OBTENCIÓN DE EXTRACTOS CON EFECTO LARVICIDA DE Euphorbia trigona, Euphorbia hyssopifolia Y Euphorbia prostrata PARA EL CONTROL DE Aedes aegypti

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2 OBTENCIÓN DE EXTRACTOS CON EFECTO LARVICIDA DE Euphorbia trigona, Euphorbia hyssopifolia Y Euphorbia prostrata PARA EL CONTROL DE Aedes aegypti Silva Belmares Sonia Yesenia 1, Colunga Urbina Edith Madaí 1, De la Garza Rodríguez Iliana Margarita 1, Flores Celedón Ruth Mibzary 1, Villa Silva Perla Yaneth 1. 1) Laboratorio de Química Analítica, Facultad de Ciencias Químicas, U A de C, Blvd. V. Carranza e Ing. José Cárdenas Valdés. A.P. 935, C.P , Saltillo Coahuila 1. Introducción En la actualidad México se ve afectado por el aumento en la población de Aedes aegypti, agente transmisor del virus del dengue (1-3). El uso de plantas con propiedades insecticidas es una técnica ancestral usada en África y América Central, sin embargo con la aparición de los insecticidas sintéticos su uso decreció. En los últimos años, debido a la problemática de la contaminación ambiental, generación de residuos tóxicos y resistencia de las plagas a estos insecticidas, ha resurgido la búsqueda de plantas con efecto bioinsecticida (2-4). En México existe una gran biodiversidad de plantas de la familia Euphorbiaceae con potencial larvicida, ya que esta familia se caracteriza por ser un grupo plantas con propiedades tóxicas. Euphorbia trigona, Euphorbia hyssopifolia y Euphorbia prostrata pertenecen a este grupo y se desconoce su uso como agentes insecticidas (5). E. trigona, es una especie originaria de Sudáfrica occidental, donde es utilizada como antiverrucoso y antisifilítico (6). E. hyssopifolia es una especie considerada como maleza y E. prostrata ha sido probada por su propiedad antiinflamatoria. Se ha encontrado actividad larvicida en extractos de otras especies de familia Euphorbiaceae como: Euforbia hirta (LC 50 =272.36) y de los aceites esenciales de Croton argyrophyloides (LC 50 =102 ppm) y Croton sonderianus (LC 50 =104 ppm) (7-8).

3 Ésta investigación contribuye a la búsqueda de nuevos insecticidas de origen botánico que puedan servir como alternativa para el control de ésta plaga en el futuro. Objetivo Obtener extractos de Euphorbia trigona, Euphorbia hyssopifolia y Euphorbia prostrata y evaluar su actividad larvicida sobre Aedes aegypti. Materiales y Métodos Obtención del extracto La extracción de las plantas se llevó a cabo con el material seco y molido. Se utilizaron 500 gramos del material vegetal triturado de E. trigona (tallos), E. hyssopifolia (parte aérea) y E. prostrata (parte aérea). La extracción se realizó a reflujo constante con metanol, cloroformo y éter de petróleo, en una relación 20/200 (g planta/ml de solvente), los extractos obtenidos se secaron en rotavapor, se determinó el porcentaje de recuperación y se almacenaron a 25 C. Determinación de la actividad larvicida Se preparó una solución madre de 2,500 ppm de los extractos obtenidos, a partir de ésta se prepararon diluciones que fueron evaluadas sobre larvas de A. aegypti. Los bioensayos se desarrollaron con 10 larvas en un volumen de 10 ml. Se probó un control negativo (Blanco) y un control positivo (Malatión). Se determinó la CL 50 de los extractos y del control positivo por el método de regresión lineal simple. Se establecieron diferentes rangos de trabajo en ppm entre para los extractos metanólicos de las especies estudiadas para mantener la linealidad en las pruebas. Los rangos de trabajo de los extractos metanólicos de E. hyssopifolia fueron de (100, 200, 400, 800 y 1600);

