Bioindicadores en los reactores de fangos activados en la EDAR Guadalete

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1 Resumen La bioindicación, técnica basada en la observación microscópica del fango activo, es una herramienta útil para el control de los procesos de depuración biológica. Se pretende demostrar la efectividad de esta técnica mediante su aplicación en el estudio de un sistema de fangos activados estable, sin cambios bruscos en sus parámetros operacionales. Algunos de los microorganismos observados servirán de indicadores del estado del proceso y de la calidad del efluente. Palabras clave: Agua residual, Bioindicadores, EDAR, Fangos activados, Rendimiento. Bioindicadores en los reactores de fangos activados en la EDAR Guadalete Técnica para controlar su funcionamiento Por: Eva María Narbona Valle#*(Licenciada en Ciencias del Mar). Laura Isac Oria* (Licenciada en Biología). Julián Lebrato Mtnez.* (Director del Grupo I+D de Tratamiento de Aguas Residuales) Ángel Martínez# (Jefe de Planta de EDAR Guadalete). #PROSEIN, S.A. Polígono Industrial El Portal, s/n Jerez de la Fra. (Cádiz). Tel.: *GRUPO T.A.R. Escuela Universitaria Politécnica C/ Virgen de África, nº Sevilla Tel.: Abstract 28 Bioindicators in the activated sluge reactors in the Guadalete Waste Water Plant. The bioindication, the technique based on the microscopic observations on the activated sludge, is a useful tool to control the biologic depuration process. The affectivity of this technique can be shown through its application in the study of a stable activated sludge process, which doesn't show strong changes in its operational parameters. Some of the observed microorganisms will be used like indicators of the state of the process and the quality of the effluent. Keywords: Waste water, Bioindicators, WWP, Activated sludge, Performance. 1. Introducción La bioindicación, técnica basada en la observación microscópica del fango activo, es una herramienta de control de los procesos de depuración biológica que, si bien, se considera un método sencillo y rápido, aún sigue siendo un punto débil para muchos analistas. La escasa bibliografía referente a la efectividad de esta técnica hace que se dude a la hora de su implantación. Además, dicha bibliografía concierne, esencialmente, a situaciones bajo condiciones de laboratorio o bien a estudios referentes a sistemas en fase de arranque (Madoni, 1982; Gómez, 1999). Por el contrario, el número de estudios relativos a procesos estabilizados es mucho menor, quizás por la dificultad que supone correlacionar los cambios de la microbiota en tales casos con los parámetros de depuración. En el presente artículo se analiza la evolución seguida por la microfauna en un sistema de depuración por fangos activados estable, sin cambios bruscos en los parámetros de control y con una calidad buena del efluente depurado. El objetivo último es demostrar que la bioindicación puede resultar una técnica valiosa, en cuanto al aporte de información útil, para el seguimiento del proceso de depuración y para la obtención de un efluente de calidad. 2. Generalidades sobre el proceso de depuración El proceso de depuración de las aguas residuales urbanas, en una EDAR convencional, incluye una serie de tratamientos, a través de los cuales se va reduciendo la carga contaminante del agua residual. El tratamiento biológico se basa en la descomposición de la materia orgá-

2 Tabla 1 Criterio de cuantificación para las bacterias filamentosas y los pequeños flagelados. DENSIDAD MUY BAJA BAJA MEDIA ALTA MUY ALTA VALOR nica por determinados grupos de microorganismos, principalmente bacterias y protozoos, que la utilizan como sustrato para la obtención de energía. Dentro de los procesos de depuración biológica aerobia, merecen especial atención los denominados de Cultivo en Suspensión o de Fangos Activos. En estos procesos, se pone en contacto el agua residual con los microorganismos, que se encuentran en suspensión, en sistemas aireados y agitados, conocidos como balsas de aireación o reactores biológicos. Este trabajo se centra en el estudio de las poblaciones microbianas de los fangos activos de las balsas de aireación. En los estudios previos existentes sobre el papel de los microorganismos en el proceso de depuración de las