UNIVERSIDAD DE GUADALAJARA DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR REPORTE DE LAS PROPIEDADES BIOLÓGICAS Y BIOQUÍMICAS DE LA BABA DE CARACOL

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1 UNIVERSIDAD DE GUADALAJARA DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR LABORATORIO DE PÉPTIDOS NATURALES REPORTE DE LAS PROPIEDADES BIOLÓGICAS Y BIOQUÍMICAS DE LA BABA DE CARACOL

2 El uso medicinal de la baba de caracol se remonta a 400 ac en la antigua Grecia, donde el médico clásico Hipócrates prescribe caracoles aplastados como una forma de combatir la inflamación de la piel. También se sabe que los antiguos griegos la usaban para ingerir la sonrisa del caracol como un tratamiento para una serie de otras dolencias, desde úlceras gastrointestinales hasta la tos. La historia moderna que incluye cremas de día hechas a partir de la baba de caracol comenzó en la década de 1960, además en esa época las propiedades curativas de la baba de caracol fueron descubiertos por el oncólogo español Rafael Abad. Él llevó a cabo experimentos en los caracoles con radioterapia, la misma terapia para tratar el cáncer, y se observó que los caracoles se secretan limo con una composición diferente de lo que normalmente lo hacían. Este lodo incrementó la capacidad de la caracoles para sanar y repararse a sí mismos, la lucha contra los efectos de la radioterapia que habían estado expuestos. Rafael Abad más tarde probó la baba de caracol en la piel humana, encontrando que tenía efectos curativos similares. Más tarde, en 1980, una granja de caracoles de gestión familiar en Chile se encontraron beneficios de la baba de caracol en la piel humana. El limo de caracol tiene un efecto suavizante tenía en las manos los trabajadores agrícolas. Ingredientes crema de caracol La Baba de Caracol contiene sustancias naturales y proteínas que incluyen ácido hialurónico, glicoproteínas enzimas, péptidos antimicrobianos, cobre, y proteoglicanos. Estos ingredientes se encuentran comúnmente en cremas de cuidado de la piel y lociones. Alantoína La alantoína es un compuesto natural que se encuentra en numerosos organismo, incluyendo animales, bacterias y plantas. Es un, protector de la piel anti-irritante calmante que ayuda a aumentar el contenido de agua de la matriz extracelular, una colección de moléculas extracelulares que son secretadas por las células para proporcionar un soporte estructural y bioquímica de las células circundantes y el tejido conectivo dentro del cuerpo. La Alantoína también mejora la apariencia y el tacto de la piel, lo que aumenta la suavidad y la promoción de la replicación celular, un proceso que es esencial para la curación de quemaduras, cicatrices y heridas.

3 Colágeno y la Elastina El colágeno y la elastina son dos proteínas que son un componente esencial del tejido conectivo en todo el cuerpo. El colágeno del tejido conectivo da su flexibilidad y fuerza, y la elastina del tejido ayuda a volver a su forma original después de que se ha estirado. El colágeno es mucho más generalizado en todo el cuerpo que la elastina, pero ambos son esenciales para la función y la generación de tejido de la piel. El colágeno es tan frecuente en todo el cuerpo que representa hasta un tercio de su proteína total, o alrededor de 6% del peso total del cuerpo. Hay más de 20 tipos diferentes de colágeno en el cuerpo, y estos son responsables de todo tipo de fibras, de ligamentos y tendones, cartílago a, tejido óseo, y por supuesto, la piel. La propiedad principal de elastina es su cualidad elástica. Se vuelve a su forma original después de ser estirado o comprimido, dando a los tejidos que lo contienen su elasticidad. Se sabe que el colágeno y la elastina juegan un papel crucial en el proceso de envejecimiento. A medida que envejecemos, el colágeno se vuelve más rígido y reticulado, dando lugar a una serie de problemas relacionados con la vejez. Ambas proteínas también están vinculadas a la formación de líneas finas, arrugas y la piel curtida con el tiempo, ya que nuestra producción natural de colágeno y elastina disminuye con la edad. Ácido glicólico El ácido glicólico es un ingrediente natural que se deriva de la caña de azúcar, aunque ahora a menudo se hace sintéticamente. Es un ácido hidroxi alfa y funciona como un exfoliante, ayudando a eliminar las células muertas de la superficie de la piel. Es el ácido alfa hyrdroxy más común y es conocido por ser el más seguro, lo que es perfecto para su uso en productos de cuidado de la piel, ya que no irrita la piel como hidroxiácidos otra alfa pueden hacer. El Ácido glicólico también ayuda a aclarar la piel causa decoloración de la exposición a la luz solar, reduciendo efectivamente el sol y manchas de la edad. También es conocido por ser útil en el tratamiento de aquellos que tienen la piel que es propensa al acné y puntos negros.

