Colección IMYZA LAB BPCV

Transcripción

1 Colección IMYZA LAB BPCV Rhizobium leguminosarum bv phaseoli Bradyrhizobium sp. Bradyrhizobium sp. Bradyrhizobium japonicum Laboratorio BPCV IMYZA-INTA Castelar

2 Laboratorio de Bacterias Promotoras del Crecimiento Vegetal Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola INTA Castelar Dirección: Las Cabañas y Los Reseros CC 25 (1712) Castelar, Bs. As. Teléfono: /4420 Responsable: Ing. Agr. Alejandro Perticari Curadora: Sra. Gabriela Contrera Página web / Catálogo: en construcción Miembro de WFCC: WDCM31 Sinorhizobium meliloti

3 Rhizobium leguminosarum bv phaesoli Bradyrhizobium spp. Objetivo Coleccionar microorganismos rizosféricos benéficos para la agricultura. Garantizar la pureza, viabilidad y estabilidad genética de la diversidad microbiana conservada.

4 Criterio: capacidad de nodulación en leguminosas y FBN Glycine max Soja Leucaena leucocephala Phaseolus vulgaris Poroto Servicios que ofrece: Investigación Referencia Provisión (iniciando BPM) Financiamiento: servicio y otros

5 Grupo taxonómico Denom. Cant. Especie tipo Huesped A 114 Rhizobium leguminosarum bv trifolii Trifolium sp. B 294 Sinorhizobium meliloti Medicago sativa, Melilotus sp., Trigonella sp. C 205 Bradyrhizobium spp. Phaseolus vulgaris, Leucaena leucocephala, otras D 95 Rhizobium leguminosarum bv Lens culinaris, Vicia sativa, otras viceae E 439 Bradyrhizobium japonicum Glycine max F 124 Rhizobium etli Phaseolus vulgaris, Leucaena leucocephala G 34 Bradyrhizobium lupini Lupinus sp., Ornithopus sp. H 31 Rhizobium galegae Galega sp. K 1 Robinia sp. LL 65 Mesorhizobium loti Lotus sp. Q 1 Hedysarum sp. R 22 Mesorhizobium cicer Cicer arietinum X 1 Onobrychis sp.

6 Obtención de los Microorganismos de otras colecciones de distribución como ARS USDA Collection ATCC - USA INRA Francia MIRCEN - Brasil CSIRO - Australia Sinorhizobium meliloti Bradyrhizobium japonicum

7 Obtención de los Microorganismos de aislamientos Suelos Conservación Foto. Julie Ardley-2010 Purificación gram Ensayo de infectividad Rep-PCR Determinación molecular Nódulos

8 Preservación Utilizadas freezer -18ºC Congelamiento ultrafreezer -80ºC Subcultivo heladera 4-5ºC Otras probadas Agua Soportes Suelo

9 Calidad de los cultivos Controles: periódicos de viabilidad, pureza identificación por técnicas moleculares Nodulación y fijación de N 2 Documentación: registro

10 CARACTERISTICAS DE CEPA IDEAL DE RIZOBIOS INFECTIVIDAD EN TODOS LOS CULTIVARES EFECTIVIDAD EN TODOS LOS CULTIVARES COMPETITIVIDAD, SELECCIONANDO CON CUIDADO CAPACIDAD PARA MULTIPLICARSE EN CALDOS. SOBREVIVENCIA EN INOCULANTE, SEMILLA Y SUELO. HABILIDAD DE MIGRACIÓN DESDE EL LUGAR DE INOCULACION HABILIDAD PARA COLONIZAR SUELO DE RIZOSFERA DEL HUESPED HABILIDAD PARA SOBREVIVIR EN ADVERSAS CONDICONES COMO DESECACIÓN, CALOR, FRÍO. ESTABILIDAD GENÉTICA EN CONSERVACIÓN Y EN CALDOS.

11 Sistemas empleados para la evaluación del sistema rizobioleguminosa Tipo de semillas Sistema Soporte Evaluar que Parámetros? Soluciones Nutritivas Grande Phaseolus Jarras de Leonard Arena de Cuarzo Nodulación y rendimiento Medio Norris y Date, o Sandman o Jensen o Hoagland y Arnon Glycine Jensen, Hoagland y Arnon, Fahreus Vigna Bolsas de crecimiento Papel absorbente Nodulación Jensen, Hoagland y Arnon, Fahreus Canavalia Macetas de barro Vermiculita, Perlita, Nodulación y rendimiento Jensen, Hoagland y Arnon, Fahreus cocido Turba+Arena Arbóreas Macetas plásticas Vermiculita,Perlita,T Nodulación y rendimiento Jensen, Hoagland y Arnon, Fahreus urba+arena Tubos de ensayo Papel absorbente Nodulación Pequeña Medicago Tubos de ensayo Medio Agarizado Nodulación Jensen, Crone s, Fahreus Trifolium Bolsas de crecimiento Papel absorbente Nodulación Jensen, Crone s, Fahreus Lotus Macetas Plásticas Vermiculita, Perlita,Turba+Aren a Nodulación y rendimiento Jensen, Crone s, Fahreus Vicia Macetas de barro Vermiculita,Perlita,T Nodulación y rendimiento Jensen, Crone s, Fahreus cocido urba+arena Lens Frascos de vidrio Medio Agarizado Nodulación y rendimiento Jensen, Crone s, Fahreus

