PROSTAGLANDINA CON UN PROTOCOLO SELECT- SYNCH SOBRE LA DETECCION DE CELO Y TASA DE PREÑEZ EN VACAS HOLANDO-ARGENTINO DE ALTA PRODUCCION.

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1 UNIVERSIDAD NACIONAL DE CÓRDOBA FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS ESCUELA PARA GRADUADOS INSTITUTO DE REPRODUCCIÓN ANIMAL CÓRDOBA (IRAC). EFECTO DE UNA SEGUNDA DOSIS DE PROSTAGLANDINA CON UN PROTOCOLO SELECT- SYNCH SOBRE LA DETECCION DE CELO Y TASA DE PREÑEZ EN VACAS HOLANDO-ARGENTINO DE ALTA PRODUCCION. Trabajo Final Para optar al Grado Académico de Especialista en Reproducción Bovina Córdoba

2 INDICE 1. RESUMEN INTRODUCCIÓN... 5 HIPÓTESIS DE TRABAJO... 6 OBJETIVO GENERAL... 7 OBJETIVOS ESPECÍFICOS MATERIALES Y MÉTODOS ANIMALES Y LUGAR DE TRABAJO DETERMINACIONES O TRATAMIENTOS ANÁLISIS DE DATOS RESULTADOS DISCUSIÓN CONCLUSION BIBLIOGRAFÍA

3 3

4 1. RESUMEN El objetivo del presente trabajo fue evaluar el agregado de una segunda dosis de prostaglandina (PGF) a un protocolo Select-Synch para mejorar la tasa de detección de celos, la tasa de concepción y la tasa preñez en vacas Holando Argentino de alta producción. La hipótesis de trabajo fue que el agregado de una segunda dosis de PG 12 h después de la primera dosis mejora la tasa de detección de celos y la fertilidad del protocolo. Se utilizaron 1077 vacas Holando Argentino de un tambo del Oeste Bonaerense con una media de 2,5 partos, 177 días en leche, 2,8 puntos de condición corporal (CC, escala de 1-5), y una producción de 33,7 litros de leche/día. En la tarde del día 0 (turno PM) todos los animales fueron diagnosticados como cíclicos mediante ecografía (Mindray 6600, 7,5 MHz), y fueron incorporados en un protocolo Select Synch. A todos los animales se le determinó la CC, y se los asignó al azar a un grupo control ( Grupo 1, caravana número impar) o un grupo tratamiento ( Grupo 2, caravana número par). Asimismo, se les aplicó una dosis de acetato de buserelina ( mg; Receptal, MSD). En el día 7 (turno PM), a todos los animales se les aplicó una dosis de clorprostenol sódico (526 ug; Ciclase DL, Syntex). Solamente a las vacas del grupo 2, en el día 8 (turno AM) se les administró una segunda dosis de Clorprostenol sódico (526 ug; Ciclase DL, Syntex). Posteriormente se realizó la inseminación artificial a las vacas detectadas en celo (mediante score de pintura) registrando cada servicio, el turno en el que se inseminó, toro, e inseminador. Los datos fueron analizados por el PROC GENMOD de SAS. La tasa de detección de celos fue superior en el grupo 2 que en el grupo 1 (P<0.05). La tasa de concepción y de preñez fue similar entre ambos tratamientos. Se concluye que si bien hubo una mayor tasa de detección de celos no hubo una mejora en la tasa de concepción de preñez por el agregado de una segunda dosis de PG en un protocolo Select Synch en vacas lecheras de alta producción. Palabras claves: Prostaglandina - Select Synch - Detección de celos. 4