4 REFERENCIAS Verdugo, P., Deyrup-Olsen, I., Aitken, M., Villalon, M. y Johnson, D. (1987). Mecanismo molecular de la secreción de mucina: El papel de blindaje cargo intragranular. J Dent Res. 66 (2): Hickman, C., Roberts, L. y Larson, A. (2002). Principios Integrales de Zoología. 11. Ed. McGraw-Hill Interamericana. España. Pp 328, 329, 330, (traducción española) Ruppert E. E; Fox RS y Barnes RD Zoología de Invertebrados: un enfoque evolutivo funcional. Belmont, CA: Thomas-Brooks / Cole. Pawlicki, JM, Pease, LB, Pierce, CM, Startz, TP, Zhang. Y. y Smith, M. (2003). El efecto de las proteínas de cola de moluscos en la mecánica de gel. El Journal of Experimental Biology. 207: 1127 a Campion, M. (1961). La estructura y la función de las glándulas cutáneas en Helix aspersa. Revista de Ciencia microscópico. 102 (2): " Por qué Baba de Caracol?". Labcconteusa.com. labcconteusa.com. María José Tribó-Bixareu et al, Resultados Preliminares de la Eficacia del Tratamiento intensivo con la secreción de Crypthophalus aspersa en la terapéutica del Envejecimiento cutáneo Med. cutan. iber. Lat. Am. 2004; 32 (6) Paulina del Pilar Lagos Mediavilla (2008) "Implementación y Validación De Una Metodología por Cromatografía líquida de alta efficiency párrafo Determinar y cuantificar ácido glicólico en secreción de caracol (Helix aspersa Müller). Estudio de la Influencia de la Alimentación y Período estacional en su concentration "Universidad Austral de Chile, Facultad de Ciencias Escuela de Química y Farmacia. [1] tesis Ph D sobre el ácido glicólico en la secreción del caracol. María José Tribó-Bixareu et al, Resultados Preliminares de la Eficacia del Tratamiento intensivo con la secreción de Crypthophalus aspersa en la terapéutica del Envejecimiento cutáneo Med. cutan. iber. Lat. Am. 2004; 32 (6) Método de la patente de Estados Unidos para la extracción de la secreción del caracol por centrifugación

5 CONCENTRACIÓN DE PROTEÍNA DE LA BABA DE CARACOL Determinación de Concentración de Proteínas (Bradford) Ensayo del 18 de Septiembre 2015 Dilucion [P mg/ Ml] Centro Media Contol Muestra Filtrada E/P 0.42

6 CARACTERIZACION BIOQUÍMICA DE LA BABA DE CARACOL PAGE SDS 4-20% / 7 de Septiembre 2015

7 CARRIL MUESTRA INTERPRETACIÓN 1 LIBRE 2 BABA DE CARACOL 21 / 08 ENRIQUE Y PASTORA Péptido de aproximadamente 250 KDa 3 LIBRE 4 RANAMICINA Bandas muy tenues 5 LIBRE 6 COLIRIO Péptido de alrededor 7 KDa 7 LIBRE 8 ERIZO BLANCO CONCENTRADO Carril barrido debido posiblemente a degradación proteica, se aprecian péptidos de 250, 150, 130, 100, 50, 37, 25, 10 y 5 KDa, posiblemente contaminación del marcador. 9 LIBRE 10 MARCADOR DE 5 A 250 KDa 11 LIBRE 12 BABA DE CARACOL 21 / 08 ENRIQUE Y PASTORA Péptido de aproximadamente 250 KDa 13 RANAMICINA 14 COLIRIO 15 ERIZO BLANCO CONCENTRADO Carril barrido debido posiblemente a degradación proteica, bandas apreciables de 150 KDa