12 Selección de cepas: Rizobios aislados de nódulos y/o del suelo del son seleccionados en condiciones de laboratorio, invernáculo y campo.

13 Ensayos de infectividad: Cámara de crecimiento Peso fresco de parte aérea Peso biomasa aérea seca Peso fresco de raíces Peso seco de raíces Número de nódulos Peso fresco de nódulos Peso seco de nódulos Nódulos en raíz primaria Nódulos en raíces secundarias Altura de planta Largo de raíces Interacción con CV Soja Parámetros de evaluación Ensayos de efectividad: Invernáculo Peso fresco de parte aérea Peso biomasa aérea seca Peso fresco de raíces Peso seco de raíces Número de nódulos Peso fresco de nódulos Peso seco de nódulos Nódulos en raíz primaria Nódulos en raíces secundarias Altura de planta Largo de raíces % N en planta Total de N Interacción con CV soja

14 Ensayos de efectividad: Campo Peso fresco de parte aérea Peso biomasa aérea seca Peso fresco de raíces Peso seco de raíces Número de nódulos Peso fresco de nódulo Peso seco de nódulos Nódulos en raíz primaria Nódulos en raíces secundarias Capacidad competitiva * Rendimiento % N en planta Total de N Proteína y aceite Persistencia en el suelo

15 Colección de Microorganismos del IMYZA Cepas Recomendadas para la inoculación de leguminosas ESPECIE LEGUMINOSA NOMBRE COMUN CEPA Aeschynomene americana C5-C95 Acacia sp. C36-C37-C38-C39 Adesmia sp C130 Arachis hipogaea MANÍ C25-C26-C27-C145-C95 Astragalus cicer C115 Cajanus cajan GUANDÚ C95 Canavalia ensiformis POROTO SABLE C167-C5 Cassia rotundifolia C5 Centrosema virginianum C135 Cicer arietinum GARBANZO R4-R11-R17-R26 Crotalaria spp C95 Desmodium canum C88 Desmodium incarnatum C88 Desmodium uncinatum C88 Dolichos lablab C163 Glycine max SOJA E109 Hedysarum coronarium Q4 Indigofera sp. C5-C95

16

17

18 Soybean grain yield (kg/ha) En Argentina dos cepas de B.japonicum son empleadas para producción de inoculantes: E109 (USDA 138) y 61A273 (privada). INTA continua evaluando nuevas cepas para el desarrollo de inoculantes Evaluación en campo de cepas de B.japonicum en 15 sitios experimentales ( ) Control E109 SEMIA 5079 E109 + SEMIA 5079

19 Comienzo en V2 en forma lenta hasta R3. Desde ahí en adelante se registra la mayor actividad. Picos máximos de actividad se registran en R5-R6. La tasa va de 0.5-1kg N/d hasta 3-5 kgn/d. Si no hay suficiente N en el suelo la actividad aumenta en floración pudiendo decaer más rápidamente. Mayor aporte de fotosintatos podría alargar el período de fijación. FIJACION DE N2

20 FBN EN ARGENTINA Variable Bat (tn/ha) Nódulos (mg/pl) Nt (tn/ha) %FBN NdFBN (kg/ha) NS (kg/ha) RG (tn/ha) Control 6,95 a 179 a 0,175 a 58 a 111 a 63 a 3,591 a E109 7,83 b 220 a 0,197 b 62 a 132 b 66 a 3,836 b Mezcla (50% 7,43 ab 203 a 0,188 ab 62 a 124 b 64 a 3,780 ab

21 NdFBN (kg/ha) Comportamiento sobre los Ambientes de producción Nitrógeno derivado de FBN (kg/ha) 9 ENSAYOS-7 SITIOS (n=135) Inoculado con E109 = 1,0615x + 1,7696 R² = 0,9014 Control con soja previa= 1,0183x - 14,063 R² = 0, Promedio del sitio NdFBN (kg/ha)

22 Nitrógeno derivado de FBN y RINDE Promedio de 9 ENSAYOS-7 SITIOS NdFBN E109: 21 kg/ha (+18%) 74% Casos positivos 105 Control E RINDE E kg/ha (+6.8%) 74% Casos positivos Control E109

23 Muchas gracias!!!!!!!