aguas, además de las bacterias como consumidoras de la carga orgánica del medio, se tiende a destacar la importancia de los protozoos. (Salvadó, 1995). Ello, debido a tres razones fundamentales: a) son consumidores directos de la materia orgánica, contribuyendo a su disminución en las aguas; b) son consumidores de bacterias, con lo que ayudan a regular las poblaciones bacterianas; c) al procesar la materia orgánica excretan una sustancia mucilaginosa que ayuda a la formación de flóculos. En el presente estudio se ha relacionado la composición microbiológica del reactor con sus parámetros operacionales: oxígeno disuelto, carga másica, índice volumétrico del fango, edad del fango y sólidos suspendidos en el licor mezcla. Además, se ha relacionado con los parámetros característicos del efluente depurado: demanda biológica de oxígeno y sólidos en suspensión, con el objeto de analizar la incidencia de los microorganismos en el proceso de depuración. 3. Material y métodos Los datos reflejados en este artículo proceden de observaciones al microscopio óptico de muestras puntuales de fango activo tomadas de las dos balsas de aireación en funcionamiento de la EDAR Guadalete (Jerez de la Frontera, (Cádiz)), durante el período comprendido entre el 15 de Diciembre de 1997 y el 29 de Mayo de A partir de un volumen de 25 ml de cada una de las muestras, se llevaron a cabo conteos de microorganismos observando bajo el microscopio óptico una media de 5 gotas por cada reactor (50 µl/gota). Para la caracterización de las bacterias filamentosas se hizo uso Tabla 2 Composición de la microfauna identificada en los reactores biológicos BACTERIAS BACTERIAS Tipo FILAMENTOSAS Haliscomenobacter hydrossis. Nostocoida limicola I y II. Microthrix parvicella. Streptococcus spp. FLAGELADOS Epistylis spp. PERITRICOS Opercularia spp. Vorticella spp. HOLOTRICOS Litonotus spp. PROTOZOOS CILIADOS Colpidium spp. ESPIROTRICOS Euplotes spp. Stylonychya spp. SUCTORES Tokophrya spp. Podophrya spp. ROTÍFEROS Encentrum spp. METAZOOS Keratella spp. NEMATODOS Monhystera spp. 29

3 30 de diversas tinciones: la de Gram, la de Neisser y la de vaina, procediéndose a su observación bajo un aumento de En dicha caracterización se siguieron los procedimientos y la clasificación que aparecen recogidos en EMASESA, Para la cuantificación de las bacterias filamentosas y los pequeños flagelados se adoptó, como criterio, la asignación de un valor numérico del 1 al 5 (Tabla 1): Para la observación de los protozoos las muestras se visualizaron al fresco, es decir, sin ningún tratamiento y bajo aumentos de 100 y 400 generalmente. La identificación de los protozoos y metazoos se hizo tomando como referencia los criterios recogidos en Streble & Krauter, De este modo, se obtuvieron datos diarios sobre la cantidad de microorganismos y datos referentes a los parámetros operacionales de cada balsa: carga másica (CM), oxígeno disuelto (OD), índice volumétrico del fango (IVF), edad del fango (EF) y sólidos en suspensión del licor mezcla (MLSS). Así mismo, se tienen datos sobre la calidad del efluente, demanda biológica de oxígeno (DBO 5 ) y sólidos en suspensión (SS). (PROSEIN, 1998). El tratamiento de los datos se basó en la obtención de representaciones gráficas de los valores de cada parámetro con respecto a los datos de densidad de cada microorganismo. Para ello se utilizó la hoja de cálculo Microsoft Excel y se procedió de la siguiente manera: 1. Se ordenan en clases numéricas los datos para cada parámetro a analizar. 2. Se seleccionan los datos correspondientes de los microorganismos en cada rango y se obtiene el valor promedio en cada caso. 3. Se realizan representaciones gráficas de estos valores medios. Por razón de comodidad, se utilizaron sólo los datos referentes a número de individuos medio por gota observada (50 µl), en lugar de número total de individuos por litro de Fig. 1. Evolución seguida por los microorganismos en los reactores a lo largo del período de estudio. licor mezcla de las balsas. Para pasar de un dato a otro basta con multiplicar por Resultados 4.1. Caracterización de la biomasa Los resultados microbiológicos indican que la composición de la biomasa se mantuvo estable durante el período de estudio. Los microorganismos que se han identificado durante el período de observación quedan reflejados en la Tabla 2. Fig. 2. Evolución seguida por algunos ciliados durante el período de estudio. Se encuentra que los microorganismos dominantes fueron los ciliados peritricos del Género Epistylis hasta principios de Abril, y los del Género Opercularia a partir de entonces. Tan sólo, durante un breve período de elevadas precipitaciones (24-31 Diciembre), los ciliados holotricos del Género Litonotus dominan en lugar de los peritricos. (Fig.1 y 2). En lo referente a los valores de los parámetros operacionales, los resultados también sugieren estabilidad, no siendo significativas las

