Reproducción clonal in vitro de plantas de Jatropha curcas para el establecimiento del cultivo en el CNEABR. Ing. Carmen Gutierrez Córdoba
Objetivo General Implementar el protocolo de micropropagación de tempate (Jatropha curcas) e Higuerilla (Ricinus comunnis).
Objetivos Específicos Validar el protocolo de reproducción in vitro de Jatropha curcas y Ricinus comunnis. Evaluar diferentes tratamientos en la micropropagación de Jatropha curcas y Ricinus comunnis. Regenerar plantas in vitro a través de diferentes explantes. Aclimatar las plantas cultivadas in vitro.
Metodología Fase 0: Selección y preparación de las plantas madres. Fase 1: Elección de los explantes y su desinfección. Fase 2: Establecimiento in vitro Fase 3: Multiplicación Fase 4: Regeneración y enraizamiento Fase 5: Aclimatación.
Fase 0: Selección y preparación de las plantas madre Las semillas de Higuerilla y J. curcas se colectaron en Guápiles y las plantas madres fueron traídas de Santa Cruz, Guanacaste.
Fase 1: Elección de los explantes y su desinfección. Explantes Desinfección 1-Lavado con agua y jabón 1-Semilla Sexual 2- Alcohol de 70 por 10 min. (semilla) 3-Hipoclorito de sodio al 1% por 15 min. (Hoja) Hipocótilo 96 Hoja embrionaria. 2- Hojas 4- Flameado.(Semilla) con alcohol de
Fase 2: Establecimiento in vitro por medio de semilla Las semillas se pusieron a germinar en el medio M.S completo. Macronutrientes micronutrientes Quelatos de hierro vitaminas Ph5.8 Phytagel, azúcar
Fase3: Establecimiento in vitro utilizando explantes de hoja, e hipocotilo. Los explantes fueron inoculados en tres medio diferentes todos con el MS completo lo que vario fueron los reguladores: de crecimiento: Medio M.S Tratamiento 1 IBA 2mg/l Tratamiento 2 Tratamiento 3 BA 3mg/l 2,4D 2mg/l BAP AIA 2mg/l 0.5mg/l
Resultados Obtenidos Producción de callo embriogénico
Resultados obtenidos 1-El medio MS completo dio buenos resultados para la germinación de semillas. Algunas semillas no germinaron debido a que se presento contaminación por hongos principalmente endógenos muchas eran semillas viejas contaminadas. Se recomienda utilizar semilla viables de buena calidad no contaminadas si se va a realizar una multiplicación masiva de jatrofa in vitro, utilizar semillas debidamente identificadas.
RESULTADOS OBTENIDOS 2-Los tratamientos 1 y 2 presentaron una producción de callo en un 100% en explantes de hipocotilo y hojas. Se dio una multiplicación alta de callo friable. Se han realizado tres subcultivos a intervalos de 2 meses cada uno. Se puede recomendar estos dos medios para la reproducción masiva de callo a través de estos explantes en jatrofa,
Callos obtenidos en explantes de hojas de jatrofa
Resultados obtenidos 3-El tratamiento 3 es para lograr la regeneración de plantas a través de callo sin embargo hasta la fecha los resultados no han sido positivos todavía se mantiene el callo sin regenerar plantas. Algunos callos regeneraron algunas hojas y raíces pero se secaron.
Regeneración de algunos callos
Multiplicación de callo a través de hojas de jatrofas
Regeneración
Resultados obtenidos Se recomienda realizar un mejor control de las condiciones físicas en el cuarto de crecimiento, aquí se tienen ornamentales, orquídeas y otro tipo de plantas esto no permite controlar estas condiciones especificas para cada cultivo por lo que afecta su desarrollo. Se tienen 2 aires acondicionados que no logran homogenizar la temperatura en el cuarto de crecimiento
Resultados obtenidos Se recomienda instalar otro aire acondicionado en el área de crecimiento el año entrante para mejorar las condiciones físicas del área de trabajo. Se están probando cuatro medios nuevos para regeneración de plantas a través de callo. Los resultados se verán el próximo año hasta el momento no se han tenido resultados. Se recomienda realizar la compra de reguladores de crecimiento nuevos para ver si estos medios no dan resultado porque los reguladores a usarse están vencidos.
Medio para regeneración de plantas TRATAMIENTOS #1 MS completo #2 MS completo #3 MS completo #4 MS completo Acido giberelico 0.1ml/l 0.5mg/l BA 1.5mg/l 0.5mg/l KINETINA 0,04mg/l IBA 0.05mg/l 2mg/l 1.5mg/l
La transferencia tecnológica de estos resultados se realizara incorporando este protocolo en el curso auxiliar de laboratorio para la micropropagación de plantas, también impartiendo charlas a instituciones o personas interesadas reproducir jatrofa e higuerilla in vitro Publicación del protocolo en el boletín del núcleo agropecuario.