5 2. INTRODUCCIÓN La eficiencia reproductiva de los rodeos lecheros ha disminuido durante los últimos 10 años debido principalmente a un aumento en la producción individual de las vacas, a un aumento del número total de animales, y a una intensificación de las medidas de manejo del rodeo. Esta disminución de la eficiencia reproductiva se debe principalmente a una disminución en el porcentaje de detección de celos (disminución de la exactitud y en la intensidad de detección de celos) de dichos rodeos. (De la Sota, 2006). La alta producción lechera lleva a concentraciones reducidas de estradiol circulante produciendo una corta duración del estro. Las vacas con una alta producción (~40 kg/d) tuvieron una duración de estro (6,2 + 0,5 h) más corta (P < 0,001) que en las vacas con baja producción lechera (10,9 + 0,7 h). (López, 2004). La combinación de GnRH (Buserelina 8ug, Día 0) y PG (Día 7) es un método práctico para el control de la dinámica folicular y la función luteal, y el aumento de la precisión de la sincronización del estro en vacas posparto cíclicas y acíclicas. Este método reduce considerablemente el período de tiempo necesario para la detección de celo; (se sincroniza el ciclo estral de 70 a 80 % de las vacas cíclicas) dentro de un intervalo de 4 días sin ningún efecto perjudicial sobre la tasa de fecundidad (65 a 85%). (Twagiramungu, 1995). La primera inyección de GnRH es usada para inducir la ovulación/luteinización del folículo dominante e iniciar una nueva onda folicular 1 a 2 días más tarde (Thatcher et al., 1989; Macmillan y Thatcher, 1991; Twagiramungu et al., 1994, 1995). La luteólisis es inducida por medio de la administración de PGF. En este momento, las vacas que están ciclando pueden presentar dos cuerpos lúteos, uno espontáneo o natural proveniente de una ovulación previa al primer tratamiento de GnRH, y el otro en respuesta a la ovulación del folículo dominante presente al momento de dicho tratamiento. (Cruppe y Michael, 2011). Tres de cada doce vacas en lactancia tardía con un CL inmaduro al día 5, responden a una dosis simple de dinoprost, mientras que doce de cada doce vacas tratadas con dos dosis de 12 horas de diferencia tuvieron una regresión del CL completa. (Pursley y Martins, 2011). En el programa de sincronización 5-d COSynch + CIDR la administración de dos dosis de prostaglandina en vacas postparto resulta en tasas de preñez superiores a aquellas obtenidas luego del uso de una sola inyección de PGF2a. (Cruppe y Michael, 2011) Los costos asociados al incremento en el manejo del ganado (los animales deben ser encerrados una vez más) y a la segunda inyección de prostaglandina son compensados con el incremento del 11% en las tasas de preñez (Bridges et al., 2008). Los beneficios de la segunda dosis 5

6 de prostaglandina son reflejados en un incremento de entre el 15 al 17% en las tasas de gestación a la IATF en comparación con la administración de una dosis única de PGF2α o CLP (Kasimanickam et al., 2009). Animales que recibieron dos dosis de PGF2α exhibieron una mejor (P < 0,05) respuesta al celo (94%) que aquellas que solamente recibieron una sola dosis de CLP (77,9%), sin embargo, el intervalo al estro (66,4 ± 1,2 h) no fue significativamente diferente entre tratamientos. En un segundo experimento, los resultados revelaron que los animales tratados con dos dosis de prostaglandina presentaron una mejor tasa de preñez en comparación con aquellos que recibieron una sola dosis de CLP. Sin embargo, esta diferencia no fue estadísticamente significativa (68,8% y 57,9%, respectivamente; P = 0,08). (Cruppe y Michael, 2011). Evidencia combinada entre estos estudios y aquellos realizados en el estado de Virginia por Kasimanickam et al. (2009) sugieren que dos dosis de PGF2α son necesarias para maximizar la tasa de preñez en el programa de sincronización 5-d CO-Synch + CIDR. En otro estudio publicado por Archbald et al. (1993) concluyeron que dos inyecciones de Prostaglandina en un intervalo de 8 horas son más eficaces en la luteólisis que una sola inyección. También informaron que el intervalo desde el tratamiento a la aparición de celo no se vio afectada por el momento de tratamiento (una o dos veces), de Prostaglandina en la vaca. Las causas de fallas de las PGF en la luteólisis (10% de las vacas tratadas), no están claros, pero pueden relacionarse con: a) falta de respuesta de los CL; b) tratamiento demasiado pronto en la fase luteal; c) técnica incorrecta de inyección intramuscular, ya que si se aplica en grasa o en tejido ligamentoso no tiene igual efecto; d) corta vida media de la hormona exógena (Peters y Ball, 1995). Tras lo expuesto anteriormente surge la necesidad de estudiar la combinación del protocolo Select-Synch con el uso de una segunda dosis de prostaglandina en vacas lecheras de alta producción, para mejorar las tasas de detección de celos, concepción, y preñez respectivamente. HIPÓTESIS DE TRABAJO La aplicación de una segunda dosis de prostaglandina aumenta la detección de celos, concepción y preñez en vacas Holando Argentino de alta producción sincronizadas con un protocolo Select-synch. 6

