Recolección y aislamiento de cepas nativas en laboratorio de hongos comestibles P. ostreatus y P. pulmonarios en la provincia de Cartago
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- Lucía Pérez Palma
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1 Recolección y aislamiento de cepas nativas en laboratorio de hongos comestibles P. ostreatus y P. pulmonarios en la provincia de Cartago Giovanni Brenes Barquero Núcleo de Formación y Servicios Tecnológicos Agropecuarios
2 Obtención de cepas silvestres _ La demanda de hongos comestibles en el país ha crecido _ Esto ha generado una necesidad de capacitación _ Para esto se hace necesario la obtención de material de reproducción
3 Obtención de cepas silvestres _ Se puede obtener cepas de origen silvestre en el país _ El INA cuenta con la infraestructura necesaria para producir cepas propias _ En el país se hace difícil obtener semilla _ Importada sin garantía de suministro
4 Objetivo General Recolectar y aislar cepas nativas de Pleurotus sp, de la provincia de Cartago en los meses de marzo a octubre, para utilizarlas como fuente de semilla en el Centro nacional Especializado en Agricultura Orgánica (CNEAO).
5 Objetivos Específicos 1_ Recolectar cepas nativas de Pleurotus sp en la provincia de Cartago 2_ Aislar en laboratorio, cepas nativas de Pleurotus sp para su utilización como fuente de semilla en el CNEAO 3_ Preservar las cepas aisladas para pruebas de producción, a futuro, en el CNEAO
6 Muestreo y Metodología El muestreo se realizó esperando las condiciones ideales para la salida de los carpoforos La muestras se llevaron al Laboratorio de Fitoprotección del CNEAO, La Chinchilla, Cartago Para el cultivo se utilizó PDA al 1%, siguiendo procedimientos ya establecidos para esta tarea
7 Muestreo y Metodología Básicamente el procedimiento se realiza en cámara de transferencia en donde se cultiva una sección del cuerpo Esta sección se deposita en placas petri conteniendo PDA como medio de cultivo (6 x M y 10 x M final) Previo a este paso, dependiendo del tamaño de la muestra, se desinfecta con lavados con Cloro, Alcohol y agua estéril. Si la muestra es suficientemente grande se usa el contexto sin lavados.
8 Muestreo y Metodología Las placas cultivadas se dejaron en incubación, lo suficiente como para establecer contaminación o crec. Puros Los cultivos puros, fueron guardados en tubos de ensayo y en refrigeración para su posterior utilización
9 Resultados Localidad Muestra Cervantes C4, C5 y C6 Bajo Pacuare C8-1, C8-2 Chinchilla C3 y C7 Ochomogo C9 Cartago Centro C1 San Marcos C2
10 Resultados De las 10 cepas obtenidas solo 4 pudieron aislarse en forma pura El resto tuvo problemas de contaminación que no permitió rescatarlas. ( Contaminación ambiental) Las muestras variaron en tamaño
11 Resultados Muestra Contaminado Cepa pura Contaminado
12 Resultados Traslado a tubos Tubos para incubación Crecimiento de cepa pura
13 Conclusiones 1_ La recolección de muestras silvestres de Pleurotas sp, es posible al menos en la Provincia de Cartago. 2_ La muestras obtenidas revelan que se pueden obtener de diferentes zonas altitudinales de la Provincia, ya que las mismas fueron encontradas en Bajo Pacuare, zona baja de Turrialba y Ochomogo, zona alta del Cantón Central de Cartago
14 Conclusiones 3_ La contaminación de los cultivos de micelio se debieron a microorganimos comunes a los habitad de ambientes en descomposición natural, en el cual se encuentran bacterias, levaduras, hongos etc. y entre estos últimos el Pleurotus sp también un descomponedor de lignina y celulosa. 4_ Se recolectaron 9 muestras de las cuales 4 se lograron aislar y almacenar para futuras pruebas de producción en el CNEAO.
15 Recomendaciones 1_ Coordinar la Identificación de las especies de Pleurotus sp recolectadas a través de un taxónomo, para su posterior utilización como cepas madre en el CNEAO. 2_ Recolectar muestras con cuerpos de Hongos más grandes para incrementar la posibilidad de éxito en el procedimiento de aislamiento, para nuevas cepas.
16 Recomendaciones 3_ Utilizar al menos 10 platos por aislamiento inicial para lograr obtener puntos de crecimiento micelial puros en algunos de los platos con medio de cultivo. 4_ Se recomienda realizar una segunda etapa de manejo de estas cepas, el cual consiste en la siembra de las mismas en sustratos comerciales o comúnmente utilizados en producciones comerciales de este hongo, en una planta acondicionada para tal fin.
17 Recomendaciones 5_ El procedimiento utilizado aquí representa una experiencia para incorporar, en un futuro, al Módulo de producción de hongos o asesorias que se soliciten, transmitiendo al productor la manera de poder obtener su semilla para su planta y así no depender de un suministro externo que en ocasiones le pueda fallar.
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