Universidad Autónoma de Chiapas. Facultad de Ciencias Químicas Ext. Ocozocoautla

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Miguel Serrano Villalba
hace 6 años
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ENSAYO SOBRE LA APLICACIÓN DEL ANALISIS DE VARIANZA EN LAS CIENCIAS DE LA SALUD Facultad de Ciencias Químicas Ext. Ocozocoautla Nombre del Catedrático: Dra. Ana Olivia Cañas Urbina.

1 ENSAYO SOBRE LA APLICACIÓN DEL ANALISIS DE VARIANZA EN LAS CIENCIAS DE LA SALUD Facultad de Ciencias Químicas Ext. Ocozocoautla Nombre del Catedrático: Dra. Ana Olivia Cañas Urbina. Materia: bioquímica. Nombre de los Integrantes: Ariana Archila Jiménez Emmanuel López Ochoa Dalver Yeudiel Pérez López Catherin Concepción Pérez Sánchez Nombre de la práctica: Determinación de la actividad de la enzima succinato deshidrogenasa. Modulo: Cuarto semestre único Practica: 5 Fecha: 30 de Marzo de 2016

2 INTRODUCCION. Las enzimas son proteínas que tienen como función disminuir la energía de activación en una reacción; para cada reacción tiene una enzima específica, las enzimas suelen clasificarse en seis clases: oxidorreductasas, transferansas, hidrolasas, liasas, isomerasas y ligasas. En este caso hablaremos de la enzima succinato deshidrogenasa o succínico deshidrogenasa es un complejo proteico ligado a la membrana interna mitocondrial participa en el ciclo de Krebs y en la cadena de transportes de electrones. Esta enzima participa en la reacción número seis del ciclo de Krebs produciendo fumarato y de igual manera participa en la cadena de transportes de electrones en el complejo II. En Bioquímica (2007) se afirmó que la enzima succinato deshidrogenasa es la única enzima del ciclo de Krebs que no se encuentra en la matriz mitocondrial, sino que en la membrana mitocondrial interna, con el sitio de unión del sustrato accesible desde la matriz. Es además la única en el ciclo asociada a un grupo prostético flavínico (FAD) mediante el cual los equivalentes de reducción del succinato son transferidos a la ubiquinona, componente de la cadena de transporte de electrones. En general la función bioquímica del FAD es oxidar alcanos a alquenos, mientras que el NAD + oxida alcoholes a aldehídos o cetonas. El malonato es un fuerte inhibidor competitivo de la enzima. De acuerdo a Gunawardena & Fernando (2008) El colorante azul de metileno puede funcionar como aceptor de electrones artificial (agente oxidante), reemplazando al NAD+ en la reacciones enzimáticas en sistemas vivientes. Cuando el azul de metileno sustituye al NAD+, se torna incoloro a medida que se reduce, mientras los compuestos orgánicos involucrados en este metabolismo se van oxidando. El NADH o azul de metileno reducido pueden ser oxidados nuevamente en presencia de oxígeno molecular, por el sistema de transporte de electrones de la mitocondria, en la cadena respiratoria. Esta reacción causa que el colorante vuelva a adquirir su color azul propio de su estado oxidado.

OBJETIVO: Que el alumno aprecie la actividad de le enzima Succinato Deshidrogenasa mediante una reacción colorimétrica. MATERIALES Y METODOS.

3 OBJETIVO: Que el alumno aprecie la actividad de le enzima Succinato Deshidrogenasa mediante una reacción colorimétrica. MATERIALES Y METODOS. Se trabajó de acuerdo a Alvarado, Dávila, Ramos, García & Flores (2008) con las siguientes modificaciones: Se utilizó hígado de pollo fresco. RESULTADOS. A continuación se presentan los cálculos realizados en la práctica: Figura 1. Calculo de ácido succínico al 3%

4 Figura 1.1 cálculo de fenol al 90%. Figura 1.2 NaOH al 10%

5 Figura 1.3 Tubo número 1 (con una coloración azul) y tubo 2 (coloración naranja). DISCUSION DE RESULTADOS. Al realizar la práctica identificamos el cambio de coloración en los tubos al agregarle azul de metileno, lo cual este cambio se identificó más en el tubo 1, ya que tenía como reactivo el fenol y el azul de metileno, lo cual ocurrió una oxidación y presento un color azul brillante. En el tubo 2 la muestra no cambio de color debido a que sufrió una reducción. Gunawardena & Fernando (2008) dijeron que el colorante azul de metileno puede funcionar como aceptor de electrones artificial (agente oxidante), reemplazando al NAD+ en la reacciones enzimáticas en sistemas vivientes. Cuando el azul de metileno sustituye al NAD+, se torna incoloro a medida que se reduce, mientras los compuestos orgánicos involucrados en este metabolismo se van oxidando. CONCLUSION. Llegamos a la conclusión que el azul de metileno es un aceptor de electrones artificial, ya que remplazo al NAD+ en la reacción. Cuando ocurre una oxidación, la muestra torna un color azul brillante y cuando se reduce es incoloro. En el caso del fenol inhibe la enzima de tal manera que desnaturaliza las proteínas.

6 ANEXOS. Cuestionario. 1. Cuáles son los colores del azul de metileno en sus estados oxidado y reducido? Cuando esta oxidado se encuentra en color azul y cuando esta reducido se vuelve incoloro. 2. Cuál es la función del fenol en la reacción? Inhibe la actividad de las enzimas ya que desnaturaliza las proteínas. 3. En qué vía metabólica está involucrada la enzima succinato deshidrogenasa? Lista los activadores, inhibidores, Km y mecanismo de rx de ésta enzima. Está involucrada en el ciclo de Krebs y en la fosforilación oxidativa. En el ciclo de Krebs participa en la reacción número 6 actúa en el succinato para producir fumarato.

7 Diagrama de flujo. Practica 5. Determinación de la actividad de la enzima succinato deshidrogenasa. Pesar 1g de hígado de pollo recientemente sacrificado. En el mortero molerlo con 3 o 4 ml de ácido succínico hasta obtener una masa. Transferir en partes iguales a 2 tubos proseguir según la tabla del manual de laboratorio de bioquímica. Observe los cambios. Incumbe ambos tubos 10 minutos en el baño María a 50 C.

8 Referencias Bioquimica. (2007). Obtenido de Alvarado, H. D., & Flores, M. (2008). Manual de laboratorio. Obtenido de Gunawardena, A., & Fernando, S. (2008). La respiracion celular como sistema redox. obtenido de 47 Montenegro, N. (2014). Enzima succinico deshidrogenasa. Obtenido de

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