URITOP TIRAS REACTIVAS PARA ANÁLISIS DE ORINA

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1 Ref: Ver tabla en la última página Sólo para diagnóstico in Vitro URITOP TIRAS REACTIVAS PARA ANÁLISIS DE ORINA 1. USO ESPERADO Las tiras reactivas para análisis de orina URITOP cuentan con zonas de reacción para Urobilinógeno, Glucosa, Bilirrubina, Cetonas (Ácido Acetoacético), Densidad, Sangre oculta, ph, Proteínas, Nitritos, Leucocitos y Ácido Ascórbico 2. RESUMEN Las tiras reactivas URITOP de uso exclusivo para diagnóstico In Vitro, sirven para comprobar la presencia en orina de los parámetros que se indican más arriba. Los resultados obtenidos pueden proporcionar información relacionada con el estado del metabolismo de los carbohidratos, funciones renal y hepática, balance ácido-base, e infecciones del tracto urinario. La determinación se realiza por comparación de la tira reactiva con la escala de color impresa en la etiqueta del envase, de manera visual, y de acuerdo con las instrucciones del analizador en el caso de utilizar un instrumento. Deben seguirse las instrucciones de manera exacta. 3. ALMACENAMIENTO Y MANIPULACIÓN Una vez extraídas las tiras que vayan a utilizarse debe cerrarse el bote inmediatamente. Mantener el bote cerrado hasta la realización de un nuevo test en un lugar fresco y seco a temperaturas entre 2 C ~ 30 C (36 F~86 F). No almacenar en nevera o congelador. Evitar su exposición a la humedad y a la luz solar. Almacenado en su bote original el producto es estable hasta la fecha de caducidad impresa en la base del contenedor. No utilizar después de la fecha de caducidad. No retirar el desecante. No tocar las zonas de test. Permita que el bote alcance al temperatura ambiente (15 C-30 C) antes de realizar el test No abrir el envase hasta que se vaya a utilizar. La decoloración o el oscurecimiento de las áreas de reacción pueden indicar deterioro. Si esto es evidente o si los resultados del test son cuestionables e inconsistentes con respecto a lo esperado, confirme la fecha de caducidad del producto y su correcta reacción al usar muestras de control positivas y negativas. 4. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Como ocurre con todos los test de laboratorio, el diagnóstico definitivo o la decisión terapéutica no debería basarse en un único resultado del método. Las sustancias que causan cambios en el color de la orina pueden afectar la lectura de las áreas de reacción. No se conocen en todos los casos los efectos que sobre los test ejercen las drogas u otros metabolitos. Por tanto, en caso de duda se recomienda la repetición de la prueba una vez eliminada la fuente potencial de interferencia, como puede ser la toma de medicamentos o suplementos vitamínicos, etc. Alldiag 1

2 5. PRINCIPIOS QUÍMICOS DEL PROCESO, INGREDIENTES, VALORES ESPERADOS Y LIMITACIONES Urobilinógeno: Principio químico: El test está basado en la reacción de Ehrlich. Se produce un cambio de color de naranja-rosa suave a rosa fuerte. Reactivos: Tetrafluroborato de 4-metoxibencenodiazonio, 2,9 mg. Valores esperados: El rango normal para el urobilinógeno está entre 0,1 y 1,0 unidades Ehrlich/dL. Si los resultados exceden la concentración de 2,0 mg/dl, el paciente y la muestra de orina deben someterse a ulteriores evaluaciones. Límite de detección: El test detecta urobilinógeno en concentraciones tan bajas como 0.1 unidades Ehrlich/dL. Sin embargo, la ausencia de urobilinógeno en la muestra no puede afirmarse. En pacientes que presentan un elevado nivel de urobilinógeno, los resultados son estrechamente correlacionados con el método de espectrofotometría de Watson-Schzatz Límite del test: La zona del test reaccionará con las sustancias que se sabe que interfieren con el reactivo de Ehrlich, tal como el ácido p-amino salicílico. Los medicamentos que contienen azo gantrisina pueden dar lugar a un color dorado enmascarante. El test no resulta un método fiable para la detección de porfobilinógeno. La prueba de