Identificación morfológica y molecular de aletas de tiburón en el comercio de Chile, Costa Rica y Perú

Transcripción

1 Identificación morfológica y molecular de aletas de tiburón en el comercio de Chile, Costa Rica y Perú Sebastián Hernández shernandez@veritas.cr

2 Pesquerías de tiburones a nivel global Stevens et al. 2000

3 Pesquerías de tiburones a nivel global Davidson et al. 2015

4 Pesquería de tiburones en Chile EEZ Pacific Ocean Xiphias gladius Isurus oxyrhinchus

5 Pesquería de tiburones en Chile EEZ Pacific Ocean Xiphias gladius

6 Pesquería y comercialización Caldera Coquimbo aletas troncos

7 Regulación del finning

8 Fiscalización - SERNAPESCA

9 Especies de tiburones capturados Prionace glauca Alopias superciliosus Isurus oxyrhinchus Alopias vulpinus Lanma nasus Sphyrna zygaena Lamilla et al. 2005

10 Registros de desembarque Prionace glauca Isurus oxyrhinchus X Alopias vulpinus Fins Trunks

11 Registros de desembarque Prionace glauca Isurus oxyrhinchus X Alopias vulpinus Aletas

12 Productos exportados derivados de tiburones ALETAS TRONCOS MEDALLONES FILETES

13 Variación exportaciones de aletas Tonnes Year 34

14 Importadores de aletas desde Chile Indonesia Singapore Spain Hong Kong ( tonnes) China ( tonnes) Other countries Total ( tonnes) 50 Percentages in weight 100

15 Bases de datos con registros no especificados a nivel de especies Registros de desembarque y exportaciones agrupa algunas especies dentro de una misma categorías - no especies biológicas Tollo Mustelus whitneyi Mustelus mento Squalus acanthias Galeorhinus galeus

16 Es dificultoso identificar las especies de aletas I. oxyrhinchus A. superciliosus Lamnidae L. L. nasus nasus A. vulpinus Alopiidae

17 La composicion de especies de tiburones comercializados es desconocida Cuales son las especies de tiburones comercializadas en Chile? Se necesitan herramientas que nos permitan identificar especies a partir de una aleta: Marcadores Moleculares Morfometría Análisis Digital de Imágenes

18 Manuscrito I 1) Identificar las especies de tiburones que son comercializados como aletas en la zona centro-norte, a partir de marcadores moleculares especie-específicos 2) Determinar la relación entre el nombre del mercado y la identidad genética de la especie, a partir de las aletas 3) Evaluar la capacidad de los comerciantes para reconocer aletas, mediante la apariencia de éstas

19 Proceso de secado de las aletas Secaderos Quebrada seca Calibre

20 Proceso de secado de las aletas Secaderos Quebrada seca Tipo de aleta

21 Proceso de secado de las aletas Secaderos Quebrada seca Especie

22 Proceso de secado de las aletas

23 Proceso de secado de las aletas

24 Almacenaje de aletas

25 Colección de muestras de las aletas Secadero Panul Secadero Placilla 652 muestras de aletas secas

26 Extracción de ADN y Reacción en cadena de la polimerasa Kit Qiagen Inc. T 3-4 hrs. Primers species-specific 5 -AGAAGTGGAGCGACTGTCTTCGCC-3 5 -AGGTGCCTGTAGTGCTGGTAGACACA-3 5 -GTCGTCGGCGCCAGCCTTCTAAC-3 5 -AGTGCTTGACCATTCGGTGTGCGT-3 ITS2 nuclear DNA sequence DNA?

27 Marcadores Moleculares Diseño partidores especie-específicos 5 -AGAAGTGGAGCGACTGTCTTCGCC-3 Fish5.8SF ATACGCC TTCGCC TATGCGG 5.8S ADNr AAGCGG ITS2 TGCGATC 28S ADNr ACGCTAG Fish28SR Amplicón diagnóstico 929 pb Amplicón diagnóstico 1350 pb

28 Marcadores Moleculares Diseño partidores especie-específicos 5 -AGAAGTGGAGCGACTGTCTTCGCC-3 Fish5.8SF ATACGCC TTCGCC TATGCGG 5.8S ADNr AAGCGG ITS2 TGCGATC 28S ADNr ACGCTAG Fish28SR Amplicón diagnóstico 929 pb Amplicón diagnóstico 1350 pb