4 Tabla 3 Parámetros operacionales medios de los reactores y del efluente. FECHA O.D. IVF M.L.S.S. CM EF DBO SS 15 a 23 de Dic a 31 de Dic ª quincena Ene ª quincena Ene ª quincena Feb ª quincena Feb ª quincena Mar ª quincena Mar ª quincena Abr ª quincena Abr ª quincena May ª quincena May CLAVE: O.D.: oxígeno disuelto en línea (mg/l). I.V.F.: índice volumétrico del fango. M.L.S.S.: sólidos en suspensión del licor mezcla (mg/l). C.M.: carga másica (kg/kg). E.F.: edad del fango (días). DBO5: demanda biológica de oxígeno (mg/l). S.S.: sólidos en suspensión (mg/l). Fig. 3. Representación de densidades de algunos ciliados frente a la carga másica del reactor. oscilaciones y diferencias observadas, en ocasiones, en dichos valores a lo largo del período de estudio. Por esta razón y con objeto de reflejar los datos obtenidos de una manera más cómoda, en las Tablas 3 y 4, se muestran los valores medios quincenales entre Enero y Mayo. Para representar la situación anómala ocurrida en los días de Diciembre, los valores se promediaron por separado desde el 15 al 23 de Diciembre y desde el 24 al 31 de Diciembre. Así mismo, y dado que la evolución de las dos balsas, a lo largo del período de estudio, es paralela los datos corresponden a los promedios de dichas balsas, no existiendo diferencias significativas entre los dos reactores biológicos. En la Tabla 4 se reflejan las densidades de aquellos microorganis- 32 Fig. 4. Representación de algunos microorganismos frente a los niveles de oxígeno de los reactores.

5 Tabla 4 Densidades medias de los microorganismos más frecuentemente observados. FECHA Nº SPP EPYST OPERC VORT LIT EUPL SUCT ROT NEM HALIS NLI STREP FLAG 15 a 23 de Dic a 31 de Dic ª quincena Ene ª quincena Ene ª quincena Feb ª quincena Feb ª quincena Mar ª quincena Mar ª quincena Abr ª quincena Abr ª quincena May ª quincena May NºSPP: número de especies o géneros. EPYST: Epystilis spp. OPERC: Opercularia spp.vort: Vorticella spp. LIT: Litonotus spp. EUPL: Euplotes spp. SUCT: Ciliados suctores. ROT: Rotíferos. NEM: Nematodos. HALIS: Haliscomenobacter hydrossis. N.L.I Nostocoida limicola I. STREP: Streptococcus spp. FLAG: número de flagelados. mos que se han observado, de forma generalizada, durante todo el período de estudio. 5. Relación con los parámetros operacionales de la balsa La evolución de los microorganismos en relación con los parámetros operacionales de las balsas de aireación, aparece representada gráficamente en las Figuras 3, 4 y 5. De la observación de estas figuras se puede extraer lo siguiente: 1. La evolución de los ciliados peritricos del Género Epistylis y los valores de carga másico en los reactores muestran comportamientos inversos; esto es, densidades altas de estos microorganismos se corresponden con estadíos de baja carga en el reactor (Fig. 3). 2. Se observa una relación directa entre el aumento de la carga másico en las balsas y las densidades de individuos de los Géneros Opercularia y Vorticella. Esta misma evolución ha sido hallada en el G. Euplotes, creciendo su densidad conforme lo hace la carga de las balsas (Fig. 3). 3. Se observa una relación inversa entre la evolución de los niveles de oxígeno disuelto en los reactores y el desarrollo del Género Opercularia. Los individuos de este grupo presentan una mayor densidad en los casos en los que el oxígeno se encuentra en niveles menores (Fig. 4). 4. Al analizar la evolución de las bacterias filamentosas, según los valores de oxígeno disuelto registrados, se observa una tendencia a frenar su desarrollo conforme aumenta el nivel de oxígeno en las balsas. (Fig. 4) 5. Las bacterias filamentosas presentan, en líneas generales, mayor densidad cuando los valores del índice volumétrico de fango del reactor también son más elevados. (Fig. 5) 33

