Oferta Tecnológica / IVIA

Transcripción

1 XI Foro INIA. Valencia. 03 de octubre, 2013 Adaptación al cambio climático en la producción de frutos cítricos y subtropicales Oferta Tecnológica / IVIA Laboratorio de Virología e Inmunología Departamento de Patología Vegetal Centro de Protección Vegetal Instituto Valenciano de Investigaciones Agrarias (IVIA). Moncada, Valencia Antonio OLMOS, Edson BERTOLINI, M. Teresa GORRIS, M. Carmen MARTÍNEZ, José A. PINA, Nuria DURÁN-VILA, Mariano CAMBRA

2 Instituto Valenciano de Investigaciones Agrarias (IVIA). Centro de Protección Vegetal y Biotecnología Laboratorio de Virología e Inmunología Experiencia: -Desarrollo y validación de métodos y protocolos serológicos y moleculares para la detección y diagnóstico de patógenos de plantas. - Control de virus, viroides y fitoplasmas de especies leñosas mediante métodos convencionales (con base epidemiológica) y biotecnológicos (plantas transgénicas que expresan genes de anticuerpos).

3 IVIA LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD (nivel de contención P2) Centro de Protección Vegetal y Biotecnología

4 Laboratorio Nacional de Referencia del MAGRAMA para diagnóstico de virus, viroides y fitoplasmas de especies leñosas, patata, batata y fresa IVIA Invernadero de Bioseguridad (P2) Miembro de la Red Nacional RE-LAB de Laboratorios de Alerta Biológica de Presidencia de Gobierno coordinada por Instituto Carlos III de Salud.

5 OFERTA: 1) Producción de reactivos de diagnóstico y diseño y validación de protocolos y kits de detección y diagnóstico simples, robustos y precisos.

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8 Tissue print real-time PCR

9 Immobilized samples can be stored until use or mailed to a laboratory without biological risks.

10 Transferir 3 µl del extracto directament para la amplificación por PCR a tiempo real Añadir 100 μl de agua destilada u otro tampón

11 Tecnología validada para detección de patógenos de cítricos por PCR en tiempo real - CTV - CVEV - CEVd y HSVd - Spiroplasma citri - Ca. Liberibacter spp. (causing HLB) - X. citri subsp. citri Disponibles comercialmente:

12 OFFICIAL EU PROTOCOL FOR CTV DETECTION Host plant with symptoms or suspected Biological indexing Serological tests Molecular tests Screening tests Inoculation of woody indicator plants (Mexican lime) Tissue print-elisa with 3CA5+3DF1 monoclonal antibodies or DAS-ELISA with mono or polyclonal antibodies IC-RT-PCR (using PIN1/PIN2 primers) or IC-RT-nested-PCR (using PEX1/PEX2/ PIN1/PIN2 primers) Typical symptoms Confirmation by serological or molecular screening tests No symptoms Serological and molecular screening tests IC-RT-PCR (using PIN1/PIN2 primers) or IC-RT-nested-PCR (using PEX1/PEX2/ PIN1/PIN2 primers) Tissue print-elisa with 3CA5+3DF1 monoclonal antibodies or DAS-ELISA with mono or polyclonal antibodies Positive results in both tests Positive results by one of the confirmation tests HOST CTV INFECTED Bulletin OEPP/EPPO Bulletin 34, (2004)

13 Secuenciación automática Secuenciación masiva New generation sequencing Muestra Purificación de: dsrna, ssrna, sirna o RNA total y control de calidad Preparación de genotecas de cdna Análisis bioinformático: Ensamblado de secuencias para detección de virus y viroides (15 días/1 mes)

14 En un futuro próximo ELISA, PCR en tiempo real y secuenciación masiva serán los métodos de elección para detección y diagnóstico con capacidad de substituir a los métodos biológicos.

15 OFERTA: 2) Control de virosis y sus vectores con bases epidemiológicas y diseño de sistemas de producción de plantas libres de virus en viveros.

16 Muchas gracias por su atención