7 OBJETIVO GENERAL Evaluar la tasa de detección de celo, tasa de concepción y tasa de preñez en vacas Holando Argentino de alta producción, usando un protocolo Select-synch, o utilizando el mismo protocolo con el agregado de una segunda dosis de prostaglandina 12 horas después del tratamiento. OBJETIVOS ESPECÍFICOS Comparar los porcentajes de detección de celos, porcentaje de concepción y porcentaje de preñez, entre el grupo testigo (Grupo 1) al que se le aplica un protocolo Select-synch, y el grupo problema (Grupo 2) que se le realiza un protocolo Select-synch al que 12 horas después de la aplicación de prostaglandina del protocolo original, se le inyecto una dosis más de prostaglandina. Evaluar factores no relacionados con el protocolo como número de partos, días post parto, número de servicios, estados corporales, producción de leche al momento del estudio, intervalo entre tratamiento y detección del celo, toro utilizado e inseminador. 3. MATERIALES Y MÉTODOS 3.1. ANIMALES Y LUGAR DE TRABAJO Este trabajo se llevó a cabo en tres tambos, perteneciente a una misma empresa. Todos ubicados en la cuenca lechera oeste de la provincia de Buenos Aires, sobre ruta nacional 5, km 302, a unos 11 kilómetros de la ciudad de Carlos Casares, Partido de Carlos Casares, que está ubicado en el ángulo noroeste de la Provincia de Buenos Aires, a 312 km. de la ciudad de Buenos Aires, y a 170 km. del límite con La Pampa. Geográficamente se corresponde con la Sub-Región Pampa húmeda, específicamente con lo que se define como Área Oeste, en transición hacia el Área de la Depresión del Río Salado (Politis, 1988). Geomorfológicamente es una zona de muy reducida pendiente y escaso escurrimiento de aguas, por lo que predominan las aguadas, cañadones y lagunas intermitentes, en su mayoría de agua salada. El clima es templado, con variado régimen de lluvias, por lo que se dan ciclos de grandes sequías y de inundaciones. 7

8 Los animales sobre los que se realizó el estudio son bovinos Holando-Argentino. Se estudiaron 1077 animales, con promedios de 2,5 partos, 177 días en leche, 2,8 puntos de estado corporal (usando la escala de 1 a 5), y 33,7 litros/día al momento del estudio. Tabla 1. Promedios productivos y reproductivos de cada grupo experimental y del total de animales estudiados. Grupo n Partos Días en Leche C. Corporal Litros de leche , ,81 32, , ,82 34,80 Total 1077 A 2,5 A 177 A 2,8 A 33,7 A La dieta al momento del estudio era a base de verdeos (rye grass), pasturas consociadas (alfalfa, trébol blanco, cebadilla, pasto ovillo, avena), ración (cascarilla de soja, maíz, extrusado de soja y minerales), además silajes de maíz y cebada, heno, gluten y urea DETERMINACIONES O TRATAMIENTOS Los animales a estudiar se dividieron en dos grupos, al grupo testigo se lo llamó Grupo 1 (n=562), a estos animales se les realizo el protocolo Select-synch convencional. Y el grupo problema llamado Grupo 2 (n=515) se le realizo el protocolo Select-synch pero se le aplicó una segunda dosis de Clorprostenol 12 horas después. En el día 0 (turno PM) a todos los animales diagnosticados como cíclicos mediante ecografía (Mindray 6600, 7,5 MHz), se les aplicaba una dosis de 0,0105 mg de acetato de Buserelina (Receptal, MSD), se evaluaba el estado corporal y se pintaba de manera distinta (figura 3) a los animales con terminación par en la caravana (Grupo 2 o problema), y a aquellos con terminación impar (Grupo 1 o control). Esta diferenciación es para poder ser identificados a la hora de continuar con el protocolo, y posteriormente sacar celo. En el día 7 (turno PM), a todos los animales se les aplicaba 526 ug de Clorprostenol sódico (Ciclase DL, Syntex), y en el caso del grupo problema (grupo 2), el día 8 (turno AM) se volvía a dar 526 ug de Clorprostenol sódico (Ciclase DL, Syntex). Posteriormente se realizó la 8