4 el metanólico de E. trigona de (1000, 1200, 1400, 1600 y 1800) y mientras que el de E. prostrata de (200, 300, 400, 500 y 600); los extractos clorofórmicos de todas las plantas se probaron a de (100, 250, 500, 1000 y 2000). Los extractos etéreos de todas las plantas se establecieron en un rango de (50, 100,200, 400, 600, 800 y 1000). Resultados y Discusión Los resultados del porcentaje de recuperación de los extractos obtenidos mostraron mayores rendimientos de las plantas E. trigona y E. prostrata, observándose mayor obtención del extracto metanólico y etéreo de E. trigona, mientras que de E. prostrata se obtuvo mayor rendimiento del extracto clorofórmico. Los resultados se muestran en la tabla 1. Tabla1.- Porcentajes de recuperación de plantas de la familia Euphorbiaceae % de recuperación de los extractos Planta Metanólico Clorofórmico Éter de petróleo Euphorbia trigona 26.8 ± ± ± 0.13 Euphorbia hyssopifolia 5.4 ± ± ± 0.01 Euphorbia prostrata 7.06 ± ± ± 0.01 Los resultados se muestran como el promedio y la desviación estándar, con n=3 Las pruebas con larvas de A. aegypti mostraron actividad larvicida de los extractos metanólicos de E. trigona, y E. hyssopifolia; observándose mayor actividad del extracto metanólico de E. hyssopifolia seguida por la actividad presente en E. trigona. Además se encontró que los extractos etéreos de E. hyssopifolia y E. prostrata presentan actividad larvicida, encontrándose mayor efecto del extracto etéreo de E. prostrata el cual resulta prometedor como agente bioinsecticida. Los extractos clorofórmicos no mostraron actividad a las concentraciones probadas en ninguna de las especies del género Euphorbia probadas. El

5 control positivo mostró una CL 50 de 0.78, ninguna de las actividades de los extractos probados es comparable al malatión, esto puede deberse a que el principio activo se encuentra en baja concentración en los extractos, sin embargo una vez purificado puede presentar efecto similar o mayor al malatión (7-8). Los resultados de estas pruebas se observan en la tabla 2. Tabla 2.- Efecto larvicida de diferentes especies de la familia Euphorbiaceae CL 50 ppm de los extractos Planta Metanólico Clorofórmico Éter de petróleo Euphorbia trigona 1, NPA NPA Euphorbia hyssopifolia 1, NPA 1, Euphorbia prostrata NPA NPA CL 50: concentración letal que mata al 50 porciento de la población, NPA= no presentó actividad a las concentraciones probadas. Conclusiones Se encontró mayor actividad larvicida de los extractos metanólicos de E. hyssopifolia y de E. trigona, así como de los extractos etéreos de E. hyssopifolia y E. prostrata, encontrándose mayor efecto del extracto etéreo de E. prostrata con porcentaje de recuperación del 5.82 ± 0.01, del cual se puede purificarse el principio activo y compararse con el control positivo dando lugar a una segunda etapa de investigación. Agradecimientos A la Facultad de Ciencias Químicas, Coordinación General de Estudios de Posgrado e Investigación y Dirección de Planeación de la Universidad Autónoma de Coahuila, por el apoyo brindado en la convocatoria 2009 de estancias académicas, para la realización de trabajo de investigación. Referencias 1. Espinoza Gómez, F.; Hernández Suárez, C.M.; Rendón Ramírez, R.; Carrillo Álvarez, M.L.; Flores González, J.C. Interepidemic transmission of

6 dengue in the city of Colima, Mexico. Salud Pública Mex. 45(5): (2003). 2. Mercado Hernández, R.;, Fernández Salas, I.; Villarreal Martínez, H. Spatial distribution of the larval indices of Aedes aegypti in Guadalupe, Nuevo León, Mexico, with circular distribution analysis. J Am Mosq Control Assoc. 19(1):15-8 (2003). 3. Rodríguez Tovar, M.L.; Ortega Martínez, M.G. Aedes albopictus in Muzquiz city, Coahuila, Mexico. J Am Mosq Control Assoc. 10(4):587 (1994). 4. José A. Villarreal-Quintanilla y Juan A. Encina-Domínguez. Plantas vasculares endémicas de Coahuila y algunas áreas adyacentes, México. Acta Botanica Mexicana 70: 1-46 (2005)1. 5. Mitchell J. and G. Breyer. The medicinal and poisonus plants of southern and eastern Africa. Second edition. E& S. LIVINSTONE LTD. Great Britain pp 429,430, Martínez M. Plantas útiles de México. 2 a edición. Ed. Botas. pp Rahuman AA, Gopalakrishnan G, Venkatesan P, Geetha K. Larvicidal activity of some Euphorbiaceae plant extracts against Aedes aegypti and Culex quinquefasciatus (Diptera: Culicidae) Parasitol Res Apr;102(5): Epub 2007 Dec Lima MG, Maia IC, Sousa BD, Morais SM, Freitas SM. Effect of stalk and leaf extracts from Euphorbiaceae species on Aedes aegypti (Diptera, Culicidae) larvae Rev Inst Med Trop Sao Paulo Jul-Aug;48(4):211-4