29 Marcadores Moleculares Diseño partidores especie-específicos 5 -AGGTGCCTGTAGTGCTGGTAGACACA-3 Fish5.8SF ATACGCC GACACA TATGCGG 5.8S ADNr CTGTGT ITS2 TGCGATC 28S ADNr ACGCTAG Fish28SR Amplicón diagnóstico 771 pb Amplicón diagnóstico 1350 pb

30 Marcadores Moleculares Diseño partidores especie-específicos 5 -GTCGTCGGCGCCAGCCTTCTAAC-3 Fish5.8SF ATACGCC TCTAAC TATGCGG 5.8S ADNr ITS2 AGATTG TGCGATC 28S ADNr ACGCTAG Fish28SR Amplicón diagnóstico 556 pb Amplicón diagnóstico 1350 pb

31 Resultados Especies de tiburones pelágicos comercializadas en Chile M N M 929 pb 771 pb 554 pb 1000 pb

32 Resultados Proporción de especies (secaderos) 89.3% P. glauca 13.6% I. oxyrhinchus 1.7% L. nasus N = % A. superciliosus Especies no identificadas

33 Objetivo 2.- Determinar la relación entre el nombre de la aleta identificada por el comerciante y la especies Bodegas: Caldera and Paico Pacific Ocean Un total de 252 aletas secas fueron muestreadas

34 Bodega Caldera Nombre del mercado Identificación genética Azulejo (N = 50) P. glauca (100%) Tiburón (N = 50) I. oxyrinchus (94%) L. nasus (6%) Tintorera (N = 50) L. nasus (98% I. oxyrinchus (2%) Cola de zorro (N = 4) A. superciliosus (100%) Tollo amarillo (N = 1) no identificado

35 Bodega Paico Nombre mercado Identificación genética Martillo (N = 22) S. zygaena (86%) no identificado (14%) Carcharhinus (N = 25) G. galeus (56%) S. zygaena (20%) Carcharhinido (12%) C. obscurus (8%) I. paucus (4%) Cola de zorro (N = 5) A. superciliosus (100%) No clasificada A (N = 22) A. vulpinus (100%) No clasificada B (N = 22) S. zygaena (41%) G. galeus (56%) S. lewini (14%) Carcharhinido (13%)

36 Objetivo 3: Evaluar la capacidad de los comerciantes para reconocer aletas 9 comerciantes y/o exportadores

37 Resultados Resultados bodega Caldera I. oxyrinchus L. nasus

38 Resultados Resultados bodega Caldera I. oxyrinchus L. nasus

39 Comercio de aletas de tiburón en Chile Conclusión P. glauca A. vulpinus C. obscurus A. superciliosus I. oxyrinchus S. zygaena I. paucus S. lewini L. nasus G. galeus

40 Conclusión Concordancia entre el nombre en el mercado - especie Azulejo (P. glauca) Tiburón (I. oxyrinchus) Monitoreo del volumen del comercio Tintorera (L. nasus) Cola de zorro (A. superciliosus) Martillo (S. zygaena) Aproximaciones razonables a los desembarques

41 Manuscrito II & III Evaluar la utilidad de métodos diagnósticos morfométricos y morfológicos (color y forma), para la discriminación aletas

42 Análisis morfométrico Bodega Paico Análisis morfométrico CDM CTL CTR P1B P1H P1A D1A D1H D1P CFL CFW CPU CST P1I P1P D1B D1I D1L CPV CPL

43 Análisis morfométrico Análisis multivariado (PCA) Objetivo: Reducir muchas variables a un número más pequeño de variables que resumen la información de las variables originales (pueden ser usados para posteriores análisis) P1B P1H P1A P1I P1P

44 Resultados análisis discriminante (PCA) Análisis morfométrico Aletas húmedas P < Aletas secas P <

45 Análisis digital imagen Bodega Paico Análisis de imagen

46 Análisis digital imagen Técnica de correlación digital invariante posición escala rotación

47 Análisis digital imagen Técnica de correlación digital invariante imagen problema filtro compuesto especie-específico Patrón de difracción

48 Análisis digital imagen Técnica de correlación digital invariante imagen problema filtro compuesto especie-específico

49 Análisis de imagen Análisis digital imagen Resultados imagen problema filtro compuesto especie-específico + OSPPG: outer side pectoral P. glauca

50 Análisis de imagen Análisis digital imagen Resultados imagen problema filtro compuesto especie-específico + OSPPG: outer side pectoral I. oxyrhinchus

51 Análisis de imagen Análisis digital imagen Resultados imagen problema filtro compuesto especie-específico + OSPPG: outer side pectoral L. nasus

52 Conclusión Sinergia de ambas metodologías análisis de imagen análisis genético Identificación de especies P. glauca I. oxyrinchus L. nasus

