Nuevos paneles de PCR Real Time: El diagnóstico molecular más rápido, fiable y eficaz

Transcripción

1 IDEXX VetLab Suite IDEXX SNAP Tests Laboratorio de Referencia IDEXX Nuevos paneles de PCR Real Time: El diagnóstico molecular más rápido, fiable y eficaz Obtenga respuestas definitivas con la IDEXX RealPCR TM

2 Diagnósticos innovadores con PCR Real Time Qué es la PCR? La PCR o reacción en cadena de la polimerasa es una técnica capaz de generar in vitro grandes cantidades de un fragmento determinado de DNA, con una secuencia específica, a partir de cantidades mínimas del mismo. En términos muy simples, podríamos decir que la PCR es una técnica que reproduce un segmento específico de DNA existente en una muestra hasta que se hace medible. La PCR detecta microorganismos patógenos infecciosos o mutaciones genéticas con una gran sensibilidad y especificidad. Para detectar microorganismos patógenos infecciosos, incluso cuando estas concentraciones son muy bajas, se amplifican secuencias específicas de su DNA o RNA. Para la detección de enfermedades hereditarias se amplifican las secciones del gen donde se encuentra la alteración (mutación) correspondiente. Por ejemplo, para determinar el sexo de las aves, se amplifica y, a continuación, se caracteriza la sección del genoma correspondiente a la secuencia de polimorfismos de los cromosomas sexuales masculino y femenino.

3 Rápido - Preciso - Eficiente Ventajas de la IDEXX RealPCR La PCR Real Time es más rápida, más fiable y más precisa que la PCR convencional. En la PCR convencional, una vez concluida la reacción, se debe transferir el DNA amplificado de la máquina de PCR y realizar una electroforesis en gel para visualizarlo. La extracción del producto de la PCR del tubo de reacción y la electroforesis en gel son procedimientos que requieren tiempo y que aumentan el riesgo de una posible contaminación con DNA externo que dé lugar a falsos positivos. La PCR Real Time emplea una sonda marcada con un fluorocromo con una alta especificidad de unión al DNA diana que se va a amplificar. La fluorescencia que se produce es directamente proporcional a la cantidad de DNA diana disponible y la máquina de PCR la mide continuamente durante la amplificación. Tanto la amplificación como la detección tienen lugar a la vez en el mimo tubo de reacción. Este sistema cerrado reduce o prácticamente elimina el riesgo de contaminación por DNA externo y, por tanto, los falsos positivos, reduce el tiempo de análisis y hay una mayor rapidez en la obtención de los resultados. El paso gradual de la PCR convencional a la PCR Real Time y la incorporación de otros perfiles de diagnóstico permiten actualizar el protocolo de diagnóstico, con lo que se consigue: I Un mayor nivel de información La realización de análisis para detectar simultáneamente más de un microorganismo patógeno relevante aumentará la probabilidad de conseguir un diagnóstico correcto. II Rapidez en la obtención de resultados Los resultados se obtienen en pocos días (3 6 días como máximo*) desde la recepción de la muestra. Ill Ahorro en los costes La nueva tecnología de PCR Real Time nos permite ofrecerle perfiles diagnósticos a precios más asequibles. * Los resultados de los perfiles de diagnóstico en aves, incluida la determinación del sexo, se obtienen en una semana.

4 Fundamentos de la PCR PCR Reacción en cadena de la polimerasa Extracción sangre Células sanguíneas DNA Amplificación (Denaturalización): Separación de la doble hélice de DNA en dos hebras complementarias { B C Hibridación: los cebadores se enlazan con el DNA escindido. Síntesis: la Taq polimerasa empieza a hacer copias del DNA. Ciclos repetidos de amplificación exponencial La reacción tiene lugar en tres fases, que implican la desnaturalización, hibridación y síntesis o elongación del DNA de un antígeno específico. Durante la primera o desnaturalización, el fragmento original de DNA que se va a amplificar, se calienta hasta una temperatura muy elevada (92º a 96 ºC) provocando la separación de las dos cadenas. En la segunda fase, llamada hibridación, se rebaja la temperatura (hasta ºC) y los cebadores (o primers: cadenas complementarias simples de DNA que limitan la talla del segmento que se va amplificar) se enlazan con cada hebra sencilla de DNA escindida. La región del DNA que se debe copiar, y situada entre dos cebadores, es el segmento de DNA que se amplifica. En la tercera fase de síntesis o polimerización, la temperatura se eleva (hasta 72 C) y la Taq polimerasa (enzima termoestable), reconoce las regiones, a las cuales se han unido los primers, como una cadena doble de DNA y se une a ellas. Una vez unida, la Taq empieza a hacer copias del DNA en cuestión. Las tres etapas constituyen un ciclo completo de PCR en el que la cantidad de DNA diana se duplica. El ciclo entero se repite varias veces resultando cada uno en el doble de la cantidad de DNA presente. Después de muchos ciclos, el DNA diana que estaba anteriormente en pequeña cantidad, se ha amplificado a millones de copias en pocas horas.

5 Respuestas definitivas, calidad contrastada Calidad probada Con nuestro laboratorio central europeo de Biología Molecular Vet Med Lab ofrecemos los tests de PCR (IDEXX RealPCR ), así como una amplio conjunto de perfiles diagnósticos de PCR Real Time, que se pueden efectuar con una única muestra del paciente. Los resultados de los análisis IDEXX RealPCR se obtienen normalmente a los pocos días de la recepción de las muestras, siendo los plazos de entrega más rápidos del mercado. Tanto el sistema cerrado de PCR Real Time, como el sistema de PCR convencional de IDEXX Vet Med Lab se someten a un estricto proceso de control y gestión constante de la calidad de acuerdo con nuestros estándares de acreditación (DIN ISO 17025, DIN y MIQ [Estándares de calidad para el diagnóstico microbiológico de enfermedades infecciosas]). Esto le garantiza la obtención de resultados fiables en los que puede confiar. Línea de asistencia científica Tiene alguna pregunta acerca de IDEXX RealPCR? Le interesa algún perfil diagnóstico aún no incluido? Estaremos encantados de recibir sus opiniones y sugerencias. Para cualquier pregunta relacionada con el diagnóstico y la interpretación de los resultados no dude en ponerse en contacto con nuestra línea de asistencia científica. ( Tel. gratuito Fax info@vetlabsl.com

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