BACTERIAS FITOPATÓGENAS OBJETIVOS Introducción a la clasificación de las bacterias fitopatógenas (taxonomía y nomeclatura) Reconocer las características de las bacterias fitopatógenas Reconocer síntomas y signos más comunes 12 de setiembre de 2011 Ing. Agr. María José Montelongo Conocer el proceso de diagnóstico de una enfermedad bacteriana Conocer las etapas de desarrollo de una enfermedad bacteriana Conocer las medidas de manejo adecuadas para las enfermedades Algunos agentes fitopatógenos en una célula vegetal Algunos datos El microscopista alemán Antoni van Leeuwenhoek (1632-1723), fue el primero que vio una bacteria de su placa dental Robert Koch (1843-1910) demostró por primera vez, en 1876, que una bacteria causaba la enfermedad de antrax en las ovejas Se conocen alrededor de 1.600 especies de bacterias, la mayoría son saprófitas y benéficas Muchas especies causan enfermedades en humanos (tuberculosis, neumonia, fiebre tifoidea) y en animales (brucelosis y antrax) Alrededor de 100 especies de bacterias causan enfermedades a plantas Bacterias fitopatógenas Árbol filogenético Bacterias fitopatógenas Procariotas unicelulares Cápsula Pared celular compleja Membrana citoplasmática Citoplasma Material genético nuclear y extranuclear Flageladas La mayoría Gram- Variabilidad genética transformación, conjugación, transducción y mutación 1
Bacterias fitopatógenas No producen endosporas Se reproducen por fisión binaria Alta tasa de multiplicación Bacterias fitopatógenas La mayoría tienen forma de bacilo (1-2μm x <1μm) Hay bacterias filamentosas Streptomyces spp. causante de la sarna de la papa: filamentosa Agrobacterium, Erwinia, Pseudomonas y Xanthomonas: bacilos Bacterias fitopatógenas Saprófitos facultativos: se multiplican en el huésped, pero pueden sobrevivir en restos y en el suelo. Algunas se consideran habitantes del suelo (Pseudomonas, Agrobacterium, Streptomyces). MAYORÍA Parásitos obligados: bacterias fastidiosas, limitadas al xilema y Mollicutes (fitoplasmas y espiroplasmas) Clase Mollicutes Forman un grupo monofilético dentro de las bacterias Gram + Carecen de pared celular, sólo rodeados por la membrana plasmática Son los procariotas más pequeños que pueden autoreplicarse Parásitos (dependen de la célula hospedante para vivir) Resistentes a penicilina (interfiere con la producción de la pared celular) pero sensibles a tetraciclina y cloranfenicol (interfieren con la síntesis de proteínas) Clase Mollicutes Los fitopatógenos son transmitidos por insectos que se alimentan del floema Mollicutes fitopatógenos: fitoplasmas y espiroplasmas taxonomía Taxonomía Características taxonómicas: Morfológicas, Culturales (forma, bordes, color de las colonias) Fisiológicas Bioquímicas Patológicas (capacidad para atacar a determinado huésped) No se han podido cultivar in vitro Cultivables in vitro 2
flagelos Principales géneros de Bacterias fitopatógenas Monótrico Lofótrico Polar Anfítrica Perítrica Pared celular Principales géneros de Bacterias fitopatógenas GRAM (+) Clavibacter Curtobacterium Streptomyces GRAM (-) Erwinia Pseudomonas Xanthomonas Xylella Agrobacterium Características culturales Morfología de colonia en medio sólido Coloración de colonias Xanthomonas se caracteriza por su color amarillo el que se visualiza mejor creciendo sobre un medio YDC Forma Elevación Borde 3
Características fisiológicas Reacción de o/f Reacción de oxidación/fermentación La mayoría de las bacterias fitopatógenas tienen metabolismo oxidativo Metabolismo oxidativo Pseudomonas Xanthomonas Xylella Agrobacterium Clavibacter Metabolismo fermentativo Erwinia Características fisiológicas Producción de pigmentos fluorescentes Pseudomonas fluorescens se caracteriza por producir pigmentos fluorescentes (izq) nomenclatura Género especie patovar (variación patogénica) nomenclatura Género especie patovar (variación patogénica) Xanthomonas campestris pv. cucurbitae Xanthomonas campestris pv. vesicatoria Xanthomonas campestris pv. fragariae 4
Manchas foliares Manchas en frutos Cancros Marchitez Hiperplasia Podredumbre Costras Necrosis Agallas o tumores Agrobacterium tumesfasciens Agallas o tumores Lesiones en frutos Psudomonas savastanoi pv.savastanoi Xanthomonas arboricola pv. pruni Lesiones en frutos Lesiones en frutos Xanthomonas axonopodis pv. citri Pseudomonas syringae pv. papulans Xanthomonas campestris pv. cucurbitae 5
