NIVELES DE RESISTENCIA DE Aedes aegypti (DIPTERA: CULICIDAE) AL INSECTICIDA TEMEPHOS EN EL DEPARTAMENTO DE CALDAS

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1 ISSN agron. 18 (1): 69-76, 2010 NIVELES DE RESISTENCIA DE Aedes aegypti (DIPTERA: CULICIDAE) AL INSECTICIDA TEMEPHOS EN EL DEPARTAMENTO DE CALDAS Sandra Milena Galvis * y Alberto Soto-Giraldo ** * I.A. Universidad de Caldas. Correo electrónico: smgalvis@hotmail.com ** I.A., M.Sc., Ph.D. Profesor Universidad de Caldas. Correo electrónico: alberto.soto@ucaldas.edu.co Recibido 25 de enero; aprobado: 15 de febrero de RESUMEN El estudio se realizó en el laboratorio de entomología del Departamento de Fitotecnia de la Universidad de Caldas, Manizales, con una temperatura promedio de 21 C y humedad relativa del 70%. Se evaluó la resistencia y susceptibilidad de larvas de Aedes aegypti al compuesto órgano fosforado Temephos en ocho municipios y un corregimiento del departamento de Caldas. Se expusieron larvas de tercer y cuarto instar de A. aegypti a cuatro concentraciones del insecticida (1.0, 0.5, 0.05, 0.01ppm), un testigo relativo (acetona) y un testigo absoluto (sin aplicación). Las poblaciones de A. aegypti del municipio de Palestina y el corregimiento de Arauca presentaron nivel de resistencia, con porcentajes de mortalidad de 48.8 y 43.8%, respectivamente; en los municipios de Viterbo, Marmato y Risaralda, se presentó susceptibilidad a las aplicaciones con mortalidad de 64.2; 65.8 y 63.8%, respectivamente. Las DL 50 y DL 95 del producto fueron de 0.76 y 1.45ppm, respectivamente. Palabras clave: insecto, resistencia, salud humana, susceptibilidad. ABSTRACT RESISTANCE LEVELS OF Aedes aegypti (DIPTERA: CULICIDAE) TO TEMEPHOS INSECTICIDE IN THE DEPARTMENT OF CALDAS The study was carried out in the Entomology Laboratory of the Plant Science Department at the Universidad de Caldas, Manizales, with an average temperature of 21 C and 76% relative humidity. The resistance and susceptibility of Aedes aegypti larvae to the Temephos organ phosphorus compound in eight municipalities and a village of the department of Caldas were evaluated. Third and fourth instars larvae of A. aegypti were exposed to four concentrations of the insecticide (1.0, 0.5, 0.05, 0.01ppm), a relative control (acetone) and an absolute control (without application). The A. aegypti from populations from the municipality of Palestina and the village of Arauca showed levels of resistance, with mortality percentages of 48.8 and 43.8%, respectively; in the municipalities of Viterbo, Marmato and Risaralda, susceptibility to the application was observed with a mortality rate of 64.2, 65.8 and 63.8%, respectively. The DL 50 and DL 95 of the product were 0.76 and 1.45ppm, in that order. Key words: insect, human health, resistance, susceptibility.