urobilinógeno debe realizarse en orinas frescas y evitando la exposición prolongada a la luz Glucosa: Principio químico: La glucosa oxidasa cataliza la oxidación de la glucosa para formar peróxido de hidrógeno, que oxida un cromógeno en la zona de reacción por la acción de la peroxidasa. Reactivos: Glucosa oxidasa 430U, Peroxidasa 200U. Yoduro potásico 12 mg. Valores esperados: Normalmente la glucosa no se encuentra presente en la orina, sin embargo un riñón normal excreta pequeñas cantidades de glucosa. Concentraciones del orden de 50 mg/dl deben considerase anormales si se detectan de manera constante. Límite de detección: Aproximadamente 50 mg/dl de glucosa son detectados. El test es altamente específico para la glucosa. La zona de test no reacciona con la lactosa, la galactosa, la fructosa u otros metabolitos reductores de salycilates y ácido nalidíxico. Límite del test: El ácido ascórbico (más de 40 mg/dl), el ácido acetílico salicílico y un nivel moderadamente alto de cuerpos cetónicos (> 40 mg/dl) puede originar falsos negativos en muestras que contengan pequeñas cantidades de glucosa (100 mg/dl). Pero la combinación de dichos niveles de cetonas y bajos niveles de glicosa son metodológicamente improbables. La reactividad del test decrece en tanto la densidad y el ph aumentan. La reactividad puede variar igualmente con la temperatura. No use envases de recolección con rastros de sustancias oxidantes (blanqueadores por ejemplo) Bilirrubina: Principio químico: Reacción de formación de un azo-complejo de la bilirrubina con una sal de diazonio en un medio ácido para formar un azo-pigmento. El color cambia de beige a rosa claro. Reactivos: Nitrito sódico 0,733 mg 2,4-diclorobenceno diazonio 2,3 mg, ácido sulfosalicílico 25 mg. Valores esperados: En personas sanas, no se detecta bilirrubina en orina inclusive mediante los métodos más sensibles. Por tanto la presencia de trazas de bilirrubina indica suficiente anormalidad que precisa de investigación posterior. Límite de detección: Los metabolitos de ciertos medicamentos como piridium (tenazopiridina) y serenium (etoxaceno) que dan color a bajo ph pueden causar falsos positivos. El indican (indoxil sulfato) puede originar una respuesta amarillo-naranja a rojo que puede interferir con la interpretación de lecturas de bilirrubina negativas o Alldiag 2

3 positivas. Se pueden obtener resultados falsos positivos en presencia en la orina de pigmentos de diagnóstico o terapéuticos. Concentraciones de ácido ascórbico de 25 mg/dl o mayores pueden originar falsos negativos. La prueba de bilirrubina debe realizarse en orinas frescas y evitando la exposición prolongada a la luz Cetonas: Principio químico: Reacción del test de nitroprusiato. El ácido acetoacético en un medio alcalino reacciona con el nitroferricianuro (nitroprusiato) originando un cambio de color de beige a morado. Reactivos: Nitroprusiato sodico 23,0 mg. Valores esperados: En muestras de orina normales no deberían detectarse cuerpos cetónicos con este reactivo. Límite de detección: 5 mg/dl. Algunas muestras de orina de elevada densidad y bajo ph pueden dar falsos positivos. Se recomienda una evaluación clínica cuando se obtienen rastros de cetonas con el reactivo Límite del test: Pueden darse resultados positivos (trazas o cantidades menores) con muestras de orina de elevada pigmentación o que contengan grandes cantidades de metabolitos de levodopa. Se pueden encontrar niveles detectables de cetonas en orina en condiciones de estrés fisiológico tales como ayuno, embarazo y ejercicio intenso frecuente en cetoacidosis, en condiciones de ayuno o con otras anormalidades del metabolismo de los hidratos de carbono y de los lípidos. Pueden aparecer en orina niveles elevados de cetonas antes de verse elevado su valor en suero. Una bacteriuria importante puede generar falsos positivos. ph: Principio químico: Emplea un sistema de indicador doble. Indicadores rojo de metilo y azul de bromotimol se emplean para