8 PAGE SDS 4-20% / 8 de Septiembre 2015

9 PAGE SDS 4-20% / 8 de Septiembre 2015 CARRIL MUESTRA INTERPRETACIÓN 1 LIBRE 2 MARCADOR DE 5 A 250 KDa 3 LIBRE 4 ERIZO BLANCO CONCENTRADO Barrido por degradación proteica, se aprecian péptidos desde 250, hasta, 10 y 5 KDa, por contaminación del marcador. 5 COLIRIO Péptido de alrededor 7 KDa 6 FILTRADO DE ERIZO No se aprecian péptidos 7 BABA DE CARACOL 1 Péptidos de 250 KDa, 150, 100, 75, 50, 15, 13 KDa 8 BABA DE CARACOL LAPÍZ Péptido 250 KDa, 150, 90, 50, 15 y 13 KDa 9 BABA DE CARACOL 2 Se aprecian bandas de 15, 13 KDa 10 ERIZO BLANCO CONCENTRADO Barrido por degradación proteica, se aprecian péptidos desde 250, hasta, 10 y 5 KDa, por contaminación del marcador. 11 COLIRIO Péptido de alrededor 7 KDa 12 FILTRADO DE ERIZO No se aprecian péptidos 13 BABA DE CARACOL 1 Péptidos de 250 KDa, 150, 100, 75, 50, 15, 13 KDa 14 BABA DE CARACOL LAPÍZ Péptido 250 KDa, 150, 90, 50, 15 y 13 KDa 15 BABA DE CARACOL 2 Se aprecian bandas de 15, 13 KDa

10 ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE LA BABA DE CARACOL BIOENSAYOS MICROBIOLÓGICOS (ACTIVIDAD DE LAS MUESTRAS vs S. aureus G+, y vs E. coli G-)

11 MÉTODOS UTILIZADOS PARA ESTE REPORTE CONCENTRACIÓN DE PROTEÍNA DE LA BABA DE CARACOL Se llevó a cabo por medio de las técnicas de Lowry y Bradford CARACTERIZACION BIOQUÍMICA DE LA BABA DE CARACOL Se llevó a cabo por medio de Cromatografía en Geles de Poliacrilamida y Dodecil Sulfato de sodio, en geles prehechos (BioRad) (PAGE SDS) 4-20% ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE LA BABA DE CARACOL Se llevó a cabo por medio de los ensayos de determinación de Unidades Formadoras de Colonias (UFC) de Daalgard y Peck. REFERENCIAS D.M. Bollag, S.J. Edelstein. Protein Methods Wiley-Liss. P. Dalgaard, T. Ross, L Kamperman, K Neumeyer, T.A. McMeekin. Estimation of bacterial growth rates from turbidimetric and viable count data International Journal of. Food Microbiology Y. O. Peck et. al. Endogenous antimicrobial peptides and skin infections in atopic dermatitis N Engl J Med, Vol. 347, No. 15: 1151.

12 CONCLUSIONES Después de haber analizado la Baba de Caracol de Helix aspersa muller, previamente clarificada y esterilizada por filtración, proveniente del criadero de pasto ubicado en Prolongación Ángel Leaño s/n Fraccionamiento Los Guayabos, Zapopan, Jalisco, se puede concluir lo siguiente: El contenido de proteína encontrado de la muestra es significativamente alto para garantizar la calidad del producto. El análisis cromatográfico por geles de poliacrilamida demuestra que el producto contiene péptidos (proteínas), de alto peso molecular > a 120 KDa, que corresponden a Colagena y a Elastina. También se pueden apreciar bandas de péptidos de bajo peso molecular, que corresponden a antibioticos naturales y regenerantes. Por último el Bioensyo microbiológico muestra claramente que la actividad del producto de Baba de caracol estudiado presenta inhibición del crecimiento del bacilo E. coli gram negativo, e inhibición de la bacteria S. aureus gram positivos. Lo anterior significa que su uso y aplicación favorece la limpieza cutanea y la regeneración celular. Dr. Alfonso Enrique Islas Rodríguez Laboratorio de Péptidos Naturales Departamento de Biología Celular y Molecular