Podredumbres blandas Podredumbres blandas Afecciones vasculares Marchitez Manchas foliares Manchas foliares Manchas foliares 6
Manchas foliares Manchas Pantoea stewartii Xanthomonas translucens Cribado Defoliación Cancros Costras 7
Signo de bacterias Zooglea: Aspecto mucilaginoso, constituido de masa bacteriana y restos del vegetal. Técnicas para ver el signo de bacterias Microcorrida: para hojas Técnicas para ver el signo de bacterias Test de flujo: para tallos Diagnóstico de enfermedades Observación de síntomas y signos Aislamiento en medios de cultivo Prueba de hipersensibilidad en no huésped Prueba de Gram Características culturales Pruebas de patogenicidad Pruebas bioquímicas y fisiológicas Pruebas serológicos (ELISA) Técnicas moleculares La bibliografía indica que podría ser una bacteria!! Diagnóstico de enfermedades Hipersensibilidad en no húesped 1. Se realiza una inoculación masiva en el mesófilo de una hoja de una planta NO HUESPED 2. Se observa la ocurrencia (o no) de reacción de hipersensibilidad 8
Hipersensibilidad en no húesped Diagnóstico de enfermedades La aparición de una reacción de hipersensibilidad indica que la bacteria inoculada es patógena. Prueba de patogenicidad Ciclo de la enfermedad Sobrevivencia / Fuentes de inóculo Diseminación Inoculación Penetración Colonización Aparición de los síntomas Inoculación mediante aspersión Sobrevivencia Las bacterias pueden sobrevivir en: restos vegetales semillas hospedantes alternativos suelo diseminación Las principales vías de diseminación de las bacterias fitopatógenas son Agua de salpicado, escorrentía, riego o lavado. Insectos vectores Herramientas contaminadas Plantas o partes de ellas infectadas Hombre 9
diseminación diseminación El salpicado por el agua de lluvia o riego es una de las principales vías de diseminación de las bacterias fitopatógenas. El agua de riego o las herramientas contaminadas pueden determinar el contagio en una fila de plantas. Diseminación por semillas infectadas o infestadas diseminación penetración Las bacterias necesitan de heridas o aberturas naturales para producir infección. Estomas, hidátodos, lenticelas penetración colonización El agua es un elemento indispensable Las bacterias producen lisis de los tejidos que colonizan Las bacterias se multiplican exponencialmente en condiciones favorables Pueden colonizar el parénquima intercelularmente Pueden colonizar los haces vasculares. 10
Ciclo del cancro cítrico Manejo de enfermedades No existe un control químico efectivo Las medidas de manejo se basan en la prevención Es fundamental incidir sobre el ambiente (microclima) haciéndolo menos favorable al desarrollo de la enfermedad Manejo de enfermedades Enfermedades que no están presentes en el país: control legal Distribución de Huanglonbing Manejo de enfermedades Enfermedades presentes: aplicar medidas de manejo que afecten la tasa de multiplicación Ambiente sobrevivencia diseminación Enfermedad Patógeno Huésped Control cultural Control cultural Partir de material sano Suelo libre del patógeno Evitar las condiciones de humedad Elegir sitios bien drenados Canteros altos Evitar encharcado Ajustar el riego Disminuir la densidad de plantas Control de malezas Control cultural Control cultural Variedades resistentes Sustrato/Suelo libre de la enfermedad Evitar heridas Eliminar plantas o partes infectadas Desinfectar herramientas, manos, estructuras Rotación de cultivos 11
Control cultural Control cultural Cortinas rompe viento Severidad puede disminuir hasta 75 % Uso de material sano Tratamiento de semillas desinfección termoterapia Control cultural Sustrato estéril o no infestado Evitar contaminar con suelo infestado Control químico Fungicidas con actividad bacteriostática: Cúpricos Fungicidas con zinc Productos con Yodo Solarización Antibióticos de uso agrícola: Sulfato de Estreptomicina Kasugamicina Control químico Desventajas de los antibióticos Alto riesgo de que las bacterias se vuelvan resistentes Riesgos a la salud del aplicador y consumidor Prohibidos en los Programas de Producción Integrada Bibliografía AGRIOS, G. 2005. Plant pathology. 5nd. ed. London, Elsevier Academic Press. 922 p. KADO, C. 2010.Plant bacteriology. Minessota, APS Press. 336 p. TRIGIANO, R.; WINDHAM, M.; WINDHAM, A. 2008. Plant pathology, concepts and laboratory exercises. 2nd. ed. Florida, RC Press. 558 p. 12