originar distintos cambios de color del naranja al verde y al azul. (ph 5,0 a 9,0). Reactivos: Rojo de metilo 0,05 mg, azul de bromotimol 0,5 mg. Valores esperados: Los valores del ph en orina generalmente se sitúan entre 5 y 9. El ph en la orina es in importante indicador de situaciones metabólicas ligadas al funcionamiento de los riñones y de los sistemas gastrointestinales y respiratorios. Límite de detección: El test mide los valores de ph situados entre 5 y 9 con una precisión de una unidad. Límite del test: El exceso de orina en la tira puede lavar el buffer ácido por la proximidad del reactivo de proteínas sobre la zona del ph y cambiar la lectura del ph hacia un valor más ácido, aunque la orina que está siendo analizada sea neutra o alcalina. La prueba de ph debe realizarse en orinas frescas pues una proliferación de bacterias implica una alcalización de la orina. Sangre oculta: Principio químico: El test está basado en la actividad seudoperoxidasa del grupo hemo de la hemoglobina y mioglobina. El cromógeno se oxida por un hidroperóxido en la presencia de hemoglobina y se produce un cambio de color de amarillo a azul. Reactivos: Hidroperóxido de cumeno 12 mg, O-Tolidina 35 mg. Valores esperados: El significado de la presencia de rastros de hemoglobina puede variar según el paciente y la situación clínica. Se requiere una evaluación clínica para apreciar cada caso en particular. Cuando aparece hemoglobina en la orina, indica algún tipo de enfermedad renal o desorden del tracto urinario. El test es altamente sensible para hemoglobina (sin embargo, pierde sensibilidad en tanto los eritrocitos se encuentran intactos) por lo que se considera un complemento para el examen microscópico. Límite de detección: 10 eritrocitos/µl. En condiciones normales no se detecta hemoglobina en la orina. El test es más sensible en presencia de hemoglobina libre o de mioglobina que en presencia de eritrocitos intactos. Límite del test: La densidad elevada o el alto contenido en proteínas, pueden reducir la reactividad del test de sangre oculta. La Peroxidasa microbiana asociada con infecciones del tracto urinario puede originar falsos Alldiag 3

4 positivos. Concentraciones de ácido ascórbico superiores a 40 mg/dl pueden dar lugar a falsos negativos a niveles traza. Es importante agitar los eritrocitos antes de realizar el test. No use envases de recolección con rastros de sustancias oxidantes (blanqueadores por ejemplo). Tenga en cuenta el riesgo de interferencia ligado a la menstruación o a un sondeo. Densidad: Principio químico: Los solutos iónicos presentes en la orina originan la liberación de protones desde un polielectrolito. A medida que se liberan protones el ph disminuye y origina un cambio de color del azul de bromotimol desde azul-verdoso a amarillo- verdoso. Reactivos: Azul de bromotimol 0,5 mg. Éter polivinílico-alt-ácido maleico anhidro, 140,5 mg. Valores esperados: La densidad de la orina de adultos varía desde 1,003 hasta 1,040. La primera orina de la mañana debe tener una densidad entre 1,015 y 1,025. En recién nacidos varía entre 1,002-1,004. En caso de lesiones renales severas, la densidad se fija en 1,010, valor que corresponde a la densidad del filtrado glomerular. Límite de detección: El test permite la determinación de densidades entre 1.000, 1.005, 1.010, 1.015, 1.020, 1.025, Las orinas alcalinas tamponadas pueden generar baja lectura de los resultados. Límite del test: Se obtienen lecturas elevadas de densidad en presencia de cantidades moderadas de proteína. La densidad aumenta también en presencia de glucosa. Un ph > 6.5 puede implicar un valor defectuoso de la densidad. Proteínas: Principio químico: Basado en el fenómeno conocido como "Error de indicadores debido a proteína". Cuando se mantiene el ph constante mediante un buffer, los pigmentos indicadores liberan iones H+ por la proteína presente y se produce un cambio de color de verde claro a azul-verdoso. Reactivos: Azul de tetrabromofenol 0,34 