9 inseminación a celo detectado, dejando registro de cada servicio (turno en el que se inseminó, toro, e inseminador). Se evaluó por ultrasonografía a todos los animales que no retornaban al celo a partir de los 30 días, en busca de preñez o vacuidad. Luego se volcaron los datos a una planilla de Excel, tomando en cuenta: el número de identificación del animal, tambo al que pertenece, número de partos, fecha del último parto, fecha de inicio y fin del tratamiento, días postparto al tratamiento, que tipo de protocolo se le realizó, número de inseminaciones realizadas previas al protocolo, estado corporal al inicio del tratamiento, último control lechero, fecha del servicio, intervalo entre fin del tratamiento y detección de celo en horas, turno en el que se inseminó (AM/PM), toro con el que se inseminó, inseminador, y diagnóstico por ultrasonografía. Figura 1: Protocolo de tratamiento realizado en los animales del Grupo 1. Todos los animales recibieron una dosis de acetato de buserelina (GnRH) el d0 PM y cloprostenol sódico (PGF) el d7 PM. Figura 2: Protocolo de tratamiento realizado en los animales del Grupo 2. Todos los animales recibieron una dosis de acetato de buserelina (GnRH) el d0 PM y cloprostenol sódico (PGF) el d7 PM. Los animales del grupo 2 recibieron una segunda inyección de PGF el d 8 AM. 9

10 Figura 3: Identificación y diferenciación de los dos grupos con pintura. Izquierda: Marca de pintura Grupo 1; Derecha: Marca de pintura Grupo ANÁLISIS DE DATOS Los datos fueron analizados por el PROC GENMOD de SAS. El modelo para analizar el porcentaje de detección de celos incluyo los efectos de tratamiento (grupo 1 [control], grupo 2 [tratado]), numero de parto (1, 2 y 3, 4), producción de leche diaria ( 30, >30 litros/día). El modelo para analizar el porcentaje de concepción y de preñez incluyo los efectos del tratamiento, número de partos, producción de leche diaria, toro e inseminador. Se tomó P<0,05 como valor de significancia. 4. RESULTADOS Con respecto a la detección de celos, el grupo problema (Grupo 2) tuvo un incremento en la tasa de deteccion comparado con el grupo testigo (Grupo 1; 72,82% [375/515] vs 58,54% [329/562]), con diferencias estadísticamente significativas (P<0,05) entre grupos. Sin embargo, no se encontraron diferencias significativas en la tasa de detección de celos debidas a número de partos o producción de leche diaria (P>0,05). 10