53 Conclusión Sinergia de ambas metodologías análisis de imagen análisis genético Identificación de especies P. glauca I. oxyrinchus L. nasus

54 Conclusión Sinergia de ambas metodologías análisis de imagen análisis genético Identificación de especies P. glauca I. oxyrinchus L. nasus

55 Taller interinstitucional IV (Junio 2014): Identificación morfológica y molecular de especies de tiburones 1 ONG 2 academias 10 instituciones gubernamentales (~ 25 personas)

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57 Decomiso de aletas UPS Aeropuerto Juan Santamaría (Noviembre 2014) Saco de 40 kilos, solo se revisaron 3 sacos aletas pectorales de tiburón sedoso (Carcharhinus falciformis) - 6 aletas pectorales de tiburón martillo (Sphyrna sygaena) - 4 aletas pectorales de tiburón punta blanca oceánico (Carcharhinus longimanus)

58 Decomiso de aletas UPS Aeropuerto Juan Santamaría (Noviembre 2014) Punta blanca oceánico (Carcharhinus longimanus)

59 Marcadores Moleculares Partidores especie-especificos para identificar tiburones martillo y threshers Fish5.8SF S. mokarram S. lewini S. zygaena 5.8S ADNr ITS2 28S ADNr Fish28SR DNA? Amplicón diagnóstico 249 pb Amplicón diagnóstico 445 pb Amplicón diagnóstico 782 pb Amplicón diagnóstico 1350 pb

60 Decomiso de aletas UPS Aeropuerto Juan Santamaría Nombre del mercado Morfological identification Genetic ID 1th sac labelled Blue Prionace glauca th sac labelled Thesher Alopias pelagicus th sac Unlabelled Sphyrna zygaena S. zygaena Carcharhinus limbatus C. longimanus

61 No se cumplen regulaciones internacionales CITES!!!!!!!!!!!! 1) El 24 de Diciembre del 2014, Costa Rica exportó 411 kilos de aletas de tiburón martillo 2) El 20 de Febrero Costa Rica exportó 490 kilos más de aletas de tiburón martillo

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63 Worshop of Shark Biology Universidad Científica

64 Desembarque de tiburones en Pucusana

65 Perú Identificación morfológica de especies de tiburones Diamante = Isurus oxyrhinchus

66 Perú Identificación morfológica de especies de tiburones Zorro = Alopias pelagicus

67 Perú Identificación morfológica de especies de tiburones Sedoso = Carcharhinus falsciformis

68 Perú Identificación morfológica de especies de tiburones Azul = Prionace glauca

69 Perú Identificación morfológica de especies de tiburones Martillo = Sphyrna lewini? & S. zygaena

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71 Perú Identificación morfológica de especies de tiburones Mantequero = Carcharhinus brachyurus

72 Identificación morfológica y molecular de aletas de tiburón en el comercio de Chile, Costa Rica y Perú Sebastián Hernández shernandez@veritas.cr

73 Guía de identificación de las aletas (CITES II) Establecer la fiscalización visual de la ID de las aletas (comercializadas/exportadas)

74 Terminología de las aletas de tiburón

75 Paso 1: Encontrar la primera aleta dorsal Es la aleta del mismo color en ambos lados? SI.Posible aleta dorsal No.Aleta pectoral

76 Si. = aleta dorsal (es muy probable que se observe el borde libre de la dorsal) Existe una fila de cartílago en la base, con cada pieza de cartílago cercanos al adjacente? No. Solo material esponjoso, En algunos casos se observa partes de cartílago = lóbulo inferior aleta caudal Paso 1: Encontrar la primera aleta dorsal

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78 Sardinero, tintorera, porbeagle - Lamna nasus

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80 Perro, punta blanca oceánico - Carcharhinus longimanus

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82 Primera aleta dorsal del tiburón martillo son altas!!!!!!

83 Cachuda, Cornuda, Martillo Sphyrna zygaena Cornuda cruz (Sphyrna zygaena) Los aletas dorsales de los tiburones martillos son largas en altura (en proporción más largas que anchas < 2.5). Coloración gris y/o café con base delgada con filas de pequeñas piezas de cartílago.

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86 Hammerhead sharks (3 large species, all CITES App II) Key Feature: High aspect ratio (i.e., fin is tall and narrow) Fin is light grey or brown, without other markings Fin base is narrow and has row of small, oval car

87 Diamante, maco, marrajo Isurus oxyrhinchus

88 Otras aletas alta (en proporción más largas que anchas < 2.5) son gris oscuras con una base delgada Tiburón zorro (Alopias superciliosus) El tiburón cola de zorro (Alopias) tiene una base delgada de la aleta dorsal, donde las piezas de cartílago son de forma irregular.