mg. Valores esperados: Las muestras de orina normales generalmente contienen algo de proteínas (<20 mg/dl), por lo que sólo valores persistentemente elevados son indicativos de enfermedades renales o del tracto urinario. Persistencia en los resultados de niveles traza o mayores indican proteinuria y precisan de posteriores evaluaciones clínicas para valorar si los resultados son significativos. Límite de detección: Este test tiene un límite de detección de 15 mg/dl de proteínas. Límite del test: Se pueden obtener falsos positivos en muestras de orina de carácter fuertemente básico (ph 9). La interpretación de los resultados también resulta difícil en muestras de orina turbias. No use envases de recolección con rastros de sustancias oxidantes (blanqueadores por ejemplo). Evite los tocadores con sales de amonios cuaternarios (Riesgo de falsos resultados positivos). Nitritos: Principio químico: El test está basado en la reacción de diazotización del nitrito con una amina aromática para originar una sal de diazonio, que a continuación forma un complejo con un compuesto aromático. El pigmento azo originado da lugar a un cambio de color del blanco al rosa. Reactivos: Ácido P-arsanílico, 4,5 mg. Valores esperados: En orina normal no se detectan nitritos y la identificación implica la presencia de bacterias causantes de infecciones renales de uretra, uréter o vejiga. Límite de detección: 0.1 mg/dl. La comparación de la coloración obtenida contra un fondo blanco ayuda a la detección de bajas cantidades de nitritos que podrían no ser detectados. El test es específico para nitritos y no reacciona con otras sustancias normalmente excretadas en la orina. Límite del test: Toda coloración rosa sin importar su intensidad, corresponde a un resultado positivo. Por el Alldiag 4

5 contrario, manchas color rosa en los extremos no deben considerarse como resultados positivos. Toda coloración rosada uniforme indica la presencia de al menos 10 5 bacterias/ml y la intensidad de la coloración no es proporcional al nivel de bacterias. Las muestras de orina no deben ser evaluadas por más de 4 horas después de su recolección. Orinas conservadas por períodos prolongados pueden generar falsos resultados positivos, en caso de haber contaminación bacteriana por ejemplo. La toma de derivados de nitritos puede conducir a falsos resultados positivos. Concentraciones superiores a 25 mg/dl de ácido ascórbico puede generar falsos negativos en muestras con niveles de nitritos inferiores a 0,03 mg. Leucocitos: Principio químico: El test contiene un éster indoxílico y una sal de diazonio. La reacción tiene lugar al reaccionar la amina aromática formada por el leucocito esterasa con la sal de diazonio de la zona de reacción. El pigmento azo formado origina un cambio de color del beige al violeta. Reactivos: Ester amino-ácido indol 1,3 mg. Valores esperados: En condiciones normales no se detectan leucocitos en la orina. Normalmente, ante la presencia de rastros, el resultado debe ser interpretado en función del contexto clínico. Límite de detección: Generalmente el test detecta, a nivel de traza, entre 20 y 25 leucocitos/µl Límite del test: Los resultados del test no siempre son coherentes con el número de leucocitos obtenidos mediante examen microscópico. Alta concentración de glucosa, alta densidad, elevado nivel de albúmina, alta concentración de formaldehído o presencia de sangre pueden causar resultados del test disminuidos. Alta concentración de ácido oxálico o cantidades traza de agentes oxidantes, pueden causar falsos resultados negativos. Ácido Ascórbico: Principio químico: El test implica la decoloración del reactivo de Tillmann. La presencia de ácido ascórbico origina un cambio de color de verde a verde-amarillo. Reactivos: Sal sódica de 2,6-dicloro indofenol 0,8 mg. Límite de detección: Valores de ácido ascórbico en orina en concentraciones tan bajas como 50 mg/dl pueden dar lugar a interferencias con bajas concentraciones de glucosa, sangre y bilirrubina. Concentraciones de 200 mg/dl o superiores causan interferencias muy fuertes. Si se detecta ácido ascórbico en la orina, debe realizarse de nuevo el test tras 24 horas sin tomar ácido ascórbico. Límite del test: No se conocen interferencias. 6. RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA Y PREPARACIÓN Colecte la orina en un envase nuevo y limpio. Mezcle bien antes de realizar el test. No centrifugar. Evalúe la orina lo antes posible después de la recolección. Si el test no puede ser realizado inmediatamente, refrigere la orina y permita que adquiera la temperatura ambiente antes de realizar el test. Todas las muestras deben considerarse como potencialmente infecciosas. Se recomienda usar el traje adecuado durante la realización del test. Los reactivos presentes en cada una de las zonas reactivas se encuentran detallados en el párrafo que describe el principio de cada test. 7. PROCEDIMIENTO VISUAL Para obtener resultados fiables debe seguirse el procedimiento con exactitud. Alldiag 5

6 a) Tomar una tira del bote y cerrarlo inmediatamente. Controlar el estado de la tira. Si algunas zonas se encuentran decoloradas o por el contrario más oscuras, no utilice el test. b) Introducir la tira en la orina hasta la zona de test durante no más de 2 segundos. c) Acercar el borde de la tira a la pared del recipiente para eliminar el exceso de orina; En este momento evitar que las áreas del test toquen la pared del recipiente. d) Situar la tira con las zonas del test hacia arriba sobre un papel absorbente para eliminar cualquier exceso de orina. El exceso de orina sobre la tira da lugar a la interacción de los reactivos químicos entre zonas de test adyacentes, pudiendo originar resultados incorrectos. e) Transcurrido el tiempo adecuado, comparar los resultados del test de manera cuidadosa con el color de la escala de colores en la etiqueta del envase bajo buena luz. Al comparar, debe mantenerse la tira en posición horizontal para prevenir la posible mezcla de reactivos cuando hay presente exceso de orina. 8. CONTROL DE CALIDAD La tira debe conservarse y manipularse según las recomendaciones de la ficha técnica antes y durante la utilización. Las fuentes de error son descritas en el párrafo "Límite del test. Cada laboratorio debe definir sus objetivos y estándares de desempeño. Para obtener mejores resultados, debe confirmarse el funcionamiento de las tiras reactivas por medio de la utilización de muestras negativas y positivas o controles cada vez que un nuevo bote sea abierto por primera vez. Cada laboratorio debería establecer sus objetivos en cuanto a sus estándares adecuados de actuación. Cada trabajador del laboratorio debe asegurar que cumple con dichos requisitos. 9. CARACTERÍSTICAS DE FUNCIONAMIENTO Urobilinógeno: 0,1 1 EU/dL Glucosa: 50 mg/dl (Glucosa) Bilirrubina: 0,5 mg/dl (Bilirrubina) Cetonas: 5 mg/dl (Ácido Acetoacético) Sangre: 10 eritrocitos/µl (0,03 mg/dl hemoglobina, eritrocitos intactos) Proteína: mg/dl (Albúmina) Nitritos: 0,05 mg/dl (Ion Nitrito) Leucocitos: Leu/µL (Leucocitos intactos y lisados) Ácido ascórbico: 20 mg/dl (Ácido ascórbico) Nombre del producto Referencia Parámetros URITOP Glucosa URITOP Glucosa, Proteínas URITOP Glucosa, Proteínas, ph URITOP Glucosa, Sangre oculta, Proteínas, ph URITOP Glucosa, Cetonas (Ácido Acetoacético), Sangre oculta, Proteínas, ph URITOP URITOP 10 URITOP 10 URITOP Lectura visual 5103 Lector Automático Lectura visual Glucosa, Densidad, Sangre oculta, Leucocitos, Proteínas, Nitritos, ph Sangre oculta, Leucocitos, Proteínas, Urobilinógeno, Nitritos, ph Sangre oculta, Leucocitos, Proteínas, Urobilinógeno, Nitritos, ph Sangre oculta, Leucocitos, Proteínas, Urobilinógeno, Nitritos, ph, Ácido Ascórbico Alldiag 6

7 URITOP Lector Automático 720 Sangre oculta, Leucocitos, Proteínas, Urobilinógeno, Nitritos, ph, Ácido Ascórbico Directive 98/79/CE ALL. DIAG 10, rue Ettoré Bugatti BP STRASBOURG Cedex 2 Tél. : Fax : info@alldiag.com Alldiag - 7 -