6 34 Fig. 5. Representación de las densidades de algunas bacterias filamentosas frente a IVF. Fig. 6. Representación de las densidades de algunos microorganismos frente a los valores de DBO del efluente. Fig. 7. Representación de las densidades de algunos microorganismos frente a los valores de SS del efluente. 6. Relación con la calidad del efluente La evolución seguida por los microorganismos con respecto a los parámetros de caracterización del efluente (demanda biológica de oxígeno y sólidos en suspensión) aparece recogida en las Figuras 6 y 7. De los resultados se puede extraer lo siguiente: 1. El parámetro DBO 5 aumenta de valor en las ocasiones en las que se encuentra un número bajo de ciliados reptantes del Género Euplotes, una densidad elevada de Streptococcus spp. y un número mayor de H.hydrossis. También, en las situaciones donde Opercularia spp. refuerza su presencia en las balsas y Epistylis spp. presenta un desarrollo menor. (Fig. 6). En estos casos la calidad del efluente empeora. 2. Se observa un aumento en los sólidos en suspensión del efluente al darse elevadas densidades de organismos flagelados y de Opercularia spp. en los reactores. Este hecho también se refleja al disminuir las poblaciones de Vorticella spp., Litonotus spp., Euplotes spp., los ciliados suctores y H.hydrossis (Fig. 7). La calidad del efluente en estas situaciones se ve reducida. 3. Se hace patente la independencia del aumento/descenso de DBO 5 respecto a la presencia de los microorganismos siguientes: Nostocoida limicola, los rotíferos y nematodos. Así mismo, se observa que la cantidad de sólidos en suspensión que encontremos en el agua tratada, no va a depender ni del número de especies presentes en la cuba de aireación, ni de las densidades halladas de rotíferos, nematodos y N.limicola. 7. Discusión Del análisis de los resultados obtenidos se deduce lo siguiente: 1. Los ciliados fijos y reptantes presentan una tendencia generalizada a incrementar su número con-

7 Fig. 8. Colonia de individuos del Género Epistylis. Fotografía tomada con microscopio óptico bajo 100 aumentos. Fig. 10. Fotografía tomada bajo 400 aumentos de un individuo del Género Litonotus fijado con lugol. 36 forme aumenta la carga másico del reactor biológico, en un rango de 0.1 a 0.4 kg/kg. Este hecho contrasta con lo anteriormente descrito por algunos autores (Salvadó, 1993), donde se describe un descenso en el número de ciliados al aumentar la carga másico en el mismo rango que nosotros consideramos. Aunque, hay que tener en cuenta que el resto de condiciones de las balsas no se asemeja a las que existen en nuestro caso. Así, por ejemplo, el nivel de oxígeno disuelto resulta muy elevado en comparación con la situación que encontramos en nuestros reactores. Fig. 9. Bacteria filamentosa Haliscomenobacter hydrossis con crecimiento epifítico, bajo tinción de Neisser (Neisser negativo). Fotografía tomada bajo 1000 aumentos. 2. Las especies de bacterias filamentosas identificadas: H. hydrossis, M. parvicella y N.limicola, aparecen asociadas en trabajos anteriores (EMASESA, 1997) con valores bajos de carga en los reactores. Sin embargo, en nuestro caso, no se observa una tendencia clara de las poblaciones de bacterias filamentosas respecto a este parámetro. Cabe pensar que, debido a las pocas diferencias bruscas de carga másico no se pone de manifiesto esta característica. Se comprueba que un aumento en la densidad de especies filamentosas lleva asociado un incremento en el indica volumétrico del fango. Este hecho está ocasionado por las pautas de crecimiento que siguen las bacterias anteriormente mencionadas. Éstas crecen irradiando los flóculos, o bien en el interior de éstos. Si se desarrollan hacia el exterior

