Fotosíntesis. 6CO 2 + 6H 2 O C 6 H 12 O 6 ( Glucosa) + O 2. Enzimas. Clorofila

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1 Fotosíntesis Proceso de biosíntesis ( vía anabólica). Químicamente: reducción. Transformación: energía lumínica a química. Ubicación: eucariotas : cloroplastos. procariotas: cromatóforos. Fuente de energía: luz solar. Materia prima: Agua y el dióxido de carbono. Producto: hidratos de carbono. Ecuación general Enzimas 6CO 2 + 6H 2 O C 6 H 12 O 6 ( Glucosa) + O 2 Clorofila

2

3 Primera fase: etapa luminosa. Quimiosmosis. Lugar: tilacoides. Pigmento: Clorofila ( rango de absorción.) Proceso: captación de la luz solar. Productos principales: ATP y NADPH. Productos secundarios: O 2. Ecuación general de la fase luminosa: 12 H 2 O + 12 NADP + 18 ADP + 18 Pi NADPH + 12 H ATP

4 La luz y los pigmentos

5 Clorofila Existen varias Clorofila a, b, c y d.

6 Pigmentos accesorios: los carotenoides. Anaranjado, amarillo o rojos. Absorben igualmente luz pero en menor medida que la clorofila.

7 P 680 Clorofila b ATP P 700 Clorofila a NADPH

8 Formación de ATP

9 Segunda fase: etapa oscura o Ciclo de Calvin. Lugar: estroma. Fuente de energía: ATP obtenido en la primera etapa. Fuente reductora: NADPH. Proceso: reducción del CO 2. Producto principal: glucosa. Ecuación general de la etapa oscura: 12 NADPH + 12 H ATP + 6 C0 2 C 6 H NADP + 18 ADP + 18 Pi + 6 H 2 O

10 Tres moléculas de CO2 se unen con... Tres moléculas de RuDP Y se forman... seis moléculas de 3- fosfoglicerato Luego se agregan 1 ATP a cada Molécula y... Se obtienen 6 moléculas de 1,3 difosfoglicerato al que se agregan H+ y pierde grupo fosfato para formar... Seis moléculas de gliceraldehido 3 fosfato Una molécula de gliceraldehido 3- fosfato abandona el ciclo y es usado para fabricar glucosa... Las otras 5 moléculas reconstituyen la ribulosa 1,5- difosfato.

11 Otras Rutas metabólicas alternativas Las plantas C3 sólo usan el ciclo de Calvin para fijar el carbono y hacerlo parte de un compuesto orgánico. Se llaman C3 porque fijan el carbono del CO2 cuando forman un compuesto de tres carbonos (3C) llamado Gliceraldehido. oxalacetato Otros vegetales complementan en ciclo de Calvin con otros procesos, por ejemplo cuando habitan un ambiente muy seco, a estas plants se les llama C 4 o CAM, porque cierran sus estomas durante el dia para evitar la pérdida de humedad (C4) o porque abren sus estomas de noche y almacenan Carbono para usar durante el dia sin necesidad de abrir sus estomas Cactus o piñas.

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13 Trabajo Practico Objetivo Comprobar el origen del oxigeno liberado en la fotosíntesis mediante el experimento realizado por Hill. Experimento de Hill: A ox + H 2 O + Cloroplastos A red + ½O 2 + 2H + A: 2-6-diclorofenol-indofenol Oxidado: azul. Reducido: incoloro.

14 Separación de cloroplastos de otros componentes celulares Muestra: Hojas verdes (quitar nervaduras y lavar). Pesar 20 g. Licuar con 50 ml de sacarosa 0,5 M. Filtrar. Centrifugar 5 minutos a 2000 rpm. Recuperar sobrenadante y centrifugar 10 minutos a 4000 rpm. Re suspender el sedimento en 10 ml de sacarosa 0,5 M.

15 Reactivo TUBO 1 TUBO 2 TUBO 3 TUBO 4 TUBO 5 agua destilada 3 ml 3 ml 3 ml 3 ml 3 ml Buffer 2 ml 2 ml 2 ml 2 ml 2 ml suspensión cloroplastos 2 ml 2 ml 2 ml ml calor a ebullición min diclorofenol-indofenol ml 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml exposición a la luz 24 h h. 24 h. 24 h.

16 Transaminaciòn Reacción de transferencia de un grupo amino. Dador: aminoácido. Coenzima: fosfato de piridoxal. Enzima: aminotransferasa. Producto: piruvato ( oxalacetato es inestable pasa a piruvato). Identificación de la reacción: formación de complejo coloreado (piruvato ½ alcalino con 2,4-dinitrofenilhidracina) con absorbancia a 505 nm.

17

18 Obtención de las enzimas Muestra: hígado fresco. Pesar 1g. Homogeneizar con 10 ml de buffer fosfato de potasio 0,05 M (ph: 7,4). Centrifugar 5 minutos a 3000 rpm. Separar el sobrenadante. Una parte hervir y el resto no.

19 GOT GOT GPT GPT Sustrato ( ml) 0,5 0,5 0,5 0,5 Homogenato hervido -- 0,5 -- 0,5 Homogenato s/ hervir 0,5 -- 0,5 -- Incubar 30 min a 37 si si si si 2,4 DNFH (ml) 0,5 0,5 0,5 0,5 Incubar 10 min a 37 si si si si NaOH 0,4 M (ml)

20 GOT Localización celular. Citoplasma-mitocondria Citoplasma Localización en Tejido Valor de Referencia Muestra Estabilidad Hepático- Musculo cardiacocerebro-páncreas-pulmonesleucitos y eritrocitos. Adultos: hombres mujeres Método: cinético acoplado con NADH. Suero recomendado Plasma con heparina puede causar turbidez en la reacción Hasta 3 semanas a 4ºc. No congelar GPT Hepático (especifica) Musculo cardiaco riñón, páncreas y eritrocitos Adultos: hombres mujeres Método: cinético acoplado con NADH. Suero recomendado Plasma con heparina puede causar turbidez en la reacción Hasta 3 semanas a 4ºc. No congelar

21 Importancia Clínica * ambas con del IMC, en ejercicio intenso (rugby) * hemolisis, * daño hepático (daño celular): hepatitis con necrosis. Al ppio GOT > GPT (su actividad es >) pero GPT tiene vida + larga. * daño musc: GOT es complementaria en IAM (infarto agudo de miocardio). Glutámico-oxalacético-transaminasa : comienza una curva menos pronunciada que la CK a las 8 horas, con un máximo a las horas y el incremento dura 4 a 6 días.

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