTIVO en pacientes con Fallo de Implantación Rate (%) Months Number of patients Implantation rate (%) Pregnancy rate (%)
15 Clinical Outcome in ERA Non Receptive Patients RESULTADOS CLÍNICOS EN PACIENTES ERA NO RECEPTIVOS Dating the WOI of the Non Receptive samples The predictor and clustering analysis indicate that most Non Receptive samples classify as Pre-Receptive or Post-Receptive and therefore personalization of the WOI with a second ERA is recommended. Personalizando la ventana de implantación en muestras No Receptivas Tanto el predictor como el análisis del perfil transcriptómico indican que la mayoría de muestras No Receptivas clasifican como Pre-receptivas o Post-receptivas y por tanto se recomienda la personalización de la WOI con un segundo ERA. 14
16 Clinical Outcome in ERA Non Receptive Patients RESULTADOS CLÍNICOS EN PACIENTES ERA NO RECEPTIVOS Example of case 6272 Ejemplo del caso clínico 6272 Case 6272 P+5 Case 6272 P+7 Proliferative Pre-Receptive Receptive Post-Recep 15
17 Clinical Outcome in ERA Non Receptive Patients RIF and controls RESULTADOS CLÍNICOS EN PACIENTES ERA NO RECEPTIVOS No. of patients No. of previous failed cycle RIF Patients No. of previous failed cycle Control Patients ERA Prediction Pre-receptive Post-receptive 2 nd ERA at the specified day (P+4;P+6;P+7;LH+9) a Months between 1 st and 2 nd ERA 2 nd ERA Receptive at the specified day Patients with pet b after 2 nd RECEPTIVE ERA Months between 2 nd RECEPTIVE ERA and pet Implantation rate using pet Pregnancy rate using pet Biochemical pregnancies (%) Clinical abortions (%) Non Receptive ± ±0.6 21/25 (84.0) 4/25 (16.0) ± ±0.7 5/13 (38.5) 4/8 (50.0) 0/4 (0.0) 0/4 (0.0) a The specified day for the 2 nd ERA was calculated by ERA Test according to the gene profile of each sample. b pet implies to do the embryo transfer under the same conditions in which a Receptive ERA was obtained. In those patients was under the same conditions in which the 2 nd ERA was performed. 16
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