8 Fig. 11. Detalle de individuos de una colonia del Género Opercularia. Fotografía realizada bajo 400 aumentos. de los flóculos, hacen que se impida la agregación de éstos manteniéndolos separados; las bacterias filamentosas llegan a formar puentes interfloculares; con lo que disminuye la decantabilidad de los flóculos aumentando así, el indica volumétrico de los fangos. Si las bacterias filamentosas crecen en el interior de los flóculos, éstos presentan una estructura abierta o disgregada, poco compacta; haciéndose necesario un tiempo de decantación mayor, con lo que se incrementa el parámetro IVF. Se aprecia un retroceso en el desarrollo poblacional de bacterias filamentosas cuando se incrementa la cantidad de oxígeno disuelto en los reactores. Este comportamiento se debe a que las especies identificadas de bacterias filamentosas se asocian, tal y como indican otros autores (EMA- SESA, 1997), a bajos niveles de oxígeno. En el análisis de los resultados, se observa que la calidad del efluente disminuye a medida que va decreciendo la densidad de H.hydrossis en la balsa de aireación. Esto puede ser explicado por el hecho de que estas bacterias son capaces de consumir materia orgánica y agregar dicha materia. Si su desarrollo se ve mermado, entonces la agregación es menor y se propicia una situación de flóculos dispersos, además de disminuir la degradación de la contaminación orgánica. Así pues, los flóculos son arrastrados con el efluente en vez de decantar, presentando el agua tratada un mayor contenido en sólidos. Sin embargo, aunque a priori pueda parecer beneficioso una presencia relevante de bacterias filamentosas en los reactores biológicos, la experiencia indica que no se debe propiciar esta situación. No parece aconsejable fomentar la presencia de estas bacterias filamentosas debido a su imposible control una vez han proliferado. No cabe duda de que su presencia es favorable al proceso de depuración, pero siempre bajo condiciones de equilibrio con el resto de los microorganismos que constituyen la fauna del reactor biológico. 3. Los resultados ponen de manifiesto que existe una alternancia en el tiempo de las poblaciones de los Géneros Epistylis y Opercularia; Epistylis spp. retrae su desarrollo cuando comienza a proliferar Opercularia spp. Se comprueba que el Género Opercularia domina cuando existen niveles bajos de oxígeno disuelto en las balsas, hecho que coincide con lo mencionado en la bibliografía (Madoni, 1993). En tales casos, estos individuos desplazan a los del Género Epistylis. Un aumento de ciliados peritricos en el reactor biológico no lleva asociado una mejora en la calidad del efluente. Se detecta que este aumento de ciliados peritricos viene determinado por el desplazamiento del Género Epistylis por el Género Opercularia. Este último prolifera en las balsas de aireación, haciendo que los individuos del Género Epistylis retraigan su desarrollo, y alcanzando densidades mayores que el género desplazado. Por otra parte, se observa que los valores de SS y DBO 5 del efluente disminuyen cuando la presencia de Opercularia spp. en las balsas decrece (Fig. 6). En otras palabras, aumenta la calidad del efluente depurado cuando los niveles de este género son bajos en los reactores. Así, podemos tomar la presencia dominante del Género Opercularia como indicadora de baja calidad en el efluente depurado, atendiendo a la cantidad de sólidos en suspensión y a la demanda biológica de oxígeno, constatando, de esta forma, lo reflejado por otros autores (Madoni, 1993, 1994). Así mismo, se puede considerar que cuando es Epistylis spp. el peritrico dominante en los reactores biológicos, la calidad del agua tratada aumenta y, por consiguiente, se tendrá un mayor rendimiento del proceso de depuración. Si bien, esta estimación no se corresponde con lo descrito par Madoni, Los parámetros del efluente SS y DBO 5 aumentan de valor en las ocasiones en que se ha encontrado un número bajo de ciliados reptantes Euplotes spp. (Fig. 6 y 7), siendo la calidad del efluente depurado menor. Este 37

9 38 hecho constata la importancia de estos ciliados en el proceso de depuración, ya que estos microorganismos se localizan sobre la superficie de los flóculos, reptando sobre ellos y consumiendo las poblaciones bacterianas que se desarrollan en dichos flóculos (Curds, 1982; Madoni, 1994). Su escasa presencia puede evidenciar deficiencias en el desarrollo de los flóculos, ocasionando bajos rendimientos de depuración. Los rotíferos no pueden ser asociados a condiciones específicas de la balsa, ya que se presentan siempre en la misma densidad y en todos los rangos propuestos de oxígeno disuelto, carga másico, índice volumétrico del fango, edad del fango y sólidos en suspensión del licor mezcla. Es obvio por otra parte, encontrar que el estado del efluente no depende de la presencia/ausencia de este microorganismo. 