11 Cuando se evaluó la tasa de concepción, no se encontraron diferencias significativas (P>0,05) entre grupos (Grupo 2; 39,69% [129/325] vs 35,39% [132/373]). El porcentaje de preñez fue numéricamente mayor para el grupo problema que para el grupo testigo (22,95% [129/562] vs. 25,63% [132/515] respectivamente); pero al igual que en la tasa de preñez no se encontraron diferencias significativas (P>0,05). Tanto en la tasa de concepción, como en la de preñez, no se encontraron diferencias significativas debidas a número de parto, producción de leche diaria, toro o inseminador, (P>0,05). Tabla 2. Porcentaje de detección de celo, porcentaje de concepción y porcentaje de preñez en vacas Holando Argentino (n=1077). sincronizados con un protocolo Select-Synch con 1 (Grupo 1) o Grupo 1 Grupo 2 Total Porcentaje de detección de celos 58,54 A (329/562) 72,82 B (375/515) 65,37 (704/1077) Porcentaje de concepción 39,69 (129/325) 35,39 (132/373) 37,39 (261/698) Porcentaje de preñez 22,95 (129/562) 25,63 (132/515) 24,23 (261/1077) 2 dosis de PGF (Grupo 2). Superíndices A y B diferentes entre columnas, difieren P<0.05 Con respecto al intervalo prostaglandina-celo, las vacas del Grupo 1 concentraron sus celos entre las 60 y las 96 horas después de haber aplicado la dosis de prostaglandina (figura 5). Mientras que las vacas del Grupo 2 concentraron sus celos entre las 48 y las 84 horas (figura 6), adelantando la detección de celos 12 horas. Se encontraron diferencias significativas entre ambos grupos (P<0,05), pero no se encontraron diferencias significativas cuando se correlacionó el intervalo prostaglandina-celo con el número de parto, producción de leche diaria, toro o inseminador (P>0,05). Tabla 3. Porcentaje de detección de celo, y distribución en horas (desde la aplicación de PGF al celo) en vacas Holando Argentino (n=1077) sincronizados con un protocolo Select-Synch con 1 (Grupo 1) o 2 dosis (Grupo 2) de PGF. Grupo 1 Grupo 2 Total Porcentaje de detección de celos Todas 58,54 A (329/562) 72,82 B (375/515) 65,37 (704/1077) -168 a -12 7,91 A (20/253) 18,60 B (32/172) 12,24 (52/425) 0 a ,37 A (301/534) 70,65 B (337/477) 63,11 (638/1011) 132 a 216 3,32 (8/241) 4,11 (6/146) 3,62 (14/387) Superíndices A y B diferentes entre columnas, difieren P<

12 Frecuencia Intervalo PGF-celo (h) Figura 4. Histograma de frecuencias del intervalo prostaglandina-celo (-168 a 216 h) para todas las vacas detectadas en celo (n=704). 100 TRT1 80 Frecuencia Intervalo PGF-celo (h) Figura 5. Histograma de frecuencias del intervalo prostaglandina-celo (0 a 120 h) para las vacas del Grupo 1 detectadas en celo (n=301). 100 TRT2 80 Frecuencia Intervalo PGF-celo (h) 12

13 Figura 6. Histograma de frecuencias del intervalo prostaglandina-celo (0 a 120 h) para las vacas del Grupo 2 detectadas en celo (n=337). 5. DISCUSIÓN La hipótesis de este trabajo fue que la aplicación de una segunda dosis de prostaglandina aumenta la tasa de detección de celos y el porcentaje de preñez en vacas Holando Argentino de alta producción sincronizadas con un protocolo Select-Synch. Los resultados obtenidos aceptan la primera parte de la hipótesis ya que la utilización de una segunda dosis de PGF aumentó la tasa de detección de celos concentrándolos entre las 48 y 72 h pos inyección; pero por el contrario rechazan la segunda parte de la hipótesis ya que no aumentó la tasa de concepción y de preñez. Esta experiencia coincidió con la de Cruppe y Michael 2011, donde se vió una mejoría respecto al porcentaje de detección de celos con diferencias estadísticamente significativas, y una mejoría en el porcentaje de preñez, aunque esta vez, al igual que la experiencia de Cruppe y Michael 2011, no hubo diferencias estadísticamente significativas. Pero a diferencia de la experiencia de Archbald 1993, y de los autores mencionados antes, si se vio diferencia en el intervalo de tiempo entre la aplicación de prostaglandina y la detección de celo. Restara seguir evaluando la respuesta del protocolo problema (Grupo 2). Porque queda la duda de la caída sobre el porcentaje de concepción, respecto al resultado obtenido en el protocolo testigo (Grupo 1), si se debió a la acción de la segunda dosis de prostaglandina o a un factor externo al protocolo. Se hubieran necesitado vacas por tratamiento para que las diferencias actuales del 3% de porcentaje de preñez hubieran sido significativas. Aun así, el porcentaje de preñez se vio aumentado debido al mayor porcentaje de vacas inseminadas (detectadas en celo), a pesar del menor porcentaje de concepción. Desde el punto de vista económico, para el protocolo del Grupo 2 se debe utilizar una dosis más de prostaglandina, y también se agrega el tiempo empleado por el profesional para realizar esa aplicación extra. Por esto habría que poner en la balanza el incremento del costo versus el beneficio de aumentar la tasa de preñez. También existe la posibilidad de evaluar la implementación de otras herramientas reproductivas (diferentes protocolos hormonales, herramientas de detección de celo, etc.). 13