89 Comparación morfologia externa entre aleta fresca y humeda de la primera dorsal del un ejemplar de Alopias pelacicus A. pelagicus A. pelagicus Aleta fresca Aleta seca El tiburón cola de zorro (Alopias) tiene una base delgada de la aleta dorsal, donde las piezas de cartílago son de forma irregular.

90 Comparación corte basal del lóbulo inferior de la aleta caudal fresca y húmeda de Alopias pelagicus

91 Alopias spp. Aletas de Zorros fresca: Alopias pelagicus A. pelagicus Vista dorsal Vista dorsal Vista ventral Alopias spp. Vista ventral Vista Vista dorsal

92 Aletas pectorales secas de Alopias superciliosus

93 Aletas pectorales húmedas de Alopias vulpinus Vista dorsal Vista ventral Vista dorsal Vista ventral

94 Guía de identificacíon de los apéndices prebranquiales (placas de las branquias) de especies de Móbulas para la aplicación de medidas para el comercio (CITES II)

95 El género Manta inclute especies tales como la manta oceánica (Manta birostris) y la manta de arrecife (Manta alfredi). Estas especies fueron incluidas en el Apéndice II en la 16 th Conferencia de las Partes de la Convención Internacional del Comercio de Especies en Peligro de Extinción de la Fauna y Flora (CITES). Las Mantarayas son especies relativamente cercanas a las Móbulas. De éstas últimas se han identificado 9 especies en la actualidad, las cuales pertenecen a la familia Mobulidae y son conocidas como Móbulas. Oceanic Manta Ray Manta birostris

96 Manta oceánica (Manta birostris) Manta de arrecife (Manta alfredi) IUCN Classification: Vulnerable globally

97 Apéndices Prebranquiales Todas las especies de Móbulas son filtradores, los cuales utilizan su boca y sus modificados filamentos branquiales para succionar y retener el plancton y peces pequeños. Cada individuo tiene 5 pares de hendiduras branquiales, las cuáles estan internamente sostenidas por un placa branquial formadar por filamentos branquiales conocidos como apéndices prebranquiales, los cuales retienen el alimento. Hendiduras branquiales Apéndices prebranquiales que rodean las hendiduras branquiales internamente en la boca

98 Pesquería de Móbulas y Mantas Las placas branquiales de las Mantas y Móbulas son usadas en el Mercado Asiático con fines demanda de estos productos ha incremedo las pesquerías de estas especies. Cuando las placas branquiales son removidas de los individuos capturados. Los pescadores cortan por la mitad las placas y éstas son secadas para posteriormente ser comercializadas.

99 Características morfológicas En general, las Mobulas son mas pequeñas que las Mantas y pueden ser identificadas por sus diferencias morfológicas de su boca. Las Mobulas tiene la mandíbula inferior (cartílago de Meckel) en forma de una línea la cual se ubica muy cerca al borde de la mandíbula inferior, de esta manera cuando la boca esta cerrada, los bordes de la mandíbula inferior se encuentran más atrás que ventral (como es el caso de las Mantas (terminal). La boca, esta distribuida en posición terminal? SI NO MANTA: Boca posición terminal MOBULA: Boca ventral

100 Identificación de las placas branquiales Hay tres caractéres importantes que pueden ser utilizados rápidamente para identificar cada tipo de placa branquial: - Tamaño placa branquial - Color placa branquial - Bordes de los filamentos branquial 1. Tamaño: medición de la longitud total de la placa branquial comercializada 2. Color: bi-color (abajo) o uniforme (arriba) 30cm regla 3. Bordes de los filamentos: suaves (arriba) o separados/bristled (abajo) 30cm regla

101 Clave para la identificación de las placas branquiales de Móbulas comercializadas Pregunta 1: La placa branquial, es mas larga que 30cm y su coloración es uniforme (café oscuro/negruzca)? SI = Manta NO = Ir a pregunta 2 Manta Móbula Pregunta 2: Tienen las placas branquiales un borde central de coloración blanca y/o con separados filamentos branquiales? SI = Mobula NO = Manta

102 Placas branquiales de Mantarayas - Manta birostris & M. alfredi 1. Tamaño placas branquiales = Largas 2. Coloración placas branquiales = uniforme café oscuro/negro 3. Filamentos branquiales = Suaves Placas branquiales café/negro y borde de los filamentos suaves Borde filamentos 30cm regla