2 70 Sandra Milena Galvis y Alberto Soto-Giraldo INTRODUCCIÓN La Fiebre del Dengue es la enfermedad viral más extendida en el mundo (Moncayo, 2004). En Colombia, el 95% de los conglomerados humanos por debajo de los msnm se encuentran infestados con el mosquito vector Aedes aegypti (Rodríguez et al., 2003). Ante la ausencia de una vacuna para humanos, las medidas para el control de la enfermedad consisten en estrategias con enfoque ecosistémico en salud a partir de la participación- acción de las comunidades con el propósito de reducir los sitios de cría del insecto, así como también en la utilización regular de insecticidas químicos dirigidos a las poblaciones naturales del vector (Padilla et al., 2004). Los insectos de la familia Culicidae son conocidos vectores de malaria o paludismo (Carr et al., 1943; García & Lorenzo, 1979; Navarro et al., 1986; Adak et al., 1990; Collins & Roberts, 1991; Onapa & Pape, 1993), fiebre amarilla (Blackil, 2002; De la Torre et al., 1961; Gratz, 2004), dengue (Gubler et al., 1985; Knox et al., 2003), filariasis (Pinger, 1985; Marquetti et al., 1986; Mani et al., 1991); y encefalitis virales como: encefalitis equina del este y oeste, encefalitis equina venezolana y encefalitis de San Luis y tipo California (Grubb et al., 1968; García, 1977; Nayar, 1982; Boike et al., 1989; Mani et al., 1991; O Meara, 1992). Aunque el control de A. aegypti se realiza mediante la participación activa comunitaria al eliminar los sitios de cría del mosquito, el uso de insecticidas en ocasiones es necesario en las prácticas de control. De ahí la importancia de conocer los mecanismos de resistencia a los insecticidas, con el fin de realizar un uso correcto de estos (Peiris & Hemingway, 1990; Santacoloma, 2008). El dengue, la fiebre del dengue hemorrágico y la fiebre amarilla son enfermedades víricas transmitidas por esta especie que causan grandes impactos en la salud pública (Lehane, 1991). Dichas enfermedades están diseminadas en áreas urbanas y van a la par con la distribución geográfica de su principal vector: Aedes aegypti Linneaus (Gubler, 1992; OMS, 1981). Esta especie es la más distribuida en el mundo (Service, 1992). En 1960 se reportaron los primeros casos de resistencia a insecticidas organofosforados y carbamatos en A. aegypti. Fox (1961) reportó una cepa en Puerto Rico resistente 10X a malatión y diazinón. La capacidad de resistir a malatión se asoció con la detoxificación mediada por enzimas de actividad específica carboxilesterasas. La posible función de las enzimas específicas en el proceso de detoxificación de insecticidas en A. aegypti fue observada en larvas de la especie (Chen & Sudderuddin, 1978). Estos estudios sugieren la presencia de enzimas detoxificadoras específicas que cumplen un papel importante en el mecanismo de resistencia a organofosforados. En este trabajo se evaluó la resistencia y susceptibilidad que presentan las larvas de A. aegypti al insecticida Temephos en ocho municipios y un corregimiento del departamento de Caldas, por ser el producto más utilizado para el control de este insecto plaga. MATERIALES Y MÉTODOS El estudio se realizó en el laboratorio de Entomología de la Universidad de Caldas, Manizales, a 21 C de temperatura y 70% de H.R. Se recolectaron larvas de A. aegypti en los municipios de Dorada, Palestina, Belalcázar, San José, Marmato, Viterbo, Anserma, Risaralda y en el corregimiento de Arauca. Se evaluó el producto Temephos con un 93,3% de pureza suministrado por la Dirección Territorial de Salud de Caldas, sobre las larvas de tercer y cuarto instar de la plaga de cada una de las localidades estudiadas. Este producto se encuentra autorizado para ser aplicado en salud pública en Colombia. En los bioensayos se utilizaron concentraciones del insecticidade 1.0, 0.5, 0.05, y 0.01 ppm; además, como testigo relativo se utilizó acetona y como testigo absoluto agua. El criterio de mortalidad se evaluó con los individuos muertos a las 24 h de post-exposición.

3 Niveles de resistencia de Aedes aegypti 71 Se utilizó un diseño completamente aleatorizado con cinco repeticiones por tratamiento (20 larvas por repetición) y la variable evaluada fue porcentaje de mortalidad. Para el análisis de varianza y demás procesos estadísticos se empleó el programa estadístico SAS (Statistical Analysis System). Se determinó la susceptibilidad o resistencia que presentó A. aegypti al insecticida Temephos. Se realizó la comparación de medias para la variable evaluada mediante la prueba Tukey con un nivel de significancia del 0,05. Se calculó la DL 50 y DL 95 con los resultados de los municipios donde se presentó el mayor porcentaje de mortalidad del insecto mediante el modelo de regresión Logit, utilizando el programa Curve Expert 1.3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Debido a la campaña anti-aegypti llevada a cabo entre los años cincuenta y setenta, Colombia estuvo libre del vector con excepción del municipio de Cúcuta, en el departamento de Norte de Santander, en el límite con Venezuela. Esta misma población registró resistencia fisiológica a DDT en 1956 (Busvine & Coker, 1958; Cruz, 2002). El análisis de varianza realizado para determinar la susceptibilidad o resistencia de A. aegypti al insecticida Temephos, indicó que hubo un efecto altamente significativo entre las concentraciones estudiadas y entre las localidades en cuanto la mortalidad de las larvas (Tabla 1). Tabla 1. Análisis de varianza entre localidades y concentraciones del insecticida Temephos sobre la mortalidad de A. aegypti. Variables Valor y grado de significancia Municipios 6,55 ** Tratamientos 281,15** agron. 18 (1): 69-76, 2010 Con base en las pruebas comparativas de Tukey se pudo apreciar que el porcentaje de mortalidad de las larvas de A. aegypti fue significativamente superior en las localidades de Marmato, Viterbo y Risaralda con 65,8, 64,2 y 63,8%, respectivamente, las cuales difieren de las localidades de Palestina y Arauca con 48,8 y 43,8% de mortalidad, respectivamente. Esto se debe posiblemente a que en estas localidadesse realizan aplicaciones indiscriminadas del insecticida Temephos en forma calendarizada y con sobredosis. Los pobladores dependen exclusivamente de este producto para controlar a la plaga, ya que la Dirección Territorial de Salud de Caldas les suministra dicho insecticida. En los municipios de San José, Belalcázar, Anserma y la Dorada se presentaron porcentajes de mortalidad de larvas del 60, 59,2, 58,3 y 55%, respectivamente (Tabla 2). La resistencia que se presentó en las localidades de Palestina y Arauca a este insecticida en las poblaciones naturales de A. aegypti evaluadas en este estudio, aunada a la coincidencia de estos resultados con los obtenidos en otros estudios para esta especie en Colombia (Anaya et al., 2007; Salazar et al., 2007), permiten suponer que las actuales poblaciones del vector provienen de Norte de Santander, desde donde se reinfestó el país, y que la resistencia fisiológica a este insecticida constituye un factor heredado y posiblemente fijado en el genoma de las poblaciones naturales de A. aegypti presentes en Colombia.