6. Durante el período de estudio se registró una estabilidad tanto en el estado de la biomasa como en los parámetros del reactor biológico y del efluente. Parece previsible que de haberse podido forzar el sistema a condiciones más limitantes, los resultados obtenidos hubieran sido más relevantes. Sin embargo, el estudio no hubiera sido en ese caso un reflejo de la realidad cotidiana del proceso de depuración en las instalaciones estudiadas. 7. Conclusiones 1. La calidad del efluente disminuye a medida que va decreciendo la densidad de Haliscomenobacter hydrossis en las balsas de aireación. 2. Las bacterias filamentosas identificadas presentan mayor desarrollo poblacional al encontrarse niveles bajos de oxígeno disuelto en los reactores; correspondiendo a situaciones de alto índice volumétrico del fango. Fig. 12. Microorganismo del Género Vorticella fijado con lugol. Fotografía realizada con microscopio óptico bajo 400 aumentos. 3. Se pone de manifiesto la inversión que existe entre el desarrollo poblacional de los individuos de los Géneros Epistylis y Opercularia. El desarrollo del primero se ve favorecido con situaciones de baja carga másico en el reactor y, el desarrollo del segundo con niveles altos de carga. 4. Se puede tomar la presencia dominante del Género Opercularia como indicadora de baja calidad en el efluente depurado, en cuanto a la cantidad de sólidos en suspensión y la demanda biológica de oxígeno.. Se puede considerar que cuando el Género Epistylis es el ciliado peritrico dominante en los reactores, la calidad del agua tratada aumenta y, por consiguiente, se tendrá un mayor rendimiento del proceso de depuración. 6. Se comprueba que las especies del Género Opercularia presentan mayor desarrollo con niveles bajos de oxígeno disuelto en las balsas.

10 Fig. 13. Fotografía bajo 400 aumentos de un ciliado suctor del Género Tokophrya. Fig. 14. Imagen del rotífero del Género Keratella obtenida con microscopio óptico bajo 400 aumentos. 40 Se constata la importancia de los ciliados espirotricos del Género Euplotes en el proceso de depuración. 8. Los rotíferos no pueden ser asociados a condiciones específicas de la balsa. 9. Se hace patente la independencia del aumento/descenso en la calidad del efluente respecto a la presencia de los nematodos, los rotíferos y la bacteria N.limicola. Agradecimientos Este trabajo no habría sido posible sin el inestimable apoyo de D. Ángel Martínez (Jefe de Planta E.D.A.R. Guadalete) y de D. Julián Lebrato (director Grupo TAR). Asimismo, quisiera agradecer la imprescindible ayuda prestada por Laura Isac y Miguel Medialdea (investigadores del Grupo TAR), por la empresa AJEM- SA, en cuya EDAR ha tenido lugar este proyecto de investigación, y por los componentes de la empresa PROSEIN, S.A. (Jerez). Bibliografía APHA-AWWA-WPCF. (1992). "Métodos Normalizados para el análisis de aguas potables y residuales". Ed. Díaz de Santos, S.A.. Curds, C.R. (1982)."The Ecology and Role of Protozoa in aerobic sewage treatment proccess". Ann.Rev Microbiol. 36; EMASESA. (1997). "Microorganismos Filamentosos en el Fango Activo". Edita EMASE- SA. Ayuntamiento de Sevilla Gómez, E. (1999). "Bioindicación como herramienta de control de estaciones depuradoras de aguas residuales. Su aplicación en el arranque de la EDAR Guadalquivir (Sevilla)". Tecnología del Agua. N9186 (Marzo 1999). Madoni, P. et al. (1993). "Comparative analysis of the activated sludge microfauna in several sewage treatmentworks". Wat.Res. Vol.27, Nº9, pp , Madoni, P. (1994). "Sludge Biotic Index (SBI) for the evaluation of the bialogical periormance of activated sludge plants based on the microfauna analysis". Wat. Res. Vol.28, Nº1, pp , PROSEIN, S.A., "Memoria de Explotación E.D.A.R. Guadalete"; Salvadó, H. y Gracia, M.P. (1993). "Determination of organic loading rate of activated sludge plants based on Protozoa analysis". Wat. Res. Vol.27, No- 5, pp , Salvadó, H. et al. (1995). "Capability of Ciliated Protozoa as indicators of effluent quality in Activated Sludge Plants". Wat. Res.Vol29. No-4. pp Streble, Heinz and Krauter, Dieter. (1987). "Atlas de los Microorganismos de Agua Dulce". Ed. Omega.