14 6. CONCLUSION Aunque la aplicación de una segunda dosis de prostaglandina aumentó la tasa de detección de celos y la tasa de concentración de los mismos, tanto la tasa de preñez como la tasa de concepción no se vieron favorecidas. La tasa de detección de celos, la tasa de concepción y la tasa de preñez no se vieron afectadas por el número de lactancias, la producción de leche, el toro utilizado o el inseminador. Por todo esto se concluye que aplicando una segunda dosis de prostaglandina en un protocolo Select-synch, aumentará el número de animales inseminados en menor espacio de tiempo. 7. BIBLIOGRAFÍA Archbald LF, Risco C, Chavatte P, Constant S, Tran T, Klanpstein E, Elliot J Estrus and pregnancy rate of dairy cows given one or two doses of prostaglandin F2 alpha 8 or 24 hours apart. Publicado en internet (abstract), disponible en: Bridges GA, Helser LA, Grum DE, Mussard ML, Gasser CL & Day ML 2008 Decreasing the interval between GnRH and PGF2α from 7 to 5 days and lengthening proestrus increases timed-ai pregnancy rates in beef cows. Theriogenology Cruppe LH, Michael L. Day Maximización de las tasas de preñez con inseminación artificial a tiempo fijo con el programa Co-Synch + CIDR de 5 días. IX simposio de reproducción animal IRAC, 9, 10 y 11 de septiembre de Córdoba, Argentina. De la Sota, RL. (Coordinador) Manejo reproductivo en rodeos de leche. Primera Edición. IRAC FCA, UNC. 19 pp. Lopez H, Satter LD, Wiltbank MC. Relationship between level of milk production and estrous behavoir of lactating dairy cows. Anim Reprod Sci 2004;81: Kasimanickam R, Day Ml Two doses of prostaglandin improve pregnancy rates to timed-ai in a 5-day progesterone-based synchronization protocol in beef cows. Theriogenology71, Peters, A.R., Ball, P.J.H Reproduction in Cattle, 2nd ed. Blackwell Science Ltd, Oxford. 14

15 Politis G Paradigmas, modelos y métodos en la Arqueología de la pampa Bonaerense. Arqueología Contemporánea Argentina-Actualidad y Perspectivas pp. Pursley JR, Martins JP Efecto del cuerpo lúteo accesorio en la luteólisis completa y subsecuente tasa de concepción en vacas que son tratadas con protocolos que mejoran la ovulación a la primera GnRH del Ovsynch. IX Simposio de reproducción animal, pp. Thatcher WW, Macmillan KL, Hansen PJ & Drost M 1989 Concepts for regulation of corpus luteum function by the conceptus and ovarian follicles to improve fertility. Theriogenology Twagiramungu H, Guilbault LA & Dufour JJ 1995 Synchronization of Ovarian Follicular Waves with a Gonadotropin-Releasing Hormone Agonist to Increase the Precision of Estrus in Cattle: A Review. Journal of Animal Science Twagiramungu H, Guilbault LA, Proulx JG & Dufour JJ 1994 Influence of corpus luteum and induced ovulation on ovarian follicular dynamics in postpartum cyclic cows treated with buserelin and cloprostenol. Journal of Animal Science

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