4 72 Sandra Milena Galvis y Alberto Soto-Giraldo Tabla 2. Efecto del insecticida Temephos entre las localidades sobre la mortalidad de A. aegypti. Localidad Mortalidad (%) Marmato 65,8a* Viterbo 64,2a Risaralda 63,8a San José 60,0ab Belalcázar 59,2ab Anserma 58,3ab La Dorada 55,0ab Palestina 48,8c Arauca 43,8c * Valores promedios seguidos por letras distintas denotan diferencias significativas según la prueba de Tukey al 5%. Con respecto a las diferentes concentraciones evaluadas se aprecia que con la concentración de 0.5 a 1.0 ppm del insecticida se obtuvo una mortalidad del 88,9 y 85%, respectivamente, presentándose una diferencia altamente significativa comparada con el testigo relativo (14,7%) y el testigo absoluto (0%), respectivamente. Con las concentraciones de 0.01 y 0.05 ppm del insecticida se obtuvo un porcentaje de mortalidad para cada concentración de 78,6% (Tabla 3). Tabla 3. Efecto del insecticida Temephos entre las concentraciones sobre la mortalidad de A. aegypti. Concentración (ppm) Mortalidad (%) ,9a * ,0ab ,6b ,6b Testigo relativo 14,7c Testigo absoluto 0,0d * Valores promedios seguidos por letras distintas denotan diferencias significativas según la prueba de Tukey al 5%. Al estimar la dosis letal media DL 50 y la dosis letal DL 95 mediante el modelo de regresión Logit, utilizando los resultados de los municipios donde se presentó un efecto significativamente superior del insecticida (Marmato, Viterbo y Risaralda), se determinó que dicho modelo tuvo un coeficiente

5 Niveles de resistencia de Aedes aegypti 73 de determinación de 0,8036, lo cual indica que la concentración de insecticida afecta la mortalidad del insecto en un 80,36% para los tres municipios muestreados. La ecuación obtenida mediante este modelo fue la siguiente: Mediante esta ecuación se determinó la DL 50 y la DL 95, que fueron de de 0.76 y 1.45 ppm, respectivamente (Tabla 4). Tabla 4. DL 50 y DL 95 del insecticida Temephos sobre la mortalidad de A. aegypti, obtenidas mediante el modelo de regresión Logit. Localidad Marmato Viterbo Risaralda DL 50 DL ppm 1.45 ppm Con la determinación de las dosis letales se puede concluir que se necesita aplicar concentraciones altas del insecticida Temephos (1,45 ppm) para matar el 95% de las larvas de A. aegypti, lo que indica que el insecto ha venido adquiriendo resistencia al producto, tal como viene ocurriendo en las localidades de Palestina y Arauca, debido posiblemente a las aplicaciones indiscriminadas y calendarizadas que realizan los pobladores de las diferentes localidades estudiadas. agron. 18 (1): 69-76, 2010 AGRADECIMIENTOS Los autores agradecen a la Dirección Territorial de Salud de Caldas por